胶质瘤C6肿瘤干细胞蛋白质组学初步分析

目的: 运用蛋白质组学的方法,对C6脑肿瘤干细胞(BTSC)和非BTSC细胞进行配对研究,建立差异性蛋白文库,为探讨胶质瘤病因提供初步线索.方法: 在C6细胞中,参照神经干细胞(NSC)培养条件进行培养.出现典型的神经球后,利用免疫荧光染色检测细胞标记,包括nestin,神经元特异性烯醇化酶(NSE),神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)等,以及诱导分化等方法,鉴定神经球细胞是否为BTSC.收集神经球和非神经球细胞,进行配对,利用双向凝胶电泳(2D-PAGE)检测细胞总体蛋白,分析差异性蛋白点.结果: C6细胞在NSC培养条件下,出现比较典型的神经球.神经球细胞nestin阳性,NSE和GFAP阴性.经诱导发生分化,分化后细胞形态与C6相似,能够表达NSE和GFAP等多种表型细胞标记,证实这种神经球细胞为肿瘤干细胞.在2D-PAGE结果中,C6肿瘤干细胞和非干细胞配对比较,有统计学差异(P＜0.05)的蛋白点共有84个,大于2倍差异蛋白点有50个,大于3倍的有17个,大于4倍的有6个,最大差异倍数为11.607 2.在BTSC中,有55个差异蛋白表达增多(上调),29个蛋白表达下降(下调).结论: 胶质瘤C6细胞系中存在肿瘤干细胞,在蛋白质组学方面与非BTSC细胞有明显差异.     

三苯氧胺对人胶质瘤细胞的生长抑制作用

目的 探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂三苯氧胺对人胶质瘤细胞SHG-44生长抑制作用.方法 SHG-44细胞中PKCα和雌激素受体(ER)的表达用免疫组化,细胞活性分析用台盼兰实验和四唑盐(MTT)比色实验,细胞增殖和凋亡,通过流式细胞术(FCM)进行检测,三苯氧胺作用终浓度为5、2.5、1.25μg/ml;治疗对照为卡氮芥(BCNU),终浓度与三苯氧胺相同.结果 SHG-44细胞中PKCα表达阳性,ER表达阴性.三苯氧胺组与空白对照组相比,细胞衰老、脱落、总数减少;细胞活性下降;G0～G1期细胞比例增加,提示细胞增殖受到抑制;凋亡细胞比例增高.与BCNU组相比,在2.5和1.25μg/ml剂量组中出现G0～G1期细胞比例增加;凋亡细胞比例无统计学差异.结论 三苯氧胺在体外对SHG-44胶质瘤细胞生长具有明显的抑制作用.     

心包内全肺切除治疗肺癌33例分析

心包内全肺切除治疗肺癌３３例分析杨永强，孙群利，欧阳琦，杨建新近八年间，为中晚期肺癌病人行心包内全肺切除手术３３例，男２２例，女１１例，年龄３２～６４岁，平均年龄５０岁。右肺１９例，左肺１４例，鳞癌２２例，腺癌９例，腺鳞癌２例。ＴＮＭ分期：Ｔ２Ｎ２Ｍ...     

维拉帕米对裸鼠胶质瘤U251模型卡氮芥疗效的影响

目的探讨维拉帕米对裸鼠胶质瘤U251模型卡氮芥（BCNU）疗效的影响。方法制作裸鼠胶质瘤U251模型,分别给予BCNU和BCNU＋维拉帕米进行治疗,测量肿瘤大小,用免疫荧光染色检测肿瘤中P-糖蛋白（P-gp）,多药耐受蛋白1（MRP1）和肺耐药相关蛋白（LRP）的表达。结果 BCNU＋维拉帕米组中,肿瘤大小明显比BCNU组减小,尤其是第一至四周更加明显（P〈0.05）。肿瘤细胞中LRP,P-gp和MRP1均为阳性,主要在细胞膜表达,从形态学上两组差别并不明显。结论维拉帕米在体内有明显增加胶质瘤U251对BCNU的敏感性,逆转耐药的作用。     

维拉帕米对胶质瘤细胞卡氮芥化疗敏感性的作用

目的探讨维拉帕米对不同胶质瘤细胞（U251、SHG-44）卡氮芥（BCNU）化疗敏感性的作用及其机制。方法通过免疫组化测定BCNU化疗前后肿瘤细胞中的耐药基因的表达;用MTT实验评估BCNU及维拉帕米作用前后化疗的细胞生长情况。结果 U251细胞中BCNU化疗前耐药基因LRP表达阳性,MRP阴性,P-gp阴性;化疗后LRP仍为阳性,MRP转变为阳性,P-gp为弱阳性,加入维拉帕米后细胞生长情况无明显差异（P〉0.05）;SHG-44细胞中,BCNU化疗前,LRP为阳性,P-gp和MRP1为阴性,化疗后上述基因表达无差异,加入维拉帕米后细胞生长受到明显抑制（P〈0.05）。结论维拉帕米对细胞化疗前后表达不同耐药基因的化疗敏感性具有不同的作用。     

改良型经皮穿刺髓核摘除术的解剖学研究

为改进经皮穿刺髓核摘除术的效果及可行性。本文在１０具１２０例成人标本上，观测第３、第４腰椎横突和相应的椎是盘以及它们与邻近结构的关系，提出了穿刺点是在横突上，下缝及其脊神经前支内，外侧干之间，为手术提供角度和深度的数据；同时提示手术，同时提示手术中如何以腰椎横突为标志，避开有关的血管、神经。此方法经临床应用是可行的。     

心脏外伤伴冠状动脉损伤的救治体会

心脏贯通伤悬心胸外科最为危重的急重症之一。近年来我们共救治8例心脏外伤。除二例来院后未及治疗已死亡,一例左室贯通伤合并冠状动脉左旋支主干离断未能复苏外。其余5例均经及时救治后痊愈出院。资料与方法本组8例病人均为男性,年龄16～35岁。创伤性质均为刀刺伤。伤后20～50分钟内入院,入院时     

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导向神经细胞样细胞分化

目的：研究大鼠骨髓问充质干细胞(MSCs)离体分离和培养方法,诱导MSCs向神经细胞样细胞分化。方法：通过梯度离心从大鼠骨髓中分离有核细胞,进行培养,去除不贴壁的细胞,分离纯化MSCs,对其生长特性进行分析。分别用硫代甘油和β-巯基乙醇对MSCs诱导分化,观察细胞形态变化,免疫组化检测分化细胞中nestin,神经元特异性烯醇化酶(NSE),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,进行鉴定。结果：用含15％胎牛血清(FCS)的L—DMEM培养MSCs,原代细胞贴壁生长,细胞形态均一,为纺锤形,有克隆形成。传代培养时,形态变为成纤维细胞样,生长特征呈“S”形,有较强的增殖能力,于第10代以后开始出现衰老征象。MSCs经硫代甘油和巯基乙醇诱导分化后,细胞形态发生改变,nsetin,NSE和GFAP阳性,分化为神经元或胶质细胞样细胞。结论：大鼠MSCs可以离体分离,培养,并能诱导向神经细胞样细胞分化。     

改良型经皮穿刺髓核摘除术的解剖学研究

为改进经皮穿刺髓核摘除术的效果及手术可行性,本文在10具（20侧）成人标本上,观测第3、第4腰椎横突和相应的椎间盘以及它们与邻近结构的关系。提出了穿刺点是在横突上、下缘及其脊神经前支内、外测干之间;为手术提供了穿刺角度和深度的数据;同时提示手术中如何以腰椎横突为标志,避开有关的血管、神经。此本法经临床应用是可行的。