CIITA反义RNA抑制MHCII类分子表达

为探索利用CIITA (MHCclassIItransactivator)基因反义RNA抑制MHCII类分子表达的可能性 ,为CIITA的应用研究奠定基础。利用RT PCR扩增能与CIITAcDNA第 95至 5 0 0bp互补的片段 ,并构建成pcDNA3/CIITAa 重组质粒 ,脂质体转染法将其转入人HeLa/Raji细胞和猪PIEC/L2 3细胞 ,流式细胞术动态检测反义RNA对人 /猪MHCII类分子的抑制率和抑制程度。结果显示HeLa、Raji、PIEC和L2 3四种细胞MHCII类分子受抑制率分别为 4 6 7% ( 7/ 15 ) ,4 0 % ( 6 / 15 ) ,4 6 7% ( 7/ 15 )和33 3% ( 5 / 15 )。典型受抑克隆细胞MHCII类分子受抑程度高达 85 % ,反义RNA对MHCII类分子的抑制时间持续 35～ 5 0d。CIITA反义RNA能有效抑制人 /猪MHCII类分子的表达 ,它在自身免疫和移植免疫中有一定的应用前景     

只有具备良好的可比性才能真正实现检验结果互认

近日，笔者拜读了贵刊2007年第9期“质量控制”栏目中彭明婷等的文章，受益匪浅。这篇文章对如何实现检验结果的互认、检验结果互认的前提等问题进行了详细的讨论，为解决这些问题提供了思路和具体的办法，具有很强的实用性，对指导各级各类检验人员的实际工作帮助很大。     

Cystatin C评价肾小球滤过功能及其与肾动态显像的比较

肾小球滤过功能的测定具有十分重要的意义。临床上常用的测定肾小球滤过功能（glomerular filtrafion rate, GFR）的指标有：血清肌酐（Scr）、血清尿素氮（BUN）、内生肌酐清除率（Ccr）等，但这些指标常受一些肾性和肾外因素的影响。近年来，肾动态显像测定CFR在临床广泛应用，但它需要特殊大型设备、检查耗时，需要注射造影剂等，有一定的局限性。     

用ROC曲线确定D-二聚体诊断深静脉血栓的临界值及意义

目的 确定D-二聚体定量结果应用于深静脉血栓(DVT)诊断的临界值,并重新评价其临床意义.方法按照DVT的诊断标准收集患者标本237例,以同期检测的其他疾病患者303例为对照.免疫比浊法测定D-二聚体含量,根据结果绘制ROC曲线,并应用统计软件进行分析.结果根据ROC曲线,D-二聚体用于DVT的最佳诊断临界值为1.98 μg/mL(敏感度为51.48％,特异性为62.61％,阳性似然比为1.38).结论以1.98 μg/mL作为D-二聚体诊断DVT的临界值较为合适,可提高其临床诊断的效率.     

小鼠骨髓来源树突细胞体外扩增和鉴定

目的　探讨从小鼠骨髓分离纯化及大量扩增树突细胞 (DC)的方法 ,并对其行免疫表型和形态鉴定。　方法　制备 Balb/ c小鼠骨髓细胞 ,利用 0 .83% NH4 Cl- Tris溶液、抗鼠 CD4 / CD8/ CD4 5R单克隆抗体和补体溶液 ,依次去除红细胞、淋巴细胞、单核 -巨噬细胞、粒细胞等混杂细胞以获得纯化的 DC,再将其培养于含有小鼠重组的粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (m GM- CSF)和白细胞介素 4 (m IL - 4 )的 RPMI 1 6 4 0营养液中 ,培养第 6～ 8天收集悬浮的细胞 ,电子显微镜观察细胞形态并用流式细胞术检测小鼠 DC细胞表面特有的 CD1 1 b抗原和 MHC- 类分子的表达量。　结果　每只小鼠可扩增到 (2～ 4 )× 1 0 6个 DC细胞 ,细胞纯度 >85 % ;细胞表面高水平表达小鼠 DC细胞特异性抗原 CD1 1 b和 MHC- 类分子 ,电镜下细胞形态符合典型的树突细胞形态。　结论　联合应用 m GM- CSF和m IL- 4刺激小鼠骨髓细胞可扩增到大量高纯度的树突细胞     

立体化引导式临床微生物实习带教的建立与实施

立体化引导式实习带教是以完整的微生物标本标准化操作流程为教学轴线,制定实习教学计划。通过实验、问题引导、讨论、讲座、考核和科研等多种方式的立体化应用．引导实习生完成对微生物“检验全过程”的学习,培养学生临床科学思维方法、分析能力、实践能力乃至独立工作能力。再根据标准操作流程制定相对应的量化实践评价标准,考核实习生对检验流程中各项职业技能的实际掌握情况及综合应用的水平。这一带教模式体现了现代检验医学的工作理念,并能更加科学、客观地评估人才的培养质量和教学质量。自实施以来提高了实习生的综合职业素质,为其毕业后走上工作岗位做好准备,得到实习生的高度评价,并提升了微生物实验室实习带教的水平。希望这一实践经验的推广会成为检验医学教育发展的一个有益尝试。     

MHCⅡ类反式激活因子基因的克隆、鉴定及初步功能测定

目的 克隆MHCⅡ类反式激活因子（class Ⅱ rtansactivator,CⅡTA）基因并进行初步功能测试,为CⅡTA的应用研究奠定基础。方法 RT－PCR扩增CⅡTA基因,将其克隆到pGEM-T载体上并进行酶切和测序鉴定,用EcoRⅡ、XhoⅠ将CⅡTA定向克隆到表达载体pcDNA3上,用脂质体转染法将pcDNA3/CⅡTA转入HeLa细胞;流式细胞术观察细胞表面HLA－DR／DQ的表达变化。结果 成功克隆CⅡTA基因,CⅡTA的转入使HeLa细胞表面表达HLA－DR／DQ分子。结论 转入CⅡTA能使HeLa细胞表面表达MHCⅡ类分子表达,CⅡTA参与调控MHCⅡ类基因的转录和表达。     

改良显色平板在筛查碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌中的性能评价

目的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)的感染是威胁人类健康的重要卫生问题。建立一种快速、准确的筛查方法是应对这种威胁的关键措施;本研究旨在制备快速检测CRE的改良显色平板并对其性能进行评价。方法以传统的PCR方法为参考方法,用临床标本分离出的49株CRE及24株非CRE对3种改良显色平板的敏感度和特异度进行评价;其中,21株CRE用于三种改良平板的检测限评价。结果亚胺培南改良显色平板的敏感度为83.7%(41/49),特异度为100%(24/24)。美罗培南改良显色平板的敏感度为87.8%(43/49),特异度为100%(24/24);厄他培南改良显色平板的敏感度为93.9%(46/49),特异度为95.8%(23/24)。结论三种改良显色平板均具有较高的敏感度与特异度,且操作简便,无需昂贵的仪器,对人员技术要求低;厄他培南改良显色平板相对于美罗培南与亚胺培南改良显色平板,其还具有检测限低的特点,更适用于临床的推广应用。     

CIITA基因修饰的树突状细胞增强对小鼠肠癌细胞的杀伤及免疫保护作用

本研究旨在探讨修饰后的树突状细胞增强细胞毒性T细胞（CTL）活性的作用，以及对小鼠肠癌细胞的免疫保护作用。