DMD的基因治疗研究进展

Duchenne肌营养不良(DMD)为X连锁隐性遗传性肌病,目前临床无有效治疗手段,基因治疗最具前景。近几年里,基因治疗的研究取得了较大的进展,尤其表现在出现了一些新的基因治疗手段,同时病毒载体的改进也使治疗基因的表达效率有了明显提高,这些进展必将有助于基因治疗的临床实验早日开展。     

人体外周血单核细胞的分离与鉴定

单核细胞在免疫反应中的作用已日益受到重视,但目前对人体单核细胞的研究,除应用斑蝥酊发泡技术外,大多数实验室采用平皿粘附技术从外周血获得单核细胞。我们参照 Gmelig-Meyling 报道的用 Percoll分离人体外周血单核细胞的方法,根据本实验室条件加以修改,并对分离所得各组分细胞进行 T、B、单核细胞百分比的鉴定,及其对植物血凝素(PHA)的反应性的测定。     

肢带型肌营养不良2B型与Miyoshi肌营养不良的研究进展

肢带型肌营养不良 2 B型 (limb- girdle muscular dystrophy2 B,L GMD2 B)和 Miyoshi肌营养不良 (miyoshi m yopa-thy,MM)是由同一个基因突变引起的肌肉系统疾病。本文就这两种肌病的临床表现、基因定位、基因结构及编码产物等方面的研究进展作一介绍     

线粒体肌病患者线粒体DNA的突变分析

目的分析线粒体肌病患者线粒体DNA的突变情况，为疾病诊断提供依据。方法用常规HE、酶组化染色和电镜检查等病理形态学方法对3例线粒体肌病疑似患者进行诊断，并用聚合酶链反应-单链构象多态和DNA测序等方法对患者线粒体DNA中全部22个tRNA基因进行突变筛查。结果3例患者均被确诊为线粒体肌病，其中例1tRNA—VaI基因发生A1627G纯合突变，例2tRNA—Val基因发生A1627G／A杂合突变，例3tRNA—Trp基因发生T5554C突变、tRNA—Arg基因发生A10412C／A杂合突变。结论线粒体DNA中的tRNA基因突变是线粒体肌病的重要病因之一。     

用于国产一步法HBsAg ELISA试剂及确认试验试剂的改进方法

目的延长酶反应时间以提高国产一步法酶联免疫吸附试验(ELISA)乙型肝炎表面抗原(HBsAg)试剂的敏感性和精密度。方法将酶反应时间自30 min延长至120 min,观察检测结果的敏感性和特异性的变化,及其对相关确认试剂确认试验的影响,并与Murex确认试剂检测结果进行比对。结果酶反应时间延长至120 min,HBsAg ELISA试验检测的Cut-off值不变,在检测Murex HBsAg检测结果呈阴性反应的样本时,其结果均为阴性。延长酶反应时间至120 min可以提高检测结果的吸光度(A)值,位于灰区的弱阳性样本的A值可提高1倍左右。常规ELISA结果S/CO值在0.5~1.0区段的22例阴性灰区样本中,在酶反应时间延长至120 min的国产确认试剂检测中有4例样本确认为阳性,该4例样本在Murex确认试验中亦为阳性;S/CO值在1.0~2.0区段的79例阳性灰区样本中,120 min的国产确认试验与Murex确认试验均为50例阳性,2种确认试验结果一致(χ2=0.078,P>0.05)。结论延长国产一步法HBsAg ELISA试剂的酶反应时间可以提高检测的敏感性并适用于相关的确认试验。     

上海城市社区成年人群慢性肾脏病流行病学研究

目的 获取上海城市社区成年人群慢性肾脏病流行病学及其高危人群数据，有助于慢性肾脏病的早期发现、早期诊断、早期治疗及有助于国家卫生政策的制定。 方法 采用多阶段整群随机抽样法对上海市长宁区江苏街道中2596名18岁以上常住居民进行问卷调查并检测肾脏损伤指标及相关危险因素，包括体格检查、尿常规+沉渣镜检、尿白蛋白/肌酐比值（ACR）、Scr、BUN、血尿酸、血糖、血胆固醇（Cho）、血三酰甘油（TG）、血红蛋白（Hb）及肾脏B超等。调查员均经过培训及接受技术指导，同时培训社区居委会有关人员，以便与居民的沟通与联络。3个月后对ACR试纸半定量检查阳性者进行复查。 结果 在2554例资料完整的居民中，白蛋白尿患病率为6.3%；肾功能下降为5.8%；镜下血尿为1.2%。该人群中CKD患病率11.8%，知晓率8.2%。多因素Logistic回归提示，CKD的最强烈危险因素为高尿酸血症，其余依次为肾结石、贫血、糖尿病、腹型肥胖、高血压、年龄。 结论 在上海城市社区人群中，CKD患病率为11.8%，知晓率仅为8.2%。CKD的危险因素为高尿酸血症、肾结石、贫血、糖尿病、腹型肥胖、高血压、年龄。     

上海地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷基因突变与临床表现分析

目的　了解上海地区葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 (G6PD)缺陷的基因突变 ,探讨基因突变与临床表现型的可能关系。方法　应用PCR/限制性内切酶酶解分析法对 42例上海地区G6PD缺乏者进行基因型分析。结果　上海地区G6PD缺陷的基因突变主要是 :cDNA 1376G→T(33.3% ) ,cDNA 1388G→A(31.0 % ) ,cDNA 95A→G(2 1.4% ) ,cDNA 10 2 4C→T(2 .4% ) ,cDNA 493A→G(2 .4% )。结论　上海地区G6PD缺陷的基因突变以我国常见的 3种基因型为主 (85 .7% ) ,临床表现为蚕豆病、新生儿黄疸和药物诱导性溶血     

应用高效毛细管电泳筛检和鉴定血清中M蛋白

目的:应用毛细管区带电泳法(CZE)和毛细管区带电泳-免疫削减法(IS-CZE)对M蛋白进行筛检和鉴定。方法:运用CZE和琼脂糖凝胶电泳(AGE)分别对532例血清进行M蛋白的筛检;用IS-CZE和免疫固定电泳(IFE)对M蛋白阳性的64例标本进行免疫分型。结果:与AGE相比较,CZE筛检M蛋白的阳性率为96.9%;与IFE相比较,IS-CZE分型的符合率为89.1%;自包被固相抗体能满足试验要求。结论:毛细管区带电泳可高效、快速完成M蛋白的筛检和鉴定,适合临床推广。