重组野生型p53基因转染人骨肉瘤细胞株体外实验

目的：将外源性野生型ｐ５３基因导入人骨肉瘤细胞株，研究野生型ｐ５３蛋白在诱导瘤细胞凋亡中的作用。方法：用ＤＮＡ转染技术将７重组野生型ｐ５３基因ＰＭ４７质粒导入人骨肉瘤细胞株ＨＯＳ８６０３中，用ＰＣＲ技术监测外源性ｐ５３基因在瘤细胞中存在的稳定性；用免疫组化方法检测在地塞米松的诱导下瘤细胞中ｐ５３的表达情况；用相差显微镜去观察凋亡瘤细胞的形态特点；用细胞凋亡原位检测技术标记并统计凋亡的瘤细胞数。结果：成功地将重组野性型ｐ５３基因ＰＭ４７质粒导入人骨肉瘤细胞株ＨＯＳ８６０３中，在ｇｐｔ选择培养基中培养两周后，分离生长出阳性细胞克隆；经ＰＣＲ证实外源性ｐ５３基因在瘤细胞内稳定存在并可随瘤细胞分裂而传给子代；当向培养液中加入１μｍｏｌ／Ｌ地塞松（Ｄｅｘ）后，８ｈ即可用免疫组化方法检测到ｐ５３蛋白的表达并可观察到瘤细胞出现凋亡的一系列形态学改变，转染后的瘤细胞凋亡率高达９０％。结论：当人骨肉瘤细胞株中重组野生型ｐ５３基因诱导过表达时，瘤细胞呈现凋亡，本实验为骨肉瘤的基因治疗提供了理论依据。     

LEICA SM2000R滑动式切片机的使用及维护

<正>由于价格偏高,实验室通常只配有一台切片机,故一旦切片机出现故障,病理实验室就很难开展工作,会耽误发病理报告的时间.因此作为实验室的负责人,在仪器使用前,必须熟悉该仪器的性能,包括使用、保养及简单的维修.     

西米替丁和Ranitidine对迟发性超敏反应的影响

一般认为,西米替丁对实验动物和人的免疫增强,与逆转组胺H_2受体调节的免疫抑制有关。本文报道,ranitidine 对小鼠用SRBC 引起的迟发性超敏反应(DTH)的影响,并与西米替丁作比较。实验用12周龄的BALB/C 小鼠,皮下注射0.4ml     

8个月女婴自发性一侧附件扭转坏死l例报告

1　病历简介患者 ,女性 ,8M。因发现左侧腹股沟区肿物突出 4天而入院。入院时T3 6.5℃ ,P14 0 /min ,腹软 ,无压痛及反跳痛 ,无移动性浊音 ,肠鸣正常 ,于左侧腹股沟区可见一大小约 3cm× 2 .5cm椭圆形肿物 ,用手将肿物向腹腔内推送时肿物不能还纳。入院诊断 :左侧腹股沟嵌顿性斜疝。入院后于当天下午在全麻下进行剖腹探查术 ,术中探查见左侧附件扭转 3 60度 ,大部分卵巢及输卵管伞部瘀血坏死。行左侧卵巢及输卵管和部分切除术。手术过程顺利。切除组织送病理检查 ,病理报告 :左侧卵巢组织及输卵管伞部镜下见大部分组织出血变性坏死。术后…     

米非司酮联合菊藻丸治疗子宫肌瘤34例临床观察

目的:观察米非司酮联合菊藻丸治疗子宫肌瘤的临床有效性、安全性。方法:筛选68例子宫肌瘤患者,随机分成治疗组和对照组,每组各34例。对照组予米非司酮治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用菊藻丸治疗。观察比较2组患者治疗后的月经量、最大肌瘤体积、总有效率与复发率。结果:2组患者月经量和最大肌瘤体积治疗前后组内比较及治疗后组间比较,差异均有统计学意义(P 0. 05);总有效率治疗组为91. 18%,对照组为82. 35%,组间比较,差异有统计学意义(P 0. 05);随访半年,复发率治疗组为0,对照组为7. 14%,随访1年,复发率治疗组为3. 23%,对照组为14. 29%,2组比较,差异均有统计学意义(P 0. 05)。结论:米非司酮与菊藻丸联合治疗对改善子宫肌瘤患者临床症状、体征具有较好疗效。     

脂质体载体法转染成纤维细胞的最佳条件

目前基因转染的方法有多种,其中磷酸钙ＤＮＡ沉淀法应用较为广泛,但其转化效率不高,且不太适用于悬浮细胞和原代细胞培养的上皮细胞的转化〔１〕。本文介绍的Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ是一种新的多阴离子转染脂质体,其独特的精胺基团强负电子头部可自发地与ＤＮＡ...     

乳腺癌组织中HER2、ERα、ERβ、PR的表达及其相关性分析

目的探讨雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）、孕激素受体（PR）、人类表皮生长因子受体2（HER2）在乳腺癌组织中的表达及其与TNM分期和腋窝淋巴结状况的关系。方法随机选择我院在2004年12月至2007年12月收治的HER2高表达（＋＋＋）51例与无表达（-）53例乳腺浸润性导管癌病例，分别检测乳腺癌组织的ERα、ERβ、PR的表达水平，分析其与TNM分期、腋窝淋巴结转移等临床指标的相关性。结果104例乳腺癌患者，TNM分期为I期的占14．42％，Ⅱ期占62．50％，Ⅲ期占19．23％，Ⅳ期占3．85％；HER2阳性的淋巴结转移率为41．18％，HER2阴性的转移率为47．5％；ERα、ERβ、PR的阳性表达率分别为52．88％、63．46％、73．08％。ERβ与ERα、PR的表达呈正相关（P〈0．01），与HER2的表达负相关（P〈0．01）；ERα与PR的表达正相关（P〈0．01），与HER2负相关（P〈0．01），PR与HER2的表达负相关（P〈0．05）；ERα、ERβ、PR、HER2的表达与淋巴结转移情况及TNM分期无显著相关性。结论HER2作为乳腺癌预后不良的重要指标与作为乳腺癌预后良好的重要指标ERα、ERβ、PR的表达呈负相关，与TNM分期及腋窝淋巴结转移状态未显示明显相关性。     

正交试验优选芪句颗粒水提取工艺

目的:优选芪句颗粒的提取工艺.方法:以黄芪甲苷含量和出膏率为评价指标,采用L9(34)正交设计优选芪句颗粒提取工艺.结果:最佳水提取工艺为加18倍量水提取2次,每次1h.结论:该优选工艺合理可行.     

高效液相色谱法测定雄芍颗粒中芍药苷的含量

目的:采用高效液相色谱法测定雄芍颗粒中芍药苷的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱:Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86);流速:1.0 mL/min;检测波长:230 nm。结果:芍药苷在0.107 8~2.156 0μg线性关系良好(r=0.999 7);平均回收率为99.26%,RSD为2.06%(n=5)。结论:该方法简便、准确、可靠、重现性好,可用于雄芍颗粒的质量控制。     

α1(Ⅰ)型前胶原基因反义重组质粒对成纤维细胞的影响

目的：研究反义RNA对成纤维细胞胶原蛋白的调控作用,探讨基因治疗增生性瘢痕的可能性。方法：将α1（Ⅰ）型前胶原基因片段反向克隆至非整合型哺乳动物表达载体pREP9的多克隆位点中,以构α1(Ⅰ)丧胶原基因反义RNA表达载体pREP9-AScoll,并籍脂质体－lipofectamine将其导入人肺HLF细胞中,运用MTT试验,电镜,3H－氨酸掺入法检测反义RNA表达载体对HLF细胞的影响。结果：外源重组体pREP9-AScoll对胶原蛋白的合成有明显抑制作用,但对细胞增殖无任何影响。结论：α1（Ⅰ）型前胶原基因反义重组质粒能有效调控胶原蛋白的合成,从而有在基因水平防治瘢痕的前景。