细胞共培养技术及其在干细胞临床研究中的应用

细胞共培养技术是指在体外将各种不同的细胞置于同一培养环境中,近似模拟体内微环境的一种方法.该系统能很好地展现细胞与细胞之间,细胞与微环境之间的联系,在了解细胞内在机制方面具有重要的理论意义.该方法广泛应用于干细胞研究领域.该文就共培养的研究方法及在干细胞领域中的应用作一综述.     

白花蛇舌草-半枝莲药对组分对结肠腺癌Lovo细胞生物学行为的影响

摘要:目的　探讨白花蛇舌草-半枝莲药对组分对结肠腺癌Lovo细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响及作用机制。方法　将白花蛇舌草、半枝莲按质量1∶1进行3次煎煮,获得水提物,后取适量浸膏用石油醚回流脱脂,再以乙酸乙酯进行多次萃取,获得白花蛇舌草-半枝莲药对组分,并计算得率。实验分为对照组（正常培养Lovo细胞）、白花蛇舌草-半枝莲药对组分低剂量组（10 mg/L）、中剂量组（30 mg/L）及高剂量组（50 mg/L）。通过噻唑蓝比色法（MTT）检测各组细胞培养24、48、72 h后的增殖抑制率。各组细胞培养48 h后,流式细胞仪检测细胞周期分布;Transwell实验检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;TUNEL法检测细胞凋亡情况;Western blot法检测Grb2相关结合蛋白1（Gab1）、血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、苏氨酸激酶（Akt）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达情况。结果　化学萃取后的白花蛇舌草-半枝莲药对中主要含有对羟基苯乙酮、野黄芩苷、木犀草素和芹菜素4种化合物,组分得率为0.61%。与对照组相比,低、中、高剂量组细胞增殖抑制率升高,G1期肿瘤细胞比例增加,细胞凋亡指数增高,侵袭细胞数和划痕闭合率明显减小（均P＜0.05）,细胞中Gab1、VEGFR-2、PI3K、Akt、MMP-9、Bcl-2蛋白表达降低,Bax表达升高（均P＜0.05）,且存在剂量依赖性。结论　白花蛇舌草-半枝莲药对组分可抑制结肠腺癌Lovo细胞的增殖,降低其迁移和侵袭能力,诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制Gab1/VEGFR-2/PI3K/Akt信号通路活化有关。     

新疆阿勒泰市四个典型牧民定居点牧民经济收入对比分析

【目的】比较新疆阿勒泰市4个典型牧民定居点牧民定居前后的经济收入状况。【方法】以地处阿勒泰市阿苇滩镇640台地、红墩镇乌勒革村、巴里巴盖乡、北屯市等地的4个典型牧民定居点为调查区,采用问卷和访谈调查的方式,获得牧民定居前后的经济收入数据,分析牧民定居前后的经济收入变化情况。【结果】巴里巴盖乡2817、阿苇滩镇640台地、红墩镇、萨尔胡松乡牧民定居前后总收入及人均收入均有显著(P<0.05)增加。而北屯市定居牧民定居前后总收入及人均收入无显著差异(P>0.05)。【结论】除了北屯市牧民定居点外,阿勒泰市4个牧民定居点的牧民定居后的经济收入明显提高。     

经皮微通道显微手术切除腰椎椎管内肿瘤的疗效

目的探讨经皮微通道显微镜下手术切除腰椎椎管内肿瘤的效果。方法回顾性分析2017年1月至2020年2月经皮微通道显微镜下手术治疗的37例腰椎椎管内肿瘤的临床资料。结果术后病理检查显示,神经鞘瘤20例,脊膜瘤4例,先天性囊肿6例,神经根囊肿5例,肠源性囊肿2例。术后症状均明显改善,未出现切口感染、神经根损伤、硬脊膜损伤、脑脊液漏、脊柱稳定性下降等并发症。术后1周复查腰椎MRI示椎管内肿瘤完全切除;术后6个月,复查MRI未见肿瘤复发。术后1周、3个月及6个月,疼痛视觉模拟量表评分、日本骨科协会评分、Oswestry功能障碍指数均明显改善（P<0.05）。结论经皮微通道显微镜下手术切除腰椎椎管内肿瘤,手术创伤小,具有良好的临床疗效。     

精子DNA碎片率对男性生育力评估的预测价值

目的：探讨精子DNA碎片率（DFI）对男性生育力评估方面的预测价值。方法：选择2016年1月-2018年7月于上海市第十人民医院生殖医学中心就诊的460例男性不育患者纳入观察组,同期107例正常生育男性纳入对照组。计算机辅助精液分析系统（CASA）检测精液常规,精子染色质结构分析检测精子DFI。将精液常规结果分为精液正常、少精子、弱精子和少弱精4类。比较观察组和对照组的精液常规构成比和精子DFI;比较不同年龄（＜30岁,30～39岁,≥40岁）患者精子DFI水平的变化趋势及不同水平精子DFI（≤15%,15%～30%,≥30%）患者的体外受精（IVF）/胞浆内单精子注射（ICSI）的生殖结局。结果：观察组中精液正常、少精子、弱精子、少弱精所占比列分别为22.17%、13.26%、52.62%和11.95%,对照组分别为60.96%、34.59%、1.75%和2.70%。与对照组相比,观察组精液正常比例下降,少精子、弱精子和少弱精比例增加,差异有统计学意义（P＜0.05）。与对照组相比,观察组精子DFI≤15%所占比例下降,DFI≥30%比例增加,差异有统计学意义（P＜0.05）。随着年龄增加,精子DFI≤15%患者所占比例下降,精子DFI（15%～30%）与精子DFI≥30%患者所占比例增加,3组间精子DFI的分布比例差异有统计学意义（P＜0.05）。精子DFI≥30%来源的IVF或ICSI胚胎,其早期流产率显著升高（31%和25%,均P＜0.05）,但受精率、卵裂率、生化妊娠率、临床妊娠率、着床率等指标差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：不育男性的精子DNA碎片率更高,并且随年龄的增加而增加。DFI≥30%的精子受精的胚胎早期流产率较高,影响辅助生殖技术的妊娠结局,因此DFI对不育男性的生育力评估有实用参考价值。     

陕西省居民体力活动状况分析

目的研究陕西省居民体力活动状况,为制定相关干预措施提供基线资料。方法本研究对象来源于2013年全国慢性病及其危险因素监测项目陕西省的样本人群。采用多阶段分层整群抽样法从陕西省17个监测点的样本人群中抽取调查对象,最终获得有效样本10 166人。采用全球体力活动调查问卷(GPAQ)对调查对象进行体力活动调查,按照全球体力活动调查问卷分析指南(GPAQ analysis guide)进行分析,同时利用WHO推荐标准评判体力活动的达标情况。用R 3.3.1软件进行t检验、方差分析和χ~2检验。结果陕西省居民从事高强度和中等强度工作、农业及家务性体力活动所占比例分别为27.46%和80.65%,高强度和中等强度休闲性体力活动比例分别为5.10%和21.21%,交通性体力活动比例为70.00%;日均总体力活动时间为(181.66±1.66)min,工作、农业及家务性体力活动,交通性体力活动,休闲性体力活动时间分别为(136.95±1.51)、(32.62±0.47)和(12.09±0.33)min,平均体力活动代谢当量为(6 264.33±67.05)MET-min/周[(14.92±0.02)MET-h/d],88.97%的居民达到了WHO推荐的每周达到或超过600 MET-min的体力活动标准。结论陕西省居民体力活动水平较好地达到WHO的推荐标准,但以工作、农业及家务性体力活动为主,仍需进一步增加休闲性体力活动的比例和时间。     

HPLC法同时测定七味胃炎片中野黄芩苷、盐酸小檗碱的含量

目的采用HPLC法同时测定七味胃炎片中野黄芩苷、盐酸小檗碱含量。方法色谱柱为Alltima C18（250 mm×4.6 mm,5μm）。采用乙腈-20 mmol/L乙酸铵（pH=4.0）作流动相进行梯度洗脱。流速为1.0 mL/min,在335 nm下检测。结果野黄芩苷在0.13-2.56μg范围内,r=0.999 6,平均回收率为99.2%,RSD平均值为1.14;盐酸小檗碱在0.26-5.162μg范围内,r=0.999 4,平均回收率为99.6%,RSD平均值为1.12。结论本文所建立的HPLC测定方法分析操作易行、结果可靠、重复性好,可应用于七味胃炎片中野黄芩苷和盐酸小檗碱含量的测定。     

超声引导下半自动活检对浅表淋巴结转移癌的应用评价

目的：评价超声引导下半自动活检对浅表淋巴结转移癌的诊断效果。方法在超声引导下采用半自动切割活检针对59例浅表肿大淋巴结徒手穿刺活检。将穿刺组织的病理结果与术后病理或临床随访结果进行对照,评价该技术对浅表淋巴结转移癌诊断效果。结果59例病例中共对59个肿大淋巴结进行穿刺活检,病例取材成功率为100%（59/59）,穿刺取材成功率为80.14%（113/141）,穿刺病理组织学诊断满意率为98.31%（58/59）。穿刺病理组织学结果：淋巴结转移性癌35例（阳性）,非淋巴结转移癌24例（阴性）。术后病理或临床随访结果：淋巴结转移癌36例（A组）,非淋巴结转移癌23例（B组）。该技术对浅表淋巴结转移癌的诊断敏感度为97.22%（35/36）,特异度为95.83%（23/24）,准确率为98.31%（58/59）。结论超声引导下半自动活检对浅表淋巴结转移癌诊断具有敏感度高、特异度高、准确率高的特点。该技术安全,对恶性肿瘤的诊断具有重要意义。     

二元线性回归分析在旋光法测定复方甘露醇注射液含量中的应用

目的:介绍二元线性回归分析在旋光法测定复方甘露醇注射液含量的两种应用方法。方法:先直接测定复方甘露醇标准溶液旋光度α1,然后以钼酸铵或硼砂为增旋剂,与适量的复方甘露醇标准溶液作用后测定旋光度αm或αp,所得数据经二元线性回归分析,求回归方程,然后根据回归方程和样品的旋光度计算出复方甘露醇注射液的含量。结果:不管是钼酸铵还是硼砂为增旋剂,旋光度与甘露醇、葡萄糖的浓度均呈良好的线性关系,钼酸铵为增旋剂回归方程的复相关系数为:r1=0.9998,rm=0.9992;硼砂为增旋剂回归方程的复相关系数为:r1=0.9998,rp=0.9989。甘露醇和葡萄糖回收率均很好。结论:上述两种方法均操作快捷、简便实用,所需的仪器普通,结果准确可靠,重复性好,表明二元线性回归分析与旋光法结合测定复方甘露醇注射液的含量有很好的应用价值,可用于成品和半成品的质控。