基因重组hEGF融合蛋白的发酵条件优化

对hEGF融合蛋白基因工程菌的发酵条件进行优化。结果表明，当起始pH为6．6～7．0，以100ml／500ml的装液量，6％接种量，37℃培养2h，加入0．1mmol／L的IPTG诱导4h后，收获菌体可得到较高的生物量和hEGF融合蛋白表达量。其中IPTG诱导开始时间和菌体收获时间对蛋白表达有显著影响。     

肿瘤抑制基因研究新进展——多肿瘤抑制基因MTS分子生物学简介

人类第9号染色体短臂不到40kb的座位发现了多肿瘤抑制基因(Multiple Tumor Sup-Pressor1和2,MTS1和MTS2)。它们分别编码两种蛋白:前者叫做P16蛋白,抑制依赖细胞周期素激酶 4(Cyclin-dependent Kinase 4,CdK4)。后者比P16小20多个残基,功能推测与P16相近。MTS1基因与p~(53)相比,它在75％的各种癌细胞中发生缺失;而p~(53)基因的缺失率在各种癌细胞中 为50％。P~(16)到目前为止发现的第一个直接控制细胞增殖周期的细胞固有蛋白,而P~(53)控制细胞增殖周期要通过P~(21)发挥抑制作用。     

基因芯片研究与衰老相关免疫基因的表达

目的:利用基因表达谱芯片,研究免疫相关基因在衰老过程中表达水平的改变。方法:分别提取20只20月龄SD大鼠和20只4月龄SD大鼠的脾脏mRNA,并通过逆转录制备成杂交探针;老年大鼠用Cy5d-UTP标记,青年大鼠用Cy3 d-UTP标记。将两种探针等量混合后与包含416个免疫相关基因的cDNA芯片进行杂交。通过扫描仪扫描芯片荧光信号和计算机分析,比较老年组和青年组大鼠脾脏的基因表达水平的差异。同步检测老年组大鼠和青年组大鼠的心、肝、肾和血液中的与自由基相关的生化指标。结果:生化指标检测证实20月龄老年大鼠与4月龄青年大鼠清除自由基的能力有显著的差异,说明其生理机能有显著差异,适用于芯片的研究。而芯片结果显示在所研究与免疫相关的基因中,13个基因在老年大鼠脾脏中表达下调,其中包括参与应激和免疫应答的基因,部分参与细胞增殖、分化的调节基因和参与DNA/RNA修复基因;只有1个基因,即编码良性肿瘤淀粉酶的基因在老年大鼠脾脏中表达特异增高。结论:运用基因表达谱芯片可以帮助我们了解免疫系统在衰老过程中的变化,深入理解衰老的发生和发展机制。     

碱性成纤维细胞生长因子对辐射诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的抑制作用

碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)作为一种多肽类生长因子 ,有着广泛的生理功能。对中胚层和神经外胚层来源的细胞具有促有丝分裂的作用 ,在胚胎发育和组织分化中 ,是形态形成、促细胞分裂和诱导细胞分化不可缺少的因子[1 ] 。近年来 ,许多实验结果表明体外许多因素 ,如化学药物、细胞因子、辐射等都可诱导细胞凋亡[2 ] 。本研究ｂＦＧＦ对辐射诱导的免疫系统胸腺细胞凋亡的调节作用 ,旨在从一个侧面探讨ｂＦＧＦ作用于免疫系统的机理及其在辐射防护中的意义。一、材料和方法1 ｂＦＧＦ :由暨南大学生物工程研究所提供。2 动物照射 :昆明…     

碱性成纤维细胞生长因子对缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性的研究

目的：探讨脑缺血再灌流损伤大鼠血脑屏障是否对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）通透。方法：采用大脑中动脉腔内阻塞模型,股静脉滴注[¹²⁵I]-bFGF,对大脑冠状冰冻切片进行放射自显影,图象分析测定光密度。结果：放射自显影结果显示模型鼠缺血病灶侧影像较健侧及正常鼠浓集。光密度测定结果显示模型鼠病灶侧与其健侧及正常鼠同侧的吸光度值差异显著（P<0.05; P<0.05）。结论：[¹²⁵I]-bFGF经股静脉滴注后,能通过脑缺血再灌流损伤大鼠血脑屏障浓集于缺血脑区。     

经皮肾镜钬激光碎石联合体外冲击波碎石治疗复杂性肾结石57例疗效观察

目的探讨经皮肾镜钬激光碎石(PCNL)联合体外冲击波碎石(ESWL)治疗复杂性肾结石的临床效果。方法我院收治的57例复杂性肾结石患者,均采用PCNL联合ESWL手术治疗,观察手术前后患者的血肌酐、β2-微球蛋白、视黄醇结合蛋白的水平变化情况,通过MDRD方程计算患者的肾小球滤过率(GFR),并观察术后患者不良反应的发生情况。结果患者手术前后血肌酐、β2-微球蛋白和视黄醇结合蛋白的水平差异均无统计学意义(P0.05),患者术后GFR值较术前有显著提高(t=2.733,P0.05)。6例(10.53%)患者出现发热,5例(8.77%)患者出现出血。结论 PCNL联合ESWL治疗复杂性肾结石对患者肾功能的影响较小,能有效提高患者的GFR水平,适合在临床上推广使用。     

尘螨标准化免疫治疗85例哮喘儿童疗效相关指标分析

Objective The scientific basis and the clinical effectiveness of allergen specific immunotherapy (SIT) administered by subcutaneous injection are well established. This study aimed to observe the changes in amount of inhaled corticosteroids, total IgE, specific IgE, peak expiratory flow rate (PEF), etc. during a standardized SIT against house dust mite in allergic asthmatic children. Method Children (5-13 years old) with mild to moderate allergic asthma seen from February 2005 to June 2008 were enrolled into this study. A non- randomized retrospective study was performed. All children were diagnosed sensitive to dust mites, the treatment group accepted standardized dust mite allergen specific immunotherapy. Each fourth injections were defined as observation points, the study took 3.4 years. The investigators recorded the treatment, the cumulative allergen extract, changes of daffy doses of inhaled corticosteroid, peak expiratory flow (PEF), total IgE (TIgE), specific IgE (SIgE). The control group only received inhaled corticosteroids. The daily doses of inhaled corticosteroid and the number of asthma attacks,and the control rate were compared between the 2 groups. Result Totally 85 children were treated with SIT [(7.6 ± 1.4) years], 45 males and 40 females; 50 children received only drug treatment [(7.7 ± 1.5)years], 28 males and 22 females. The cumulative dose of allergen was up to (69.7 ± 4.8) μg after the 20 times injection, the dose of inhaled corticosteroids was significantly less than that in the control group ( t =2. 359, P ＜ 0.05). PEF was significantly higher than that of pre-treatment level ( F = 7.874, P ＜ 0.05 ).TIgE and SIgE had no significant change (t = 0.313, P ＞ 0.05, tDerp = 0.517, tDerf = 0.717,P ＞ 0.05 ). After the treatment, the control rate of the SIT group was 85.5%, that of the control group was 62.0% (X2 =10.150, P ＜0.01). Conclusion The standardized SIT against house dust mite could reduce steroid use in mild to moderate allergic asthmatic children. After ( 38.7± 2.3 ) weeks, the cumulative dose of allergen was up to (69.7 + 4.8) μg, inhaled corticosteroid was significantly reduced. At the end of SIT, 85% of patients obtained complete control of asthma. Total IgE and mite-specific IgE had no significant changes.     

哮喘患儿血清嗜酸细胞趋化酞 白细胞介素 5的测定及其临床意义

近年来研究表明:一些生长因子可能是通过介导女性激素,以改变子宫肌细胞中细胞癌基因和肿瘤抑制基因的活性而促发子宫肌瘤[1]。本研究应用半定量RT PCR方法检测子宫肌瘤组织与正常子宫肌组织中胰岛素样生长因子Ⅰ(IGFⅠ)mRNA、胰岛素样生长因子Ⅱ(IGFⅡ)mR NA表达水平,并分析其表达与月经周期的关系,旨在探讨IGFⅠ,IGFⅡ与子宫肌瘤发生、发展的关系,以期进一步阐述子宫肌瘤的生长机制。1材料与方法1.1标本来源收集2002年12月至2003年2月于中国医科大学第二附属医院及沈阳市第四人民医院妇科因子宫肌瘤行子宫切除术30例患者的新鲜…     

输尿管硬镜钬激光治疗输尿管结石的失败原因及并发症分析（附57例报告）

目的：分析输尿管硬镜钬激光治疗输尿管结石的失败或并发症发生原因,探讨其防治对策。方法：我院2010年6月～2012年6月间行输尿管硬镜钬激光碎石术治疗输尿管结石而发生输尿管内碎石失败及术中术后并发症者57例,结合文献复习对其发生原因进行回顾性分析。结果：8例因输尿管狭窄在上镜过程中发生输尿管穿孔致碎石失败,14例因输尿管上段扩张结石移位进入肾内致碎石失败,1l例出现输尿管壁损伤出血致碎石失败,17例因输尿管迂曲未能到达结石部位而进输尿管镜失败,1例术中发生输尿管黏膜撕脱,6例术后出现不同程度发热。结论：输尿管硬镜钬激光碎石术常出现出血、穿孔、结石移位残留、感染等并发症,并有可能导致手术失败。临床上应重视这些问题并研究相应的处理对策,熟练的技术操作及严格掌握适应证是减少并发症和降低手术失败率的关键。