野生型和突变型nm23-H1基因原核表达载体的构建、表达及纯化

背景与目的 nm23-H1基因是一个肿瘤转移抑制基因,但关于nm23-H1基因抑制肿瘤转移的生化机理目前并不清楚.该实验目的就是构建nm23-H1野生型和P96S、H118F突变型原核表达载体,并在大肠杆菌中表达及纯化.方法 通过PCR方法扩增野生型和突变型nm23-H1目的片断,利用基因重组技术构建pET28a-nm23-H1野生型和突变型原核表达载体,并进行酶切和测序鉴定,鉴定正确克隆转化BL21(DE3)溶源菌,进行蛋白表达及可溶性分析,同时采用镍柱亲和层析法进行纯化,应用Western blot方法对纯化后蛋白进行鉴定检测.结果 通过酶切和测序鉴定,pET28a-nm23-H1野生型和突变型原核表达载体序列正确,编码框正确.转化溶源菌后能够表达目的蛋白,蛋白表达量高,且均为可溶性蛋白,Western blot检测结果提示野生型和突变型nm23-H1蛋白分子量为20 kDa,与预计值相符.结论 成功构建pET28a-nm23-H1野生型和P96S、H118F突变型原核表达载体,所表达蛋白可用于下一步实验研究.     

625例寻常型银屑病患者的初发年龄调查及临床资料的多元回归分析

目的 调查寻常型银屑病患者的初次发病年龄并探讨寻常型银屑病发病的相关因素.方法 通过对625例门诊患者进行流行病学调查和皮疹严重程度评估,分析其初次发病年龄的规律,并建立logistic回归模型,探讨与病情相关的影响因素.结果 625例寻常型银屑病患者中男性319例(51.04%),女性306例(48.96%).初次发病年龄高峰,男性为20～25岁,女性为10～15岁.初次发病年龄在5～10岁的女性患者人数明显多于男性(P<0.01),10～15岁的女性患者人数亦明显高于男性患者(P<0.05),其他年龄段的男性与女性患者人数无显著差异(P>0.05).25项调查项目中人选9项影响病情的相关因素,4项差异有显著性,按影响度高到低排序分别是性别、初发年龄、文化程度和年龄.结论 寻常型银屑病女性患者的发病年龄要早于男性,与病情相关的主要影响因素有性别、文化程度、年龄、发病年龄.文化程度的影响表明社会心理因素在银屑病的发生、发展中起着很重要的作用,应予以重视.     

中西医结合治疗银屑病

中医药治疗银屑病有良效.中医认为“血分有热”是银屑病的主要原因.新近的皮肤病学专著中,中医辩证的银屑病分型逐渐简约,多采用赵炳南老中医的血热与血燥两大型,也有的加上了血淤型.早年我们曾按北京中医院这两型的基本方对银屑病患者辩证施治,但其效果不如当年北京中医院的好,究其原因,可能包括随证加减不够,配合外用药不够,以及门诊不如住院效果好等^[1].近几年,一些作者的观察也证明了中药治疗银屑病的肯定效果,而且不良反应较少,同时还探讨了中药疗效的机制.     

高山绿茶提取物对小鼠高胆固醇血症及脂肪肝的防治作用及其机制

目的 研究高山绿茶提取物(GTE)对小鼠高胆固醇血症及脂肪肝的影响及其作用机制.方法 C57 BL/6小鼠随机分为正常对照组、高脂饲料喂养模型组及其加用GTE防治的低、中、高剂量组.喂养28 d后,检测血脂、肝功、肝脏氧化指标,肝脏行HE染色、油红0染色,检测小肠中尼曼-匹克C1样蛋白1(NPC1L1)和甾醇反应元件结...     

槐定碱致痫大鼠海马Glu、GABA 及血清中TNF-α、IL-2和IL-6含量变化的研究

目的探讨槐定碱(Sophojridine,SRI)致痫大鼠海马组织中谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA),血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-6(IL-6)的变化。方法腹腔注射槐定碱(47.83mg/kg)诱导大鼠癫痫,采用放射免疫测定法检测TNF-α、IL-2和IL-6表达的水平,免疫组化法测定Glu和GABA阳性神经元的含量。结果模型组大鼠血清中TNF-α、IL-2和IL-6含量均明显高于对照组(P<0.01),大鼠海马组织中Glu免疫反应阳性细胞数,模型组均明显高于对照组,GABA免疫反应阳性细胞数,模型组均明显低于对照组(P<0.05)。结论TNF-α、IL-2、IL-6可能参与了癫痫的发病;Glu和GABA等氨基酸类神经递质平衡紊乱可能是癫痫发病的基础之一。     

多肿瘤标志物C12检测系统在消化系统恶性肿瘤的诊断价值

目的 探讨肿瘤标志物诊断芯片C12系统在消化系统恶性肿瘤的诊断价值.方法 分析总结134例消化道恶性肿瘤(胃癌58例,结直肠癌42例,原发性肝癌34例)初治患者应用肿瘤标志物C12检测系统的检测结果,寻找出与胃癌、结直肠癌、原发性肝癌相关性最强的肿瘤标志物及肿瘤标志物最佳联合检测组合.结果 C12系统对本组胃癌、结直肠癌、原发性肝癌患者的总体诊断率为36.20%、42.86%、91.18%,胃癌、结直肠癌、原发性肝癌相关性最强的肿瘤标志物是CEA、CEA、AFP,阳性率分别为25.86%、40.48%、73.53%.胃癌和结直肠癌的最佳联合检测是CA19-9 CEA CA125,原发性肝癌的最佳联合检测是AFP Ferritin CA19-9 CA125.结论 C12检测系统对原发性肝癌具有较高的诊断价值,但对胃癌和结直肠癌的诊断价值有限,必须尽快开发出新的高效的蛋白芯片检测系统.     

银屑病患者血浆cAMP及cGMP含量

近代研究证明:环磷腺苷(cAMP)及环磷鸟苷(cGMP)是细胞增生和分化的调节因素.cAMP抑制细胞分裂,促进细胞分化;cGMP促进细胞增生.Voorhees认为银屑病表皮细胞增生加速、角化不全以及表皮中糖元增加等病理变化与表皮cAMP和cGMP含量的不平衡有关.近10余年来国外许多学者分别测定了银屑病表皮的cAMP和cGMP含量,所得结果不尽相同.我们在1982年曾用放射免疫法测定了正常人表皮、真皮的cAMP、cGMP含量,并以同样方法测定了银屑病患者表皮、真皮的cAMP和cGMP含量.结果与1979年Voorhees和Marcelo等报告相似.从测定真皮内cAMP和cGMP含量,我们还初步观察到银屑病真皮的环核苷酸也有异常.     

银屑病患者治疗前后表皮细胞中热休克蛋白60的表达研究

为了探讨热休克蛋白60与银屑病的关系，采用LSAB免疫组织化学法，检测16例银屑病皮损、非皮损及治愈后表皮细胞中和6例正常人对照组表皮细胞中HSP60的表达。结果发现HSP60在正常人及银屑病患者非皮损、治愈后表皮细胞中呈阴性表达，在银屑病皮损中表达增强，提示HSP60在银屑病应激保护机制中可能发挥着重要作用。     

25例服毒自杀病人的心理分析与治疗

自杀是急救医学范畴内常见的病种之一,而服毒自杀又是自杀行为中最常采用的手段。1988年1～7月,本院内科共抢救服毒自杀者25例,除积极抢救外,进行了心理分析和治疗,起到了积极的辅助作用,有助于避免自杀行为的再发生。 一、一船资科见表1～3。