血清胱抑素C与健康人颈动脉斑块的关系

目的 探讨健康人血清胱抑素C(CysC)与无症状颈动脉斑块的关系.方法 以随机整群抽样方式在北京15个社区通过问卷调查、检测血清CysC、常规及生化指标及体格检查、颈动脉超声及影像学检查,筛选出健康个体396例(男160例,女236例,年龄30～99岁).5年后随访,重复上述检查,有全部资料者224例(男85例,女139例,年龄36～93岁).肾小球滤过率(GFR)由CKD-EPI公式估算.结果 颈动脉斑块组血清CysC高于无颈动脉斑块组[(0.898±0.155)vs(0.772±0.139)mg/L](P<0.01).Spearman相关分析发现颈动脉斑块与血清CysC、年龄相关(r=0.398,P<0.01;r=0.462,P<0.01),Logistic回归分析显示CysC并非颈动脉斑块的独立危险因素.10岁年龄段分层,各层颈动脉斑块组与无颈动脉斑块组组间血清CysC无统计学差异(P>0.05).根据5年前后斑块变化分为4组,1组:两次均无斑块组119例;2组:从有到无斑块组38例;3组:从无到有斑块组27例;4组:两次均有斑块组40例.单因素方差分析,2、3、4组5年前年龄、血清CysC浓度均较1组升高,3、4组5年前EPI GFR较1组低,5年前后血清CysC差值4组间无统学差异(P>0.05).协方差分析调整年龄、性别、EPI GFR后,4组间无统计学差异(P>0.05).结论 血清CysC与颈动脉斑块无确切关联,不能作为其预测指标.     

慢性肾病患者肾小管上皮细胞内质网应激与细胞凋亡的关系

目的 探讨慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)患者蛋白尿诱导肾小管上皮细胞内质网应激与细胞凋亡的关系.方法 应用免疫组织化学技术检测CKD患者肾小管上皮细胞中内质网应激标志蛋白氧调节蛋白150(cells-oxygen-regulated protein150, ORP150)和糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78, GRP78)的表达;TUNEL法检测细胞凋亡.对各指标与CKD患者24 h尿蛋白量进行相关性分析.结果 CKD患者肾小管上皮细胞细胞质中ORP150、GRP78的表达较正常对照组显著增强(P＜0.01),且轻、中、重度蛋白尿3组各组间亦均有显著性差异(P＜0.01),并与尿蛋白水平呈正相关(r=0.695,r=0.76,P＜0.01);各组小管上皮细胞凋亡系数(apoptosis index,AI)均亦有显著性差异(P＜0.01),并与尿蛋白水平呈正相关性(r=0.835,P＜0.01).结论 CKD患者肾小管上皮细胞有内质网应激与凋亡的发生,并且其强度与蛋白尿水平呈正相关关系.内质网应激可能是大量蛋白尿引起小管上皮细胞凋亡的重要环节.     

糖尿病肾病肾组织TRAIL表达与肾小管间质损伤的关系

目的探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者肾组织的表达以及与肾组织损伤之间的关系。方法选取2010-2013年本科收治的36例患有2型糖尿病经肾活检诊断为DN患者,9例肾错构瘤或肾癌切除术患者经病理检查为正常组织作为对照。收集各组患者人口学资料、临床数据,免疫组织化学检测肾组织TRAIL表达,并与临床数据及肾组织病理损伤进行相关性分析。结果 DN患者TRAIL主要表达于肾小管上皮细胞细胞质和/或细胞膜,其表达水平随着肾小管间质损伤的加重而逐渐增加;与收缩压、尿蛋白定量、尿NAG、尿蛋白/尿肌酐、尿酸、尿素氮、血肌酐、胱抑素C呈正相关(P<0.05,P<0.01),与e GFR呈负相关(r=-0.936,P<0.01)。结论 DN肾组织TRAIL表达与肾组织损伤程度及肾功能密切相关,提示TRAIL在DN疾病进展中具有重要作用。     

内质网应激在大鼠肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤炎症反应中的作用

目的 观察大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)缺氧复氧损伤时内质网应激蛋白和炎症细胞因子表达的改变及其意义,以探讨缺氧复氧诱导大鼠肾小管上皮细胞内质网应激与炎症反应的关系.方法 NRK-52E细胞用含5%胎牛血清的DMEM液培养于37 ℃、5%CO2 恒温培养箱.将细胞分为正常对照组和缺氧/复氧损伤(hypoxia...     

死亡相关蛋白5研究进展

蛋白质生物合成是遗传信息的翻译过程,包括起始、延伸和终止3个阶段,其中起始阶段是调控的关键。死亡相关蛋白5是新近发现的翻译调控因子,能够调控真核生物mRNA依赖5＇帽状结构翻译及经内部核糖体进入位点途径翻译的起始。随着研究的深入,发现死亡相关蛋白5在细胞分化及凋亡等病理生理过程中具有重要作用。本文就近年来死亡相关蛋白5研究进展作一综述。     

缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞的衰老演变及其意义

目的观察肾脏缺血再灌注损伤（IRI）后正常和衰老肾小管上皮细胞的演变，探讨细胞衰老在衰老相关性肾脏病理变化中的作用。方法以低龄（2月龄）和高龄（12月龄）野生鼠为研究对象。建立左肾IRI模型。于IRI后0d、1d、3d、7d、1月、3月、6月取肾组织，用HE染色观察肾小管组织学变化；免疫组织化学检测肾小管上皮细胞增殖细胞核抗原（PCNA）的表达；组织化学染色观察肾小管上皮细胞衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）的活性；TUNEL法检测凋亡肾小管上皮细胞。结果肾脏IRI后0d，肾小管以坏死为主，高龄鼠比低龄鼠更为明显（P〈0．05）。IRI1d后出现肾小管上皮细胞凋亡，7d凋亡达到高峰（P〈0．05），且在同一时间点，高龄鼠比低龄鼠严重（P〈0．05）。低龄鼠IRI肾1月时出现肾小管上皮细胞衰老，而对侧肾没有出现，3月、6月点衰老细胞显著增多（P〈0．05）；高龄鼠IRI后0d双肾均可见大量衰老的肾小管上皮细胞，但IRI肾的衰老细胞在IRIld后明显减少（P〈0．05），1月后又逐渐增多。6月后高龄鼠双肾衰老的肾小管上皮细胞几乎又达到同一水平。PCNA阳性染色细胞出现的几率两组相比差异无统计学意义（P〉0．05），但低龄组细胞增殖能力要强于高龄组。对高龄鼠IRI后1d点肾小管上皮细胞凋亡与衰老之间的相关分析显示，二者存在显著负相关（r=-0．82,P〈0．001）。结论IRI可促进正常肾小管上皮细胞衰老的进程。已经进入衰老状态的肾小管上皮细胞在遭受IRI刺激后，更易走向死亡[坏死和（或）凋亡]。肾小管上皮细胞的这种演变，在老化相关性肾脏病理变化发生和进展中可能发挥着重要作用。     

自蛋白超负荷重吸收导致肾小管间质纤维化的机制研究

Cubflin介导肾小管上皮细胞对白蛋白的超负荷重吸收，通过激活并表达多种血管活性物质、炎症趋化因子、细胞因子以及多种致纤维化因子，导致肾小管间质损伤并最终促使蛋白尿肾病进展为终末期肾功能不全，进一步探讨蛋白尿发生的机制，寻找减少蛋白尿发生的措施，为延缓蛋白尿肾病进展为肾间质纤维化提供新的方法和途径。     

直视下腹膜透析管置入术腹壁固定与非固定效果观察

目的探讨腹膜透析置管术中行腹壁固定与非固定两种方式的效果差异。方法慢性肾功能衰竭患者38例,均选择腹膜透析作为肾脏替代治疗模式。按腹膜透析置管术式分为腹壁固定组与非固定组,比较不同术式的透析液出入速度及超滤量、腹透管移位发生率。结果两组透析液出入及超滤量无明显差异;但腹壁固定组腹透管移位发生率为零,非固定组腹透管移位发生率为15%,二者相差显著（P〈0.01）。结论采用腹壁固定术可有效减少术后腹膜透析导管移位发生。     

人cubilin蛋白功能片段原核表达系统的建立

目的构建编码白蛋白吞饮受体人cubilin(hcubilin)蛋白配体结合域CUB7-8基因片段的原核表达载体,诱导表达并鉴定表达产物.方法重组DNA技术构建原核表达载体pGEX-hCUB7-8,IPTG诱导表达,SDS-PAGE与免疫印迹法鉴定表达产物,Pull down实验验证融合蛋白是否与白蛋白结合.结果双酶切和测序鉴定表明CUB7-8片段插入正确,诱导表达后获得分子量为52×103的融合蛋白,该融合蛋白可以被抗GST抗体识别,并且可以和白蛋白结合.结论CUB7-8基因片段编码的蛋白质能在原核细胞中正确表达,并且可以和白蛋白结合,这为进一步研究该功能域的结构与功能奠定了基础.