抗金葡菌肠毒素单克隆抗体的实验和应用研究

抗金葡菌肠毒素单克隆抗体的实验和应用研究＊董邦权李恩善雷祚荣１杨琨金伯泉汪美先（第四军医大学免疫学教研室，西安７１００３２）由金黄色葡萄球菌产生的肠毒素（ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌＥｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ，简称ＳＥ）是一组分子量为２４～３０ｋｄ的单肽...     

白细胞介素－11基因治疗促进放射损伤小鼠造血恢复的实验研究

白细胞介素－１１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１１，ＩＬ－１１）是一种新的造血生长因子，体内、外实验结果显示ＩＬ－１１具有显著的造血促进作用，它能作用于早期的造血干细胞及祖细胞，促进其增殖和分化。为了探讨ＩＬ－１１基因治疗放射损伤后造血恢复的促进作用，我们构建了含人ＩＬ－１１ｃＤＮＡ的逆转录病毒载体，并转染小鼠成纤维细胞系ＮＩＨ－３Ｔ３，经筛选获得３株高表达ＩＬ－１１的转染细胞亚克隆，用高表达ＩＬ－１１的转染细胞作为载体细胞，进行了ＩＬ－１１基因治疗对放射损伤小鼠造血系统影响的实验研究。结果表明ＩＬ－１１基因治疗能明显缩短亚致死量放射损伤小鼠白细胞降低的时间，促进外周血白细胞、血小板和红细胞压积的恢复。提示ＩＬ－１１基因治疗对放射损伤造成的造血功能低下具有潜在的应用价值。     

用于检测细胞粘附的3H-TdR掺入实验

目的：细胞与细胞之间及细胞与基质之间的粘附作用在细胞间的信息传递中起极其重要的作用，检测细胞间粘附作用是细胞生物学研究中不可缺少的方法之一。方法：我们建立了以^3H-TdR掺入实验为基础的细胞粘附检测方法。①首先将待检测细胞之一于96孔培养板培养使之贴壁，进行细胞铺底；②将另一待检细胞标记^3h-TdR；③将2种细胞在培养板中共同孵育4h，使之相互作用；④轻柔洗去未粘附细胞，将剩余细胞以多头细胞收集仪收集，β计数仪测cpm值；⑤可通过单抗等进一步证实细胞间粘附的特异性。结果：将^3h-TdR掺入实验用于细胞粘附的检测具有较高的敏感性，它能准确地检测细胞间的粘附现象，并反映其相对强弱。结论：^3H-TdR掺入实验由于采用同位素标记方法，敏感性较好。通过阻断实验亦能保症实验的特异性，能胜任细胞粘附功能的检测。     

主动PBL方法在八年制《医学免疫学》教学中的应用与思考

八年制医学生的培养目标是培养临床医学博士。医学免疫学是与临床联系较为紧密的基础课之一,在教学中如何加强学生处理临床问题的逻辑思维能力和提高探讨临床表象之下深层次科学问题的科研思维水平,一直是免疫学教学的主要关注之一。PBL(Problem based learning,PBL)教学方法由美国的神经病学教授Barrows于1969年首创,是以问题为导向的教学方法,是以学生为中心的教育方式,而     

GM-1对原代培养神经元类缺血再灌注损伤的影响

目的 观察类缺血再灌注对大鼠皮质神经元细胞损伤的影响及神经节苷脂(GM1)对受损神经细胞的保护作用.方法 制备培养原代神经元类缺血再灌注损伤模型,应用 GM1分别于再灌注后不同时间进行MTT,凋亡流式细胞检测等.结果 进行类缺血再灌注后,任一时间点的缺血组、实验组的细胞活性均低于正常组,凋亡率高于正常组.1 h时缺血组与实验组的细胞活性和凋亡细胞染色无明显差别,而流式细胞仪检测细胞凋亡率显示实验组低于缺血组;在随后的不同时间点实验组的细胞活性显著高于缺血组,凋亡率显著低于缺血组.结论 GM1可保护类缺血再灌注后大鼠皮质神经元的损伤,作用从再灌后1 h即可出现,6 h～24 h时这种作用逐渐加强;GM1可减轻类缺血再灌注诱导的大鼠皮质神经元细胞凋亡,增加神经元的存活率,从而对损伤神经元细胞具有保护作用.     

侧柏酮对人γδT细胞功能的影响

目的: 探讨侧柏酮对人γδ T细胞功能的影响. 方法: 异戊烯焦磷酸/isopentenyl pyrosphate(IPP)法体外扩增人外周血γδ T细胞.各浓度侧柏酮作用人γδ T细胞48 h,CCK-8法检测其增殖力,流式细胞术测其表型、细胞周期、细胞凋亡及表达CD107a,穿孔素(perforin),粒酶B(granzyme B)的情况. 结果: 300～600 μmol·L^-1侧柏酮明显抑制人γδ T细胞生长(P<0.05);0.036 25～150 μmol·L^-1侧柏酮明显促进其生长(P<0.05),9.4 μmol·L^-1时达增殖最高峰(37.03±0.52)%,且穿孔素表达率明显升高(39.94±1.04)%(P<0.05),余与空白组相比无显著差异. 结论: 9.4 μmol·L^-1侧柏酮明显促进人γδ T细胞增殖并上调其穿孔素的表达.     

社会支持和应对方式对Housebound老年人家庭照顾者照顾负担的影响

目的:了解社会支持和应对方式对Housebound老年人家庭照顾者照顾负担影响,为改善其照顾负担提供依据。方法:于2017年12月〜2018年1月,对唐山市社区Housebound老年人家庭照顾者应用一般情况调查表、社会支持量表、特质应对方式量表和Zarit照顾者负担量表进行调查。结果:Housebound老年人家庭照顾者照顾负担总分为(32.60±20.94)分,处于中等水平;积极应对与照顾负担总分呈负相关(P<0.05),消极应对与家庭照顾者照顾负担总分呈正相关(P<0.05),社会支持与照顾分担总分呈负相关(P<0.05);多因素回归分析显示:性别、年龄、老年人关系、婚姻、文化程度、月收入、工作情况、照顾老年人时间、与社会支持、应对方式是家庭照顾者照顾负担的影响因素。结论:Hoiiseboimd老年人家庭照顾者感知的照顾负担呈中等水平,社区工作之中应引导其采取积极的应对方式,加强社会支持,使其照顾负担感知降低。     

骨盆骨折合并腹部脏器伤的早期诊治

目的探讨骨盆骨折合并腹部脏器伤患者的早期临床特点,减少漏诊及并发症的发生,提高对骨盆骨折合并腹部脏器伤的早期诊治成功率。方法对我院2005年6月至2015年6月急诊收治的102例骨盆骨折合并腹部脏器伤患者进行回顾性研究,其中男64例,女38例;年龄16~65岁,平均(36.8±6.6)岁;受伤至入院时间:半小时至24 h,平均(364.25±17.35)min;根据Tile评分法分型,A型47例,B型32例,C型23例。对腹腔脏器损伤的类型、临床表现、并发症、漏误诊情况、治疗方案及效果进行分析,总结骨盆骨折合并腹部脏器伤的早期诊断及处理方案。结果本组中84例为腹腔内脏器破裂,18例腹腔脏器未破裂。平均确诊时间为伤后6.5 h。行剖腹探查72例,腹腔镜探查12例,其中因肝破裂损伤严重转开腹3例,I期介入栓塞止血治疗12例。治愈89例,死亡13例,其中创伤性失血性休克继发DIC 9例,感染性休克1例,重型颅脑损伤2例,肺栓塞1例,救治成功率为87.25%。发生早期漏诊2例,其中1例合并结肠破裂经抢救无效死亡,另1例小肠嵌入骨折间隙继发肠梗阻破裂,术后2个月始愈。结论骨盆骨折合并腹部脏器损伤的患者伤情重而复杂,极易漏误诊而直接危及生命。早期分析病情、完善相关检查,及时行抗休克治疗、骨盆外固定,必要时早期行腹部探查和损害控制性手术可提高早期确诊率与救治成功率。     

CD_3McAb对PHA和TPA诱导人胚胸腺细胞增殖反应调节作用的研究

本文观察了CD3 McAb 对PHA 和TPA 诱导的20～36周龄人胚胸腺细胞增殖反应的调节作用。结果表明:CD3McAb 不能单独诱导人胚胸腺细胞增殖反应,但却能显著地促进TPA 诱导的人胚胸腺细胞增殖和抑制PHA 诱导的人胚胸腺细胞增殖,并呈剂量依赖关系;加入外源性rHulL—2能促进人胚胸腺细胞对CD3McAb 诱导的应答反应,而rHuIL—1则无此作用。此结果对于了解人胚胸腺表达CD_3抗原细胞的功能水平及CD_3分子的生物学作用有一定的意义.     

人血小板/T细胞活化抗原1(PTA1)亲和层析柱的制备及PTA1/Ig的纯化

目的：制备可用于纯化血小板／Ｔ细胞活化抗原１（ｐｌａｔｅｌｅｔａｎｄＴｃｅｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｔｉｇｅｎ１，ＰＴＡ１）融合蛋白的亲和层析柱，纯化真核表达的ＰＴＡ１／Ｉｇ融合蛋白，以进一步研究ＰＴＡ１的功能及其配体。方法：以硫酸铵及阴离子交换色谱法纯化抗ＰＴＡ１ｍＡｂ，并交联Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ制备ＰＴＡ１亲和层析柱。通过亲和层析法，从ｐＰＴＡ１／Ｉｇ表达载体转染的ＣＯＳ７细胞培养上清中纯化ＰＴＡ１／Ｉｇ融合蛋白，用夹心ＥＬＩＳＡ及ＳＤＳＰＡＧＥ鉴定纯化结果。结果：硫酸铵及阴离子交换色谱纯化后，获得纯度高和活性好的抗ＰＴＡ１ｍＡｂ，用其交联Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ制备ＰＴＡ１亲和层析柱，交联率为９６％。该亲和层析柱可从ｐＰＴＡ１／Ｉｇ转染的ＣＯＳ７细胞上清每１００ｍｌ中，纯化ＰＴＡ１／Ｉｇ融合蛋白约１２６μｇ。结论：制备成功可用于纯化ＰＴＡ１的亲和层析柱，并获得纯化的ＰＴＡ１／Ｉｇ融合蛋白，为进一步研究ＰＴＡ１的功能及鉴定其配体提供了有力手段