兔实验性隐睾术后三个月 A型精原细胞数量严重减少

目的 :关于隐睾是否会导致不可逆的精子发生的损害 ,人们还有争论。本文拟通过研究兔实验性隐睾术后三个月是否伴有 A型精原细胞 (精子发生的干细胞 )的数量的变化 ,来间接说明隐睾对精子发生的损害是否可逆。材料与方法 :6只青春期兔作单侧隐睾术 ,将睾丸和隐睾一起放回腹腔。三个月后从腹腔及阴囊取出两侧睾丸及附睾作形态定量分析。运用 2 5μm厚甲基丙烯酸树脂切片及无偏、有效的体视学新工具——光学体视框来测量生精细胞 (核 )数 ,利用其它体视学方法来估计生精小管的直径和长度等。结果 :腹腔内睾丸精子发生严重障碍 ,生精上皮内只…     

松果体内的神经纤维终末同松果体细胞的联系—电镜定量研究

目的研究松果体内神经纤维终末同松果体细胞间的联系方式.方法取12只成年雄性SD大鼠浅松果体,作常规电镜包埋,电镜下等距随机选点观察拍照并作形态定量测试.结果(1)松果体细胞体积约占松果体体积的75.9%±3.8(X±S-x),松果体细胞间隙和血管周围间隙体积占整个松果体体积的22.0%±3.5;在血管周围间隙中松果体细胞游离面表面积占松果体细胞整个界面面积的46%;(2)松果体细胞的球状突起轮廓数共计数155个,其中101个游离在血管周围间隙内;(3)共计数各种类型的神经纤维终末轮廓数248个,其中221个游离在血管周围间隙内,23个与松果体细胞胞体相贴,1个与细胞突起相贴,3个与松果体细胞形成突触.结论提示进入松果体的交感神经纤维终末对松果体细胞活动的调控主要是通过神经体液途径.     

大鼠松果体的神经支配--免疫组织化学及光镜体视学研究

目的探讨大鼠松果体的神经支配及双侧颈上交感神经节摘除后对松果体细胞分泌活动的影响。方法免疫组织化学、光学体视框及图像分析方法。结果松果体内神经末梢、松果体细胞及其突起终末呈突触体素(P38)免疫组织化学阳性反应。摘除了双侧颈上交感神经节后,大鼠松果体所含神经末梢的平均数密度减少了43%(P<0.01),平均每个大鼠松果体内所含神经末梢总数减少了37%(P<0.05),松果体细胞及其突起终末内突触体素免疫阳性产物的平均A值明显降低(P<0.01)。结论支配松果体的神经纤维有很大部分来自双侧颈上交感神经节,这些神经纤维对松果体细胞的分泌功能产生明显影响。     

人胰腺癌组织的差异蛋白质组学研究

目的探讨胰腺癌的发病机制,寻找与临床诊断及治疗相关的生物学标记或靶标。方法采用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)技术对5例人胰腺癌组织及其癌旁组织的总蛋白进行分离,PDQuest 7.0软件分析获得差异蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对蛋白质点进行鉴定,采用免疫组化染色进一步验证差异表达蛋白。结果共获得10个差异表达蛋白质点。质谱鉴定结果显示,尼克酰胺N-甲基转移酶(NNMT)和铁蛋白在胰腺癌组织中表达明显高于其在癌旁组织中表达(>4倍),而谷胱甘肽S-转移酶、DNA拓扑异构酶、T细胞受体β-链、IKK抑制因子ε1、转胶蛋白、二甲基精氨酸二甲基氨基水解酶1(DDAH1)、半乳糖激酶1、肌球蛋白等在胰腺癌癌旁组织中表达明显高于其在癌组织中表达(>4倍)。免疫组化结果显示,铁蛋白在胰腺癌组织中表达高于癌旁组织,DNA拓扑异构酶、谷胱甘肽S-转移酶、肌球蛋白在癌旁组织中表达高于癌组织。结论以2-DE和MALDI-TOF-MS为基础的蛋白质组学技术是研究肿瘤的一种重要手段,实验得到的差异蛋白可能是潜在诊断胰腺癌的分子标志或控制肿瘤生长的治疗靶点。     

形态学者＝体视学者?

形态学者 (morphologist)与体视学者 (stereologist)均致力于研究组织结构或几何物体的形状、尺寸、数量和空间分布等几何特征 ,是名副其实的同行。不过 ,看到切片上的二维轮廓 (例如一个一个的血管断面 ) ,前者通常想到的也是二维轮廓 ,而后者想到的是形成该二维轮廓的三维结构本身 (例如三维空间内弯弯曲曲的血管 )。前者宁愿对二维轮廓进行定性描述或主观的定量描述 ,而后者则强调用数学方法获取准确数字的针对三维结构本身的定量描述。鉴于此 ,有人说体视学就是定量形态学。前者多是组织学、病理学等生物医学领域的学者 ,是体视学方法的…     

兔输精管结扎术三个月对精子发生的影响

关于输精管结扎对精子发生的影响 ,以往的研究报告不尽一致。本文拟采用体视学方法来定量研究兔输精管结扎术三个月对精子发生的影响。 6只青春期兔作对照 ,8只青春期兔作双侧输精管结扎术 ,三个月后取出一侧睾丸及附睾作形态定量分析。运用 2 5 μm厚甲基丙烯酸树脂切片及无偏、有效的体视学新工具——光学体视框来测量生精细胞 (核 )数。结扎组较正常组睾丸平均体积明显缩小 ;各级生精细胞数量也明显减少 ;支持细胞数无改变 ;但结扎组中有 2例的睾丸体积和生精细胞数接近正常。输精管结扎术后三个月 ,大白兔精子发生受到抑制 ,但有明显个…     

酸性和碱性预孵育处理对骨骼肌肌纤维分型的影响—肌球蛋白ATP酶法

为比较分别经酸性和碱性预孵育液处理的肌球蛋白ATP酶反应法对骨骼肌肌纤维分型的影响．采用酸性（pH4．5）和碱性（pH10．4）预孵育肌球蛋白ATP酶法对大鼠躯干的腹外侧荐尾肌、后肢的处长伸肌相邻切片分别染色，然后比较相邻切片的相同肌纤维类型。结果显示两种预孵育液对ⅡA型肌纤维的分型设有影响，而酸性预孵育液处理后所鉴别的Ⅰ型和ⅡB型肌纤维，在经碱性预孵育液后有少数分别呈现为ⅡB型和ⅡA型肌纤维。本研究表明酸和碱性预孵育ATP酶染色对骨骼肌肌纤维的分型没有完全对应的“镇相”结果，这可能提示肌球蛋白ATP酶的活性在不同的酸性和碱性环境中有不同的稳定性。     

若干定量形态学问题

对于形态学研究领域的研究人员来讲，体视学面临着理解及推广的难题。这篇讲座材料采用问答的形式，就是为了更能吸引读者从而更好地介绍和推广体视学。内容不涉及一步一步的具体方法，但提出并解答了形态学研究者经常遇到而又经常误解的若干（定量）形态学基本问题。问题问题1估计某器官内某种细胞核的数目等形态定量特征，以下哪种方法最好：①制成细胞是液，利用流式细胞计。②制成细胞悬液涂片，然后象计数血细胞那样计数细胞核。③制作连续切片，然后三维重建。④切取随机切片，利用体视学方法。⑤切取随机切片，利用图像分析仪。问题2…     

体视学估计误差分析之告戒

误差分析的前提是采用了无偏方法获取估计值。所谓无偏方法 ,在体视学或形态定量实践中通常意味着随机抽样。一项体视学估计的总误差表明总的估计是否满意 ,它常用CE(误差系数 ,等于标准误SEM除以均值 )表示。关于误差分析 ,为大多数生物领域的研究人员所熟悉的统计学方法 ,是建立在独立 (单纯 )随机抽样的基础之上的 ,然而在实际工作中 ,人们几乎总是采用更有效的等距抽样 (或称系统抽样 )。