转铁蛋白-多聚乙烯亚胺介导IL-12基因对小鼠抗骨肉瘤免疫的增强作用

目的:研究以转铁蛋白-多聚乙烯亚胺(transferrin-polyethylenimine,Tf-PEI)为靶向性载体,体内转染小鼠白细胞介素12(murineinter-leukin-12,mIL-12)基因治疗小鼠骨肉瘤模型的疗效。方法:分别以PEI和Tf-PEI为载体,将mIL-12基因导入体外培养的小鼠骨肉瘤细胞,并观察游离转铁蛋白对Tf-PEI转染效率的影响。建立小鼠骨肉瘤动物模型,在荷瘤部位将Tf-PEI包裹mIL-12基因直接注入肿瘤中,检测此基因在肿瘤细胞中的蛋白表达情况和小鼠脾脏自然杀伤细胞(NK)、细胞毒T淋巴细胞(CTL)的活性。结果:Tf-PEI组mIL-12蛋白表达效率显著高于PEI组(t=38.15,P<0.001)。游离转铁蛋白可显著抑制Tf-PEI组的转染效率(t=44.36,P<0.001)。在注射有mIL-12基因的肿瘤组织中,小鼠IL-12蛋白水平明显升高,为(72±5)ng/L(F=3.449,P<0.001),小鼠脾细胞NK,CTL活性增强(t=5.04,t=6.13,P<0.001)。结论:Tf-PEI是一种高效率的肿瘤靶向性基因转染载体,它可以成功的将mIL-12基因导入小鼠骨肉瘤模型,mIL-12基因治疗可提高机体的抗肿瘤免疫应答。     

克氏针弹性外固定治疗尺骨鹰嘴骨折（附15例报告）

目的：探讨利用弹性固定原理治疗尺骨鹰嘴骨折的新方法。方法：1996年6月以来临床应用直径2mm、长30cm的克氏针3根及自制前臂外固定圈组成外固定架,弹性外固定治疗尺骨鹰嘴骨折15例,年龄16－45岁,均为横斜性骨折。其中开放性骨折3例,闭合性骨折12例。臂丛麻醉C臂光机透视下复位穿针外固定。结果：15例患者6－12周临床愈合,平均8周,肘关节功能均恢复满意。无感染等并发症发生。结论：克氏针弹性外固定法操作简单,创伤小,住院时间短（其中门诊治疗3例）,无需3次手术,功能恢复完全,是治疗尺骨鹰嘴骨折非常有效的新方法,是弹性（张力带）固定原理的合理运用。     

bFGF基因转染对成骨细胞生物学行为的影响

碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)是调控成骨细胞增殖和分化的首选生长因子之一 ,而且还是一种强大的毛细血管增殖刺激剂。但外源性生长因子半衰期短 ,需反复给药 ,且价格昂贵[1,2 ] 。我们将ｂＦＧＦ基因由体外转入兔骨膜源成骨细胞 ,观察了其对成骨细胞生物学的影响 ,报告如下。1.材料与方法 :含有ｂＦＧＦｃＤＮＡ的克隆载体ｐｕｃ13 ｒｂＦＧＦ由日本Ｉｎａｗａｓｈｉｒｏ博士惠赠 ,用ＥｃｏＲⅠ酶切ｐｕｃ13 ｒｂＦＧＦ及真核表达载体ｐｃＤＮＡ3,用Ｔ4ＤＮＡ连接酶连接后构建ｐｃＤＮＡ3 ｂＦＧＦ重组表达质粒并鉴定。无菌条件下取 …     

一氧化氮及一氧化氮合酶抑制剂对髓核细胞线粒体功能的影响

BACKGROUND: Nitric oxide can interfere with the function of mitochondria, and accelerate the intervertebral disc damage and degeneration by interfering with the release of inflammatory cytokines. Nitric oxide is an important inflammatory cell medium leading to degeneration of intervertebral disc induced by pressure and other external factors. OBJECTIVE: To investigate the regulatory effect of nitric oxide and nitric oxide synthase inhibitor niacinamide on mitochondrial function and its association with biological behavior of rabbit nucleus pulposus. METHODS: Cultured nucleus pulposus cells of rabbit lumbar intervertebral disc were randomly divided into six groups: normal blank control group, 10 μmol/L sodium nitroprusside group, 100 μmol/L sodium nitroprusside group, 200 μmol/L sodium nitroprusside group, 0.05 g/L nicotinamide group (100 μmol/L sodium nitroprusside+0.05g/L nicotinamide), and 0.5 g/L nicotinamide group (100 μmol/L sodium nitroprusside and 0.5 g/L nicotinamide). Different doses of nitric oxide donor sodium nitroprusside and nicotinamide were added in the medium of each group. Three days after intervention, cell proliferation activity, intracellular ATP concentration, cell nitric oxide synthase activity, cellular reactive oxygen species level, and mitochondrial membrane potential were detected respectively. RESULTS AND CONCLUSION: (1) After 3 days of rabbit nucleus pulposus cells intervened by different concentrations of sodium nitroprusside, intracellular nitric oxide synthase content increased with sodium nitroprusside volume increase, and ATP concentration decreased along with sodium nitroprusside volume increase; there were significantly differences between the normal control group and sodium nitroprusside groups (P < 0.01). (2) Reactive oxygen species could be increased in the sodium nitroprusside group. Niacinamide groups indicated a dose-dependent manner to improve the increase of cellular reactive oxygen species levels with sodium nitroprusside intervention (P < 0.01). (3) In the sodium nitroprusside groups, nucleus pulposus cell membrane potential decreased. In the niacinamide groups, sodium nitroprusside- induced decline in mitochondrial membrane potential was reduced (P < 0.01). (4) Niacinamide groups also indicated a dose-dependent manner to improve the proliferative activity of nucleus pulposus cells as compared with sodium nitroprusside groups (P < 0.01). Significant differences were determined between the two groups (P < 0.01). (5) Results suggest that the excess nitric oxide can damage mitochondrial metabolic function of rabbit nucleus pulposus cells and cause cell energy metabolism. Niacinamide can reverse these damages by inhibiting nitric oxide synthesis, thereby contributing to the prevention against intervertebral disc degeneration. 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

磷酸钙骨水泥强化和修复椎弓根螺钉的生物力学研究

[目的]评价磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)强化和修复椎弓根螺钉的生物力学效果.[方法]6具新鲜成人尸体T11～L4共36个椎体,随机选取其中32个,分为4组(A,B,C,D),每组8个.A组随机选择一侧椎弓根置入直径为6.5 mm的椎弓根螺钉,另一侧以直径为3.5 mm的钻头导孔,均不穿透椎体前侧骨皮质.在材料实验机上进行轴向拔出实验,拔出速率为5 mm/min.然后向两侧椎弓根孔道注入配制好的磷酸钙骨水泥3～5 m1,植入与前相同的椎弓根螺钉,体温下(37℃)放置24 h后,再行前述拔出实验.B组应用聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)进行修复和强化,作为对照,操作方法同A组.C组植入椎弓根螺钉,添加或不添加CPC,进行周期抗屈实验.D组相同方法,应用PMMA作为对照.[结果] CPC对照组拔出力为(826.8±171.0)N,修复组为(1430.3±278.4)N,强化组为(1452.7±288.3)N; PMMA对照组拔出力为(839.7±181.1)N,修复组为(1846.2±342.1)N,强化组为(1946.9±359.4)N.CPC骨水泥强化组和修复组拔出力明显高于对照组,差异具有非常显著性意义(P＜0.05),但分别小于PMMA强化组和修复组.周期抗屈实验中,添加CPC可使椎弓根螺钉在同等负荷(200N,800个周期)下仅产生较小的位移,但强化效果不及PMMA.[结论]在植入椎弓根螺钉时添加具有生物活性的磷酸钙骨水泥可显著提高其初始稳定性,虽其强化效果不及PMMA,但其潜在的开发前景已经使PMMA的临床应用受到了极大的挑战.     

陈旧性胸腰椎骨折伴后凸畸形的截骨矫形术式选择

目的:观测经椎弓根截骨(PSO)与Smith-Petersen截骨(SPO)两种术式治疗胸腰椎陈旧骨折伴后凸畸形的矫形效果和临床疗效,探讨截骨矫形术式选择。方法:2006年3月~2014年12月,对47例创伤性后凸畸形患者进行了截骨矫形手术。其中男30例,女17,年龄22~69岁,平均42.5±15.5岁。均为陈旧性胸腰椎骨折导致的创伤性后凸畸形。47例患者主诉均为腰背部疼痛。针对不同病理特征和畸形程度,32例行PSO矫形,15例行SPO矫形。PSO手术在病椎行经椎弓根楔形截骨矫形,SPO手术在病椎上下及相邻间隙做2~3节段SPO截骨矫形。通过术前、术后和末次随访全脊柱正侧位X线片,测量后凸畸形Cobb角及矢状面平衡(SVA),分析两种方法矫形效果,采用疼痛视觉模拟评分(VAS)评估疼痛情况,应用Oswestry功能障碍指数(ODI)分析两种方法临床疗效。结果:47例中有42例获得随访,其中PSO手术29例,SPO手术13例。随访时间8~48个月,平均29.4±7.8个月。42例均获得骨性融合。后凸畸形Cobb角PSO组术前为41.8°±10.5°,术后为2.6°±1.2°,末次随访时为3.2°±1.3°,矫正率92.3%;SPO组术前为40.2°±9.6°,术后为4.9°±2.3°,末次随访时为5.3°±3.5°,矫正率86.8%。两组术后、末次随访时Cobb角与术前相比均有显著性差异(P0.05)。PSO组SVA术前为5.0±4.1cm,术后为-0.6±2.2cm,末次随访时为1.2±1.5cm;SPO组SVA术前为3.5±2.2cm,术后为0.8±0.6㎝,末次随访时为1.3±1.1cm。两组术后、末次随访时SVA与术前相比均有显著性差异(P0.05)。PSO组VAS术前为6.46±1.72,末次随访时为0.91±0.59,ODI术前为(69.4±12.1)%,末次随访时为(23.7±11.5)%;SPO组VAS术前为6.51±1.87,末次随访时为2.08±0.75,ODI术前为(68.1±16.3)%,末次随访时为(33.1±12.5)%,两组随访VAS和ODI与术前相比有显著性差异(P0.05)。结论:针对不同病理特征和畸形程度的胸腰椎陈旧骨折伴后凸畸形患者,选用PSO或SPO矫治均可取得良好矫形效果及临床疗效。     

青少年重度颈椎后凸畸形手术矫正

[目的]探讨青少年重度颈椎后凸畸形的手术方式、临床疗效及矢状面平衡.[方法]对2012年7月～2017年6月手术矫正的重度青少年颈椎后凸畸形患者18例进行回顾性分析.其中,采用前路手术13例,前后联合手术5例.采用VAS、NDI和JOA评分,以及颈椎后凸Cobb角(RKA)、C2～C,角、C0～C2角、C7倾斜角、C2...     

骨髓基质干细胞的单克隆培养和分化的实验研究

目的:通过对骨髓基质干细胞(MSCs)的单克隆化培养、鉴定和扩增,获得从一个单细胞克隆扩增出的大量均质的MSCs,并通过对这种MSCs诱导分化的实验研究,进一步确定这种单克隆来源的MSCs的分化和"横向分化能力".方法:无菌条件下获取大鼠的骨髓细胞,将获得的细胞经过充分打匀和滤过后制成单细胞悬液,然后以低密度,1×103个细胞数接种于培养板中,待细胞出现单细胞生长的克隆后,通过显微操作挑出相应的单细胞克隆.将挑出的单细胞克隆与相应的饲养细胞混合培养,快速进行扩增,扩增后的细胞进行细胞表面标志的鉴定,并进一步进行增殖和细胞分化实验.结果:在含有特定饲养层细胞的培养条件下,单克隆来源的MSCs能在抑制分化的状态下进行大量扩增,并保持细胞的均质性;而且在这种培养条件下,MSCs的增殖能力明显的高于常规培养条件;同时,获得的这种均质MSCs能成功的被诱导向软骨,神经样细胞分化.结论:通过骨髓细胞的单克隆培养,获得了均质和具有多向分化潜能的MSCs,这也为进一步更精确的研究MSCs的生物学特性提供了基础.     

烟酰胺对白介素-1β诱导HEK-293细胞凋亡的保护作用

 目的 研究烟酰胺对白介素-1β（IL-1β）诱导HEK-293细胞凋亡的保护作用及机制。方法 体外培养HEK-293细胞,将HEK-293细胞分成6组,在培养基内加不同浓度的IL-1β、烟酰胺干预。干预3 d后噻唑蓝（MTT）检测、Annexin V-PI染色、caspase-3、8、9活性检测、细胞内活性氧簇（ROS）水平、ATP浓度及线粒体膜电位检测。结果 应用烟酰胺的MTT吸光度明显升高,凋亡细胞比例明显降低,caspase-3、8、9活力降低,ATP浓度明显增加,ROS水平明显减少;线粒体膜电位红绿荧光比值明显增加。结论 体外条件下, 烟酰胺促进HEK-293细胞的增殖并抑制IL-1β诱导的HEK-293细胞凋亡,其对细胞凋亡的保护作用可能主要通过保护线粒体功能从而改善细胞线粒体能量代谢来实现。     

全髋关节表面置换术的近期疗效观察

[目的]评价全髋关节表面置换术治疗髋关节疾病的近期疗效并探讨其临床体会.[方法]回顾性分析2006年10月～2008年4月行全髋关节表面置换术患者68例81髋,男32例40髋,女36例41髋;年龄24～74岁,平均42.5岁.采用金属对金属表面髋假体(metal on metal surface arthroplasty,MMSA),随访6～25个月,平均14个月,进行髋关节Harris评分.[结果]本组病例随访期间无1例发生严重并发症.术后髋关节疼痛均明显好转,Harris评分由术前平均36分(30～45分)提高到术后平均93分(84～98分),其中优70髋,良11髋,优良率100%.[结论]全髋关节表面置换术治疗年轻患者和对运动要求较高的老年患者的近期疗效满意,术后髋关节疼痛和髋关节功能明显改善,严格的临床适应证、完善的术前准备、精细的手术操作和对表面髋特性的清晰认识是全髋关节表面置换术成功的关键.