骨桥蛋白反义基因在食管癌浸润与转移中的作用

目的:探讨骨桥蛋白(OPN)反义基因对食管癌细胞增殖和转移的影响,为食管癌基因治疗提供理论依据。方法： PCR扩增获得人OPN基因,连接pcDNA3.1(+)载体,酶切、测序。脂质体介导将pcDNA3.1 -ANOPN基因转入ECA 109,G418筛选获得稳定表达ANOPN基因的转染细胞ECA-ANOPN、表达空载体的ECA-vect细胞及空白对照ECA 。RT-PCR检测ANOPN mRNA、免疫组织化学检测ANOPN基因蛋白表达。体外观察各组细胞生长速度、倍增时间,Transwell小室法检测细胞黏附、侵袭迁移能力的差异。结果：载体构建正确,测序结果与GenBank中公布的序列同源性为100%。与ECA-vect、ECA组比较,ECA-ANOPN细胞OPN的表达率明显降低（P<0.05）,生长速度明显减慢（P<0.05）,倍增时间增加（P<0.05）,透膜细胞数明显降低（P<0.01）。结论：ANOPN基因的稳定表达明显抑制ECA 109细胞的恶性表型。