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目的评价猪来源关节软骨脱细胞支架的生物安全性。方法取猪四肢关节软骨,分别制备脱细胞和未脱细胞软骨支架。在人软骨细胞中分别加入浓度为100%、50%、25%的脱细胞软骨支架浸提液[无血清DMEM培养液与支架表面积按1ml:(3~6)cm2比例混合,37℃静置72h],计算相对增殖率,判定其体外细胞毒性。0.9%NaCl与支架表面积按1ml:(3~6)cm2比例混合,37℃静置72h制备脱细胞软骨支架浸提液,分别用于全身急性毒性实验(小白鼠)、溶血实验、热原检测实验、皮内刺激实验(大白兔),分别观察其体内毒性、溶血程度、热原和刺激情况。在大白兔体内分别埋植脱细胞软骨支架与未脱细胞软骨支架,观察炎症反应和细胞免疫情况。结果猪脱细胞软骨支架浸提液对细胞生长无抑制作用,无细胞毒性。注射支架浸提液后小白鼠一般情况良好,无全身急性毒性反应。支架浸提液溶血程度为1.3%,无溶血作用。支架浸提液无热原存在且原发刺激指数为0分,皮内刺激实验阴性。脱细胞软骨支架与未脱细胞软骨支架相比免疫原性小,无炎症反应和淋巴细胞浸润。结论猪来源关节软骨脱细胞支架具有良好的生物相容性,将有可能成为理想的天然生物材料,具有良好的应用前景。 相似文献
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人乳头瘤病毒16 E7基因的原核表达及表达条件的优化 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:构建pET-28a(+)-HPV16 E7原核表达质粒,并对其表达条件进行优化,为进一步研究HPV16E7致病机制及HPV疫苗提供相应的技术平台。方法:应用基因重组技术,构建pET-28a(+)与HPV16 E7(标准株和湖北株)的原核表达重组质粒,用PCR、限制性内切酶酶切和核酸序列检测对重组质粒DNA进行鉴定,将其转入宿主菌E.coliBL21(DE 3)进行诱导以表达蛋白;SDS-PAGE及Western blot检测鉴定表达蛋白的分子量及特异性。优化诱导表达的条件,如温度、IPTG浓度、适用的培养基,探讨不同温度下蛋白的表达形式;纯化回收HPV16 E7蛋白。结果:PCR、限制性内切酶酶切和核酸序列检测证实重组质粒中插入的目的基因,其DNA大小、方向、插入位点和阅读框架均正确;HPV16 E7(标准株)蛋白得到高效原核表达,最佳表达条件:表达HPV16 E7的工程菌BL21(DE 3)的最佳诱导温度是37℃,诱导剂IPTG的浓度为0.3-0.4 mmol/L,最佳培养基为1.5倍LB。结论:pET-28a(+)-HPV16 E7标准株和湖北株重组载体构建成功,人乳头瘤病毒16 E7标准株获得高效原核表达。 相似文献
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目的 探讨大动脉闭塞(颈内动脉或大脑中动脉M1近端闭塞)的急性脑梗死患者MRI磁敏感加权成像(SWI)上双侧大脑内静脉(ICV)信号不对称与进展为恶性脑水肿以及远期预后不良是否有关。方法 收集大动脉闭塞的急性脑梗死患者的临床及影像学资料;根据SWI上双侧ICV信号是否对称将其分为ICV信号对称组及ICV信号不对称组,比较2组患者发生恶性脑水肿及远期不良预后的差异。结果 共纳入32例患者,美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分中位数17分,ICV信号对称组19例,ICV信号不对称组13例。与ICV信号对称组相比,ICV信号不对称组进展为恶性脑水肿的比例更高(76.9% vs. 5.9%,P < 0.001),3个月预后良好的比例更低(23.1% vs. 70.6%, P = 0.025),3个月病死率更高(46.2% vs. 0%,P = 0.003)。二元logistic回归分析结果显示,双侧ICV信号不对称与大动脉闭塞的急性脑梗死患者发生恶性脑水肿相关(OR = 43.333,95%CI:3.897~481.820,P = 0.020),脑水肿进展与大动脉闭塞的急性脑梗死发病3个月预后不良相关(OR = 0.330,95%CI:0.002~0.653,P = 0.025)。结论 大动脉闭塞的急性脑梗死患者MRI SWI序列上双侧ICV信号不对称可能与进展为恶性脑水肿有关,而脑水肿进展可能与发病3个月预后不良有关。 相似文献
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放射治疗(以下简称放疗)是头颈部恶性肿瘤常用的治疗方法之一,患者接受放疗时颈部通常被包括在放射野内,因此颈部的各种组织均受到了放射损伤。放射性颈动脉狭窄作为放射损伤的一种类型,早期症状并不明显,但随着患者生存时间的延长,放疗后颈部血管狭窄逐渐出现,可引起脑卒中,从而影响患者生存率。血管内支架置入术是近年发展起来的一种有效的治疗手段,2007-03-2012-07我院神经内科对8例因头颈部恶性肿瘤放疗后颈动脉狭窄的患者实行颈动脉支架置入术(carotid artery stenting,CAS),取得较好效果,现报道如下。 相似文献
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利用质粒诱导系统,将福氏志贺氏菌O抗原转入伤寒沙门氏菌口服疫苗Ty21a株中,构建了一株即有福氏志贺氏菌O抗原性又有伤寒沙门氏菌Ty21a抗原性的二阶杂交菌株。 相似文献