自噬在吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡中的作用

目的:研究自噬在吉西他滨(gemcitabine,Gem)诱导胰腺癌细胞SW1990凋亡中的作用,并以氯喹特异性抑制自噬,以探讨其可能机制。方法:采用CCK8法检测Gem对胰腺癌细胞增殖的影响,并用实时定量PCR检测自噬相关基因LC3的表达,以p62免疫荧光染色检测细胞内自噬泡,通过Western印迹法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin 1的表达,并用AnnexinⅤ/PI流式细胞方法检测Gem诱导后细胞凋亡的变化。进一步通过氯喹抑制自噬,检测自噬抑制前后细胞增殖、自噬及凋亡的变化。结果:Gem对胰腺癌细胞SW1990增殖具有部分抑制作用,Gem作用能迅速激活细胞自噬从而产生耐药。LC3的mRNA表达升高1.4~2.2倍(P<0.05),LC3-Ⅱ蛋白水平升高1.5~2.7倍(P<0.05)。Gem和氯喹联合用药组较Gem单药组细胞凋亡蛋白Caspase-3表达升高,细胞存活率从64.3%±3.1%降低为35.2%±3.4%(P<0.05)。结论:自噬在Gem诱导胰腺癌细胞凋亡的过程中可能起到保护作用,氯喹抑制自噬后可增强Gem的促凋亡作用。     

原发性腹膜后肿瘤诊断和治疗（附81例报告）

目的　探讨原发性腹膜后肿瘤 (PRT)的诊断与外科治疗经验。方法　分析 1980～2 0 0 0年共收治的 81例原发性腹膜后肿瘤。其中良性 34例 ,恶性 47例 ,均经组织病理学证实 ,77例施行手术治疗。观察腹膜后肿瘤在临床表现、影像学检查、病理类型、手术切除及复发等方面的特点。结果　B型超声、CT检查有助于原发性腹膜后肿瘤的早期发现。良性腹膜后肿瘤病程长 (17.5个月 ) ,完整切除率高 (85 .2 9% ) ,很少合并脏器切除 (17.6 5 % ) ;而恶性肿瘤病程短 (7.3个月 ) ,完整切除率低 (6 5 .12 % ) ,合并脏器切除率高 (2 7.91% )。腹膜后肿瘤复发率 19.30 % ,复发完整切除率达6 3.6 3%。结论　B型超声及CT检查是诊断本病的主要手段 ,手术完整切除肿瘤是治疗的主要手段 ,对复发肿瘤亦应争取再次手术。     

老年食管癌贲门癌术后并急性心肌梗塞的临床分析

对１１１５例手术治疗老年食管癌贲门癌术后并发急性心肌梗塞（ＡＭＩ）４例分析，结果表明老年人心脏代偿功能减退及胸部大手术创伤的应激反应是术后并发ＡＭＩ的重要因素，无典型心绞痛及心律失常并发症率高是老年ＡＭＩ的特点。选择合适病例，做好术前准备及加强术后心脏功能监护是预防术后ＡＭＩ及降低老年人开胸术后死亡率的重要措施。     

HSP 72 mRNA的表达在肝脏热缺血-再灌注损伤中的意义

目的研究大鼠肝脏热缺血-再灌注中热休克蛋白(HSP 72) mRNA表达的意义.方法 40只SD大鼠随机分成亚砷酸钠组(SA组)和对照组(NS组).前者预先外周静脉给予SA每千克体质量6 mg,后者给予生理盐水.24 h后阻断肝脏中、左叶血供90 min,再灌注3、6 h,分别采用RT-PCR、Western blot方法检测肝脏中HSP 72 mRNA和HSP 72的表达;外周血测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH);观察7 d存活率.结果肝脏热缺血90 min再灌注3、6 h后,SA组和对照组均有强HSP 72 mRNA表达;SA组有强HSP 72表达,对照组则弱表达;对照组血清ALT、AST、LDH显著高于SA组(P＜0.01);SA组7 d生存率显著高于对照组(P＜0.05).结论肝脏热缺血-再灌注可诱导肝脏产生热休克反应,HSP 72 mRNA的表达反映了肝脏的损伤程度;预先诱导肝脏产生热休克反应,HSP 72 mRNA的表达则反映了肝脏提前出现应激反应,HSP 72的产生直接对肝脏热缺血-再灌注损伤提供细胞保护作用.     

siRNA对肝癌细胞中特异性异常表达FGFR3基因的抑制效应研究

目的设计和筛选有效抑制纤维母细胞生长因子受体3基因（FGFR3）表达的siRNA序列,构建相应表达载体,研究其对肝癌细胞HepG2生物学特性的影响。方法根据FGFR3序列,设计3条siRNA序列及1条对照序列：以pRNAT-U 6．1／Neo为载体,并以载体中同时构建的绿色荧光蛋白（GFP）基因编码序列为转染效率内参照;采用脂质体法将pRNAT-U 6．1／Neo-siRNA转染肝癌细胞HepG2;以实时荧光定量PCR（Real time PCR）检测FGFR3的mRNA表达变化,Western印迹法检测FGFR3蛋白质表达变化;[^3H]胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法（^3H-Tdr）和细胞克隆形成法分析DNA合成变化及细胞生长能力。结果所设计合成的3条siRNA序列中均能抑制FGFR3的表达,对mRNA表达抑制率约为74．04％～87．25％,在蛋白质水平表达抑制率为19．65％～90．40％。转染siRNA后,HepG2的细胞克隆形成能力和DNA合成能力明显受到抑制。结论siRNA能够有效抑制肝癌细胞FGFR3的表达,并继而抑制肝癌细胞的DNA合成和生长,能够为肝癌基因表达调控研究提供新的靶基因。     

PCNA在角化囊肿及始基囊肿中的表达及意义

目的：探讨牙源性角化囊肿中PCNA的表达及意义。方法：采用免疫组化方法,检测PCNA在正常牙囊或残余牙板上皮及牙源性角化囊肿、始基囊肿中的表达。结果：PCNA在正常牙囊或残余牙板上皮中呈阴性表达,PCNA在角化囊肿及始基囊肿中呈阳性表达,表达率分别为35%和2.7%,统计学检验两者阳性表达率有显著性差异。结论：角化囊肿比始基囊肿可能更具有细胞增殖活性。     

富含α-乳清蛋白及AA/DHA配方奶粉对足月婴儿体格生长及耐受性的影响

[目的]评价富含α-乳清蛋白及AA/DHA但总蛋白含量略低的配方奶粉对婴儿生后前3个月体格生长的作用,并观察其喂养后胃肠道的耐受性.[方法]采用前瞻、随机、标签开放性的多中心研究.喂养母亲记录喂养最初3周每日耐受性指标,医生观察并记录1、2及3月龄时婴儿体重、身长和头围等生长指标.[结果]喂养3个月后,体重、身长和头围增值在母乳组、α-乳清蛋白组和对照配方组间差异均无显著性（P＞0.05）.婴儿的耐受性观察发现,肠胀气、大便性状和睡眠状况在三组间差异有显著性（P＜0.05）,α-乳清蛋白配方组婴儿大便性状和睡眠状况与对照配方组相比,更接近母乳喂养组;母乳喂养组婴儿肠胀气发生情况显著少于两个配方组.皮疹、腹痛等耐受性指标三组间差异无显著性（P＞0.05）.[结论]试验配方富含α-乳清蛋白及DHA/AA,能提供足够营养满足婴儿生长所需,其生后头3月生长速率同母乳喂养儿及对照配方喂养儿相似.且婴儿对这种新配方奶粉的耐受性良好,较标准配方奶粉更接近母乳喂养.