成人骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛样细胞的研究进展

学术背景：近几年采用胰岛细胞或胰腺移植治疗糖尿病取得一些疗效，但仍存在供体匮乏和免疫排斥两大难题。骨髓间充质干细胞在体外可诱导成为胰岛样细胞。 目的：分析总结骨髓间充质细胞体外向胰岛样细胞的诱导分化研究进展。检索策略：由该论文的研究人员应用计算机检索Pubmed数据库1997—08／2007-08的相关文献，检索词“mesenchymal stem cells，insulin secreting cell”，并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库1997-08／2007-08的相关文献，检索词“骨髓间充质干细胞，胰岛素分泌细胞”，并限定文章语言种类为中文。共检索到108篇文献，对资料进行初审，纳入标准：①文章所述内容应与骨髓间充质细胞体外诱导分化为胰岛样细胞密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准：①重复性研究。②Meta分析。 文献评价：文献的来源主要是通过对骨髓间充质细胞体外向胰岛样细胞的诱导分化方面内容进行汇总分析。所选用的30篇文献中，2篇为综述，其余均为临床或基础实验研究。 资料综合：①由于胰腺和神经系统具有相似的发育控制机制，目前认为神经生长因子可能是胰腺发育的关键信号。利用人骨髓间充质干细胞多向分化能力，用表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长凶子将其诱导成为nestin阳性细胞，该细胞在添加含有胰岛细胞赖以生存的条件培养液中为适宜微环境，将被进一步诱导为胰腺样细胞。②目前针对胰岛素样细胞的鉴定与功能学研究有以下几方面：细胞形态学观察是否有类似胰岛样细胞团的聚集;免疫组织化学检测诱导后细胞胰岛素、胰高血糖素和生长抑素的表达;用RT—PCR法对诱导后细胞的胰岛素及胰高血糖素基因表达测定;葡萄糖刺激的胰岛索释放试验来研究诱导后?     

改良胰岛素耐量试验在2型糖尿病中的应用

临床采用胰岛素治疗糖尿病时 ,起始剂量多根据体重计算 ,并据血糖情况调整 ,一般不超过 6U/d,2～ 3天调整 1次。但此种方法达到合理胰岛素用量的时间较长 ,患者的住院费用相应增加。我们将改良胰岛素耐量试验用于 1 6例 2型糖尿病患者 ,旨在探讨调整胰岛素用量的相关指标。1　资料与方法观察组为 1 6例 2型糖尿病患者 ,男 1 2例、女 4例 ,年龄 60 .7± 7.6岁 ;均符合 1 999年 WHO制定的糖尿病诊断标准。同时选本院 36例健康职工作为正常对照组 ,两组性别、年龄有可比性。观察组入院当日口服双胍类药物控制血糖 ,第 2天空腹抽血 ,查肝功、…     

进行性骨干发育不良并青春期发育延迟1例报告

进行性骨干发育不良并青春期发育延迟１例报告德州市人民医院（２５３０１４）赵青，杨乃龙，许远征患者男，２９岁，于１９９５年１２月就诊。患者４岁始出现双下肢持续性钝痛，以股骨下端、胫骨上端明显，活动或碰撞骨面疼痛加剧，鸭行步态。１１岁时下肢痛较剧，下蹲后...     

测定GAD抗体的两种方法比较

谷氨酸脱羧酶 (ＧＡＤ)是抑制性神经递质γ 氨基丁酸的合成酶 ,主要以相对分子质量分别为 6 .5× 10 3 和 6 .7× 10 3 2种同工酶形式存在。笔者比较了放射免疫与酶联免疫 2种方法测定ＧＡＤ抗体的价值 ,现报道如下。一、资料与方法1.初诊的 2型糖尿病患者 87例 ,男37例 ,女 5 0例 ,年龄 (4 3.2± 12 .6 )岁 ,病程 (3.2± 2 .8)年。空腹取静脉血 ,分离血清 ,4℃保存 ,5ｄ内测定ＧＡＤ抗体 ,并行口服葡萄糖耐量试验 (ＯＧＴＴ)及Ｃ肽释放试验。 1年内有 19例患者注射胰岛素并第 2次测定ＧＡＤ抗体。2 .ＧＡＤ抗体测定采用放射免疫法(法国ＣＩ…     

青岛沿海地区2型糖尿病患者能量摄入调查分析

目的了解青岛沿海地区2型糖尿病患者的能量摄入现状及膳食结构，为进一步进行大规模的青岛沿海地区糖耐量异常（IGT）及糖尿病流行病学调查、IGT的饮食干预及糖尿病患者膳食治疗方案的修订提供依据。方法共选择调查资料齐全的2型糖尿病患者337例，采用问卷调查方式，应用自行设计的饮食控制程序，根据患者性别、身高、体重、活动强度计算出患者每日所需总热量的上、下限；根据患者每日摄入食物计算了实际摄入总热量及三大营养素的构成比例。结果研究对象热能摄入的平均水平尚在标准范围内，但有66．47％的患者能量摄入不合理，其中42．14％的患者营养过剩。膳食结构也存在不合理之处，脂肪供热比例偏高，碳水化合物在低限附近，蛋白质供热比较合适。结论青岛沿海地区2型糖尿患者人群中热能摄入“不足”与“过剩”并存，以摄入过剩为主，“富裕病”呈上升趋势。我国以传统的植物性食物（谷物）为主的膳食模式正在向高脂肪、高蛋白，特别是高动物性食物的西方膳食模式转变，但存在地区差异。     

两种基因的多态性或突变与糖尿病肾病的关系

一氧化氮合酶(eNOS)基因、血浆纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)基因突变或多态与糖尿病肾病(DN)的发生、发展有关[1],但由于种族和病例选择的差异,上述基因突变或多态与DN的关系各家报道不一。为此我们选择中国北方汉人为研究对象,观察PAI-1基因启动子区4G/5G多态和eNOS基因第7外显子G→T点突变与糖尿病肾病的相关性。     

PAI-1基因启动子区4G/5G基因多态和Enos第4内含子a/b基因多态与糖尿病肾病的相关性研究

为探讨 PAI- 1基因启动子区 4 G/ 5 G基因多态性、一氧化氮合酶 (e NOS)第 4内含子 2 7bp插入 /缺失 (a/b)多态性与糖尿病肾病 (DN)的相关性 ,采用发色底物法测定 PAI- 1活性 ;等位基因特异性引物 PCR扩增技术测定 PAI- 1基因 4 G/ 5 G多态性 ;聚合酶链反应测定 e NOS基因第 4内含子 2 7bp的 a/ b多态性。结果显示 ,Hb A1c、SBP、TC、e NOS基因第 4内含子 a/ b多态均属 DN的独立危险因素。早期糖尿病肾病组 (DN+组 ) a等位基因及 ab基因型频率显著高于糖尿病非肾病组 (DN-组 ) (P<0 .0 5 )。DN+组血浆 PAI- 1活性明显高于 DN-组 (P<0 .0 5 ) ;4 G纯合子组 PAI- 1活性明显高于 4 G/ 5 G杂合子及 5 G纯合子组 (P<0 .0 0 5 )。2型糖尿病患者中 ,4 G纯合子和a/ b杂合子携带者 DN的相对风险明显增加 (P<0 .0 5 ) ,4 G杂合子携带者 DN的相对风险增加不明显 (P>0 .0 5 )。当 a/ b杂合子和 4 G纯合子基因多态并存时 DN的发病风险明显增加。认为 PAI- 1基因启动子区 4 G/ 5 G基因多态、e NOS基因第 4内含子 a/ b多态与 DN的发生、发展有关。两种基因多态同时存在时 ,DN的发病风险明显增加     

成人骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌样细胞及其鉴定

背景:体外诱导人骨髓间充质干细胞定向分化为胰岛样细胞,目前尚无成熟的鉴定方案.转基因诱导要求条件高,程序复杂,化学诱导剂诱导为现阶段较多采用的一类方法.目的:探讨成人骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛样细胞的条件.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-01/10在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成.材料:骨髓来源于青岛大学医学院附属医院内分泌科行自体干细胞移植治疗的糖尿病患者,对治疗及实验均签署知情同意书.表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子为Peprotech Asia公司产品,B27添加剂为Gibco公司产品,尼克酰胺、2-巯基乙醇、谷氨酰胺、双硫踪为Sigma公司产品.方法:采用Percoll法分离成人骨髓间充质干细胞,加入含体积分数为0.1胎牛血清的LG-DMEM进行培养,胰蛋白酶消化传代.取第3～5代细胞,按1×108 L-1密度接种,分3阶段诱导:第1阶段加入含2-巯基乙醇、谷氨酰胺的HG-DMEM,培养2 d;第2阶段加入含碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、B27添加剂、谷氨酰胺的HG-DMEM,培养6 d;第3阶段加入含尼克酰胺、2-巯基乙醇的HG-DMEM,培养6 d.对照组采用单纯的HG-DMEM进行培养.主要观察指标:相差显微镜下观察细胞形态变化,诱导第2阶段行免疫荧光鉴定PDX-1基因的表达,诱导第3阶段行双硫腙染色鉴定胰岛β样细胞团,电化学发光法测定低糖/高糖刺激下胰岛素的分泌情况.结果:未经诱导的骨髓间充质干细胞呈长梭形贴壁生长,诱导后胞逐渐变圆,并聚集成团.诱导8 d细胞PDX-1基因呈阳性表达,诱导14 d细胞团双硫腙染色呈棕红色.经低糖、高糖刺激后,对照组无胰岛素释放,诱导14 d细胞团培养基中胰岛素含量显著升高(t=3.638～9.387,P均 < 0.01).结论:2-巯基乙醇、谷氨酰胺、表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子及尼克酰胺等可在体外诱导成人骨髓间充质干细胞分化为具有分泌胰岛素功能的胰岛样细胞.     

第60届美国糖尿病协会(ADA)年会大会报道

美国糖尿病协会（ＡＤＡ）第６０届年会于２０００年６月９～１３日在圣·安东尼奥召开，会议涉及糖尿病流行病学、遗传学与免疫学、胰岛生物学及胰岛素信号、糖尿病慢性并发症等方面。现将会议主要内容报道如下：一、糖尿病流行病学１．青少年糖尿病的流行趋势：２型糖尿病的发病年龄日趋年轻化，佛罗里达州糖尿病中心研究表明：青少年２型糖尿病５年发病率从８．７％上升至１９．９％，平均诊断年龄１３．５岁，以每年１８％的速度递增，ＢＭＩ（体重指数）＞３０者与ＢＭＩ在２５～２９．９者发病率分别是正常ＢＭＩ的２３倍和１９倍，女…