血红素氧合酶-1基因真核表达载体的构建及其在血管内皮细胞中的表达

目的克隆血红素氧合酶-1（HO-1）基因，并构建真核表达载体，建立重组HO-1蛋白的血管内皮表达细胞系。方法从大鼠脾脏中提取RNA，利用反转录聚合酶链式反应（RT—PCR），克隆到鼠的HO-1基因，并对该基因片段进行T载体克隆、酶切鉴定和测序分析。将HO-1基因插入到真核表达载体pcDNA3中，利用脂质体介导将重组质粒转染血管内皮细胞ECV304细胞，经G418加压筛选后，对细胞进行间接免疫荧光和Western blot分析。结果DNA测序分析表明克隆的HO-1基因与文献报道一致，酶切鉴定证实基因正确地插入表达载体中。经间接免疫荧光和Western blot表明重组HO-1蛋白在ECV304细胞中获得高效表达，其分子量约为32kD。结论HO-1基因真核表达载体的成功构建和重组HO-1蛋白在血管内皮细胞系中的高效表达，为进一步研究其生物学功能奠定了基础。     

接受老龄亲属活体供肾移植者采用小剂量西罗莫司的近期临床观察

目的为降低老龄活体供肾移植后免疫抑制剂对移植肾的毒性作用，探讨应用小剂量西罗莫司的临床效果及其对移植肾的影响。方法19例亲属活体供肾移植，供者的年龄均超过55岁，受者的年龄均在30岁以下。9例肾移植后采用小剂量西罗莫司、霉酚酸酯（MMF）及泼尼松（Pred）联合用药预防急性排斥反应，10例采用环孢素A（或他克莫司）、MMF（或硫唑嘌呤）及Pred联合用药预防急性排斥反应。两种用药方案者在供、受者年龄方面的差异无统计学意义。统计术后1年、2年、3年时的血肌酐平均值，爬行肌酐的发生率，排斥反应发生率，不良事件发生率，慢性移植肾肾病（CAN）发生率。结果术后1年、2年、3年，采用小剂量西罗莫司者的血肌酐水平低于使用环孢素A（CsA）或他克莫司（FK506）者，其术后2、3年时的血肌酐水平明显低于使用CsA或FK506者（P〈0．05）。使用西罗莫司者高尿酸血症发生率为11．1％，而使用CsA或FK506者这一比例为40．0％，差异有统计学意义（P〈0．05）；使用西罗莫司者爬行肌酐及慢性移植肾肾病的发生率均为11．1％，使用CsA或FK506者均为30．0％，差异有统计学意义（P〈0．05）；二者在急性排斥反应、肾功能恢复延迟、少尿、蛋白尿、血尿等不良事件发生率方面的差异无统计学意义。结论对于老龄活体供肾，移植后受者采用小剂量西罗莫司联合霉酚酸酯、泼尼松预防急性排斥反应是安全、有效的，其远期效果有待进一步观察。     

单中心扩展标准的公民逝世后器官捐献肾移植的近期效果观察

目的分析扩展标准的公民逝世后器官捐献(ECD)肾移植病人的近期效果。方法ECD肾移植50例,标准的公民逝世后器官捐献(SCD)肾移植140例,比较两组移植肾病人早期恢复情况、术后1年内移植肾功能变化、受者和移植肾存活情况以及排斥反应、感染和手术并发症发生率。结果 ECD肾移植组病人术后1年的受者和移植肾存活率、总体感染发生率、急性排斥反应发生率与同期SCD组病人比较,差异均无统计学意义(P0.05)。但ECD组病人在肾移植术后第1、3、6、12个月血肌酐水平高于SCD组,ECD组肾小球滤过率(eGFR)SCD组,差异有统计学意义(P0.05)。结论现行ECD纳入标准下ECD肾移植术后近期效果良好,虽然在移植肾功能(血肌酐水平和eGFR)方面差于SCD肾移植,但在合理选择受者的前提下ECD可作为扩大供体来源的重要途径,其远期效果仍需进步观察。     

实体器官移植受者术后可逆性后部白质脑病综合征3例并文献复习

本研究对华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的1例儿童肝移植及2例成人肾移植术后并发可逆性后部白质脑病综合征(posterior reversible encephalopathy syndrome, PRES)的临床资料进行回顾性总结, 分析其发病特点、诊疗经过并复习相关文献, 为临床诊疗提供参考。     

保留受者胰腺的肝胰十二指肠器官簇移植一例报告

目的探讨保留受者胰腺的肝胰十二指肠器官簇移植术的方法和疗效。方法2006年9月28日为1例肝移植术后发生胆道并发症合并1型糖尿病的患者实施了肝胰十二指肠器官簇移植，术中采用保留受者胰腺的方法。结果术后1周时，受者肝脏功能基本恢复正常；术后第2天即停用胰岛素静脉泵，移植胰腺功能恢复正常。术后第1天胰尾部出现胰瘘，但引流通畅，未予以其他特殊处理，术后第4天胰瘘自行愈合；术后第4天胃肠功能恢复正常；术后第5天，受者即可自行下床活动。受者现已存活12个月，肝脏和胰腺功能均正常。结论保留受者胰腺的方法不仅简化了器官簇移植术的操作，而且使术中和术后并发症明显减少，从而为需行肝胰十二指肠器官簇移植的良性病受者探索出了一种更为简捷安全的新手术方法。     

超出米兰标准的原发性肝癌肝移植术后化疗对患者存活和肿瘤复发率的影响

目的 探讨超出米兰标准的原发性肝癌肝移植术后化疗对患者存活时间及肿瘤复发率的影响。方法 2002年7月至2004年12月间对46例超出米兰标准的原发性肝癌患者行原位肝移植，其中44例患者接受术后化疗，分析术后化疗患者的临床资料，观察化疗后的不良反应，统计患者肝移植术后的存活率及肿瘤复发率，比较术前是否存在癌栓以及术后是否化疗对存活率和肿瘤复发率的影响。结果 44例患者在化疗过程中均出现不同程度的胃肠道反应；16例患者出现肝功能损害，经停药、调整免疫抑制剂用量及使用护肝药后恢复；7例患者出现白细胞减少，采用粒细胞集落刺激因子类药物治疗后恢复正常。肝移植术后化疗的患者存活超过1年的有22例，1年存活率为47．8％，最长存活至今已有30个月。26例患者在1年内肿瘤复发，1年复发率为59．1％。术前有癌栓的患者术后肿瘤复发率明显高于无癌栓的患者，存活率明显低于无癌栓的患者。肝移植术后化疗的患者与术后未化疗的患者相比，存活率升高，肿瘤复发率降低。结论 超出米兰标准的原发性肝癌患者肝移植术后化疗可提高生存率，减少肿瘤复发的可能。肝移植术后辅助性化疗是安全、可行的，且患者可以耐受。     

血红素氧合酶-1抑制T淋巴细胞对血管内皮细胞的粘附作用

目的研究血红素氧合酶-1(HO-1)抑制T淋巴细胞对血管内皮细胞的粘附作用。方法采用脂质体介导基因转染技术将PcDNA3-HO-1质粒转入血管内皮细胞。用间接免疫荧光技术在蛋白质水平检测HO-1在血管内皮细胞上的表达;用γ-干扰素(INF-γ)活化血管内皮细胞;用CFSE标记植物血凝素(PHA)活化的JurkatT细胞;采用粘附阻断实验观察转染HO-1的血管内皮细胞和JurkatT细胞间的粘附作用。结果HO-1可在人血管内皮细胞系中稳定表达;转染HO-1的活化内皮细胞与JurkatT细胞的粘附作用显著下降,CFSE标记的阳性率为21.24%,而未转染的对照组CFSE标记的阳性率为56.16%,两组相比,差异有统计学意义(P<0.05);应用HO-1抑制剂ZnPP后,粘附抑制作用消失。结论HO-1可以明显抑制T淋巴细胞对血管内皮细胞的粘附作用。     

生长激素对肝移植患者术后恢复的影响

目的 了解肝移植术后使用重组生长激素(rhGH)对患者蛋白质代谢的影响和其安全性.方法 随机选择40例肝移植患者分为对照组和治疗组,每组各20例.治疗组在术后使用重组生长激素和肠外营养,对照组仅使用肠外营养,观察两组患者术后肝、肾功能,总蛋白和白蛋白水平的变化.结果 治疗组在经过10d重组生长激素治疗后总蛋白和白蛋白水平明显高于治疗前,总蛋白水平显著高于对照组,两组患者的肝、肾功能恢复和排斥反应发生率相似.结论 肝移植术后使用重组生长激素,可以有效提高患者的蛋白水平,有利于患者恢复.     

彩色多普勒超声诊断原位肝移植术后血管并发症

目的评价彩色多普勒血流成像(CDFI)对原位肝移植术(OLT)后血管并发症的诊断价值.方法回顾性分析55例原位肝移植患者的CDFI检查资料.结果55例OLT术后患者中,CDFI发现血管并发症患者7例(13%):2例肝动脉血栓形成患者肝门部肝动脉和肝内左右分支均未见彩色血流信号,1例门静脉右后叶支血栓形成,门静脉吻合口狭窄2例,门静脉肝动脉动静脉漏1例,肝静脉血栓形成1例,4例经手术或血管造影证实(4/7,57%).结论彩色多普勒超声对肝移植术后血管并发症的诊断具有重要价值.