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用显微切割-PCR检测石蜡标本微小病灶DNA异常 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :探讨在石蜡切片中行显微切割 PCR检测微小病灶基因突变和微卫星不稳定的方法及意义。方法 :选取本室实验性大鼠肺鳞癌浸润癌伴有支气管粘膜上皮增生、鳞状化生和 或不典型增生的蜡块标本 19例 ,分别切割各病变阶段组织并提取DNA用作PCR模板 ;SSCP检测P5 3基因第 5~ 8外显子突变及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测微卫星点ADRB2 的不稳定现象。结果 :7例支气管粘膜上皮增生 ,1例鳞状化生 ,12例不典型增生 ,19例浸润癌组织都分别成功地显微切割并提取DNA。除 1例上皮增生及 2例不典型增生组织PCR扩增失败外 ,其余切割组织P5 3外显子及微卫星点PCR扩增均获成功。 19例浸润癌组织 10例有P5 3基因突变 ,增生及鳞状化生组织未发现P5 3基因突变 ,10例不典型增生组织有 3例P5 3基因突变 ,这 3例标本中的浸润癌组织也都有相同外显子的突变。所有扩增成功微卫星点均未发现不稳定现象。结论 :在石蜡标本中进行显微切割 PCR检测DNA异常可获得较满意结果。联合应用连续切片 HE染色 显微切割 PCR 银染技术使定点对位分析肿瘤发生发展各阶段微小病灶中基因异常得以实现 ,对于研究癌前病变、不典型增生组织中DNA分子变化有重要应用价值 相似文献
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目的探讨输精管结扎术后对中老年男性性腺功能的远期影响。方法随机抽取有输精管结扎史的167例中老年男性,按照结扎年限不同分成10年组(10~19年)、20年组(20~29年)、30年组(≥30年)。按1∶1匹配未结扎、有生育史的167例中老年男性作为对照组。测量研究对象血清总睾酮(total testosterone,TT)、游离睾酮(free testosterone,c FT)、雌二醇(estradiol,E2)、性激素结合球蛋白(sex hormone binding globulin,SHBG)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平,简体中文版老年男性症状量表(CN-AMS)得分,比较两组间及不同结扎年限间的差异。结果结扎组与对照组在血清TT、c FT、E2、SHBG、FSH、LH水平及CN-AMS得分比较差异无统计学意义(P0.05)。结扎10年组、20年组与对照组的各指标比较差异无统计学意义(P0.05);结扎30年组血清c FT明显低于对照组(P0.05),血清TT、E2、SHBG、FSH、LH水平及CN-AMS得分比较差异无统计学意义(P0.05)。结论输精管结扎术后对中老年男性性腺功能远期没有明显影响。 相似文献
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真核细胞能产生一类长度19~30个核苷酸(nt)的小RNA,这些小RNA能在降解mRNA及翻译抑制等方面起靶向作用。与之相关的Argonaut家族蛋白分为2个亚家族:AGO亚家族,包括AGO1~44个成员,表达分布广泛,主要与miRNAs和siRNAs结合、通过与RNA干扰类似的途径抑制目的基因表达;另一个是PIWI亚家族,包括PIWI、Aubgine(AUB)和AGO3,均局限表达于睾丸组织。最近4个研究小组在哺乳动物的睾丸内发现了一类新的小RNA,因能与PIWI亚家族蛋白结合,故命名为piwi-interfering RNAs(piRNAs),可能在精子发生的基因表达调控中起重要作用。 相似文献
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目的评估输精管结扎对中老年男性脂类代谢及肝肾功能的影响。方法对湖北省武汉市城区和江苏省南京市金湖县农村共2 352名中老年男性进行生殖健康现状调查,调查其输精管结扎情况并进行体格检查和血脂、肝肾功能指标及生殖激素检测。结果输精管结扎与总胆红素、直接胆红素、总蛋白、白蛋白及球蛋白相关(β=0.057、0.059、0.085、0.071、0.067,P0.01),结扎组人群上述指标数值低于未结扎组。输精管结扎与中老年男性脂类代谢、肝功能其他指标及肌酐、尿素均不相关(P0.05)。结论输精管结扎对中老年男性脂类代谢和肾功能无不良影响,但可能影响其总胆红素、直接胆红素和肝脏合成蛋白水平,有待进一步研究。 相似文献
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INK4a/ARF基因是一个在人类癌症中 (包括肺癌 )最容易被破坏的基因 ,它可利用不同的第一个外显子 (1α、1β)和下游两个共同的外显子编码两个不同的蛋白 ,一个是细胞周期素依赖激酶抑制剂P16INK4a;另一个是P19ARF(p19alternativereadingframe)是一个可以改变的阅读框架 ,能结合MDM2(murinedoubleminute 2 ,小鼠双微 2 )并促进MDM2的降解 ,而稳定野生型P5 3蛋白 ,从而使p2 1上调引起细胞周期阻滞或诱导细胞凋亡。本研究在石蜡切片中利用免疫组化S P法检测P16INK4a… 相似文献
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目的 建立用无精子症患者精液进行Y染色体微缺失检查的简便方法,并用于检测我国无精子症患者Y染色体微缺失的发生情况和位点.方法 无精子症患者241例,取精液标本(其中51例有血液标本),45例正常精液标本作为对照,快速裂解提取DNA,用4组多重PCR检测分布于AZFa、AZFb、AZFc区共15个序列标签位点(STS)的缺失.PCR产物测序证实无精子症患者精液为模板扩增的准确性,琼脂糖凝胶电泳观察精液标本和相应血液标本PCR产物的一致性.结果 所有多重PCR反应均成功进行,产物测序证实为目的 片段.正常精液未检测到Y染色体微缺失,而无精子症患者共检测到26例(10.8%)Y染色体微缺失,均有欧洲男科学会(EAA)和欧洲分子遗传学质量控制体系(EMQN)推荐STS位点的缺失:AZFa区、AZFb区各2例(各占7.7%),3例(11.5%)位于AZFb+AZFc区,19例(73.1%)位于AZFc区.血液标本检测结果与精液标本检测结果完全一致.结论 用无精子症患者精液进行Y染色体微缺失检查是可行、可靠的.初步表明EAA/EMQN推荐STS位点适合我国无精子症患者Y染色体微缺失检查. 相似文献
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目的研究鹿藿Rhynchosia volubilis的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Toyopearl HW-40C、Sephadex LH-20柱色谱以及半制备HPLC等方法进行纯化,根据理化性质及波谱数据对化合物进行结构鉴定。结果从鹿藿石油醚提取物中分离得到13个化合物,分别鉴定为(-)-sigmoidin E(1)、lupinifolin(2)、precatorin B(3)、木豆酮(4)、槐花多糖B(5)、5,3′-二羟基-4′-甲氧基-5′-γ,γ-二甲基烯丙基-2″,2″-二甲基吡喃并[5,6:6,7]异黄烷酮(6)、染料木素(7)、甘草异黄酮A(8)、erylatissin B(9)、neo-bavaisoflavone(10)、羽扇豆醇(11)、桦木醛(12)、穿贝海绵甾醇(13)。化合物1~10均为含异戊烯基的黄酮类,其中化合物1、2为二氢黄酮、3~6为二氢异黄酮、7~10为异黄酮。化合物11~12为羽扇豆烷型三萜,化合物13为甾醇类。结论化合物1、5~6、8~10、12、13均为首次从鹿藿属植物中分离得到,化合物1~3、5~13均为首次从该植物中分离得到。 相似文献
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目的:探讨不育男性无精子症或严重少精子症与Y染色体微缺失之间的关系。方法:利用15个Y染色体特异序列标签位点,以多重PCR法检测无精子症或严重少精子症患者的Y染色体微缺失情况。结果:31例无精子症或严重少精子症患者中共检出Y染色体微缺失3例,缺失率为9.7%。结论:Y染色体微缺失是造成男性精子发生障碍的常见病因之一。 相似文献