全文获取类型
收费全文 | 72篇 |
免费 | 0篇 |
国内免费 | 13篇 |
专业分类
基础医学 | 12篇 |
口腔科学 | 1篇 |
临床医学 | 24篇 |
神经病学 | 2篇 |
特种医学 | 24篇 |
外科学 | 1篇 |
综合类 | 5篇 |
预防医学 | 1篇 |
药学 | 8篇 |
中国医学 | 1篇 |
肿瘤学 | 6篇 |
出版年
2019年 | 2篇 |
2010年 | 1篇 |
2009年 | 5篇 |
2008年 | 3篇 |
2007年 | 2篇 |
2006年 | 4篇 |
2005年 | 4篇 |
2004年 | 1篇 |
2003年 | 3篇 |
2002年 | 4篇 |
2001年 | 5篇 |
2000年 | 8篇 |
1999年 | 5篇 |
1997年 | 4篇 |
1996年 | 5篇 |
1995年 | 6篇 |
1994年 | 4篇 |
1992年 | 2篇 |
1991年 | 4篇 |
1990年 | 4篇 |
1989年 | 1篇 |
1988年 | 5篇 |
1987年 | 1篇 |
1982年 | 1篇 |
1981年 | 1篇 |
排序方式: 共有85条查询结果,搜索用时 15 毫秒
51.
52.
新型逆转录病毒载体介导的人多药耐药基因转移小鼠造血干/祖细胞 总被引:1,自引:0,他引:1
为探讨逆转录病毒介导的外源基因转导对骨髓造血重建的影响,我们以人多药耐药基因(mdr-1)为报告基因,采用包含Friend脾灶形成病毒(spleen focus-forming vims)和鼠胚胎干细胞病毒序列的新型逆转录病毒载体SF-MDR,以病毒包装细胞与小鼠造血细胞体外共培养法进行基因转染,并对基因转导后造血细胞的体外耐药能力及体内造血重建能力进行了观测。结果表明,该载体可有效地介导mdr-1基因转导,明显提高小鼠骨髓造血细胞对秋水仙素及紫杉醇的耐受能力,对细胞体内造血重建能力没有影响,体内移植8个月后经紫杉醇体内筛选,7/7的小鼠可于外周血细胞基因组DNA中检出外源mdr-1基因的存在。 相似文献
53.
54.
人骨髓间充质干细胞分离与培养方法的建立 总被引:40,自引:0,他引:40
目的:建立并优化骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分离纯化及培养扩增的方法。方法:利用Percoll(1.073g/ml)及Ficoll-Hypaque(1.077g/ml)两种分离介质分离骨髓单个核细胞,筛选体外培养MSCs适宜的血清及浓度,通过流式细胞术分析鉴定MSCs的纯度。结果:经Percoll分离,应用10%筛选出的血清培养与扩增的MSCs,细胞纯度可达95%左右;相反,应用常规Ficoll-Hypaque分离骨髓单个核细胞或增加血清浓度,MSCs纯度显著下降。结论:建立了一种稳定而实用的体外分离与培养MSCs的方法。 相似文献
55.
骨实质来源间质干细胞对博莱霉素诱导小鼠肺损伤的保护作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 观察小鼠骨实质来源间质干细胞(M9Cs)对博莱霉素诱导的小鼠肺损伤的保护作用.方法 分离培养小鼠骨实质MSCs,通过流式细胞术和诱导分化培养,鉴定其免疫表型和分化潜能.56只雌性C57BL/6小鼠分为8组(每组7只):正常对照组,马利兰(BUS)组,博来霉素(BLM)组,马利兰 博来霉素(BLM BUS)组,博来霉素 MSCs(BLM MSCs)组,马利兰 博来霉素 MSC(BLM BUS MSCs)组;其中,BLM MSCs组和BLM BUS MSCs组根据给予细胞数量不同再分为两个亚组:BLM MSCs 1组(输注5×105个MSCs)和BLM MSCs 2组(输注205X105个MsCs);BLM BUS MSCs 1组(输注5×105个MCSs)和BLM BIJS MSCs 2组(输注2.5×105个MSCs).细胞输注后14d处死小鼠,分析肺组织病理变化和羟脯氨酸含量.结果 小鼠骨实质MSCs为成纤维样细胞,免疫表型为Sca-1、CD44、CD29、CDl05阳性,CEB4、CIM5、CD11b、CD31阴性,在体外能够分化为脂肪细胞和成骨细胞.经静脉输注骨实质MSCs能够减轻博莱霉素诱导的小鼠肺损伤;在BLM MSCs组,输注2.5×105 MSCs较5×105MSCs能更明显地改善肺损伤;BLM BUS MSCs组与BLM MSCs组比较,肺组织病变明显减轻.正常对照组、BUS组、BLM组、BLM BUS组、BLM MSCsl组、BLM MSCs 2组、BLM BUS MSCs 1组、BLM BUs MSCs 2组小鼠肺组织羟脯氨酸含量分别为0.72±0.05、0.79±0.10、1.37±0.09、1.22±0.16、1.24±0.14、1.01±0.15、1.03±0.19、0.88±0.12μg/mg.与正常对照组比较,BLM组和BLM BUS组羟脯氨酸含量明显上升(P<0.01),BLM MSCs组、BLM BUS MSCs组(MSCs输注组)分别与BLM组、BLM BUS组(阳性对照组)相比,羟脯氨酸含量明显下降(P<0.01);而在BLM BUS MSCs组的肺组织羟脯氨酸含量均低于BLM MSCs组(P<0.01).结论 小鼠骨实质MSCs具有间充质干细胞的特征;经静脉输注骨实质MSCs对博莱霉素诱导的小鼠肺损伤具有保护性作用;骨实质MSCs在肺内的作用与输注细胞数量有关;在博莱霉素诱导肺损伤后,马利兰与骨实质M9Cs共同作用有助于减轻肺泡炎和肺纤维化的程度. 相似文献
56.
57.
Protective effect of human CD40-Ig fusion protein in a murine model of acute graft-versus-host disease 总被引:4,自引:1,他引:4
目的在小鼠GVHD模型中研究利用人CD40-Ig阻断CD40/CD40L相互作用的保护性效果.方法将人CD40基因胞外区插入含有人IgG1 Fc段基因的pIG1载体中,构建携带CD40-Fc融合基因的瞬时表达载体转染COS-7细胞,ELISA法检测CD40-Ig融合蛋白的表达.再将CD40-Fc融合基因连接入pcDNA3.1的相应位点构建稳定表达载体转染CHO细胞,利用Protein A亲和层析法纯化融合蛋白.SDS-PAGE、Western blot和配基结合实验鉴定CD40-Ig的性质.将C57BL6/J(H-2b)小鼠的脾细胞经尾静脉注射入亚致死剂量照射的BALB/c(H-2d)小鼠体内建立急性GVHD模型,通过体内注射CD40-Ig融合蛋白评价其对急性GVHD小鼠的保护效果.结果按上述方法分别构建了哺乳动物表达载体pIG/40Ig和p3.1/40Ig.ELISA 和Western blot确定在COS-7和CHO细胞中表达了CD40-Ig融合蛋白.SDS-PAGE结果显示该蛋白具有通过二硫键结合的二聚体结构并以同源二聚体的形式存在.纯化的CD40-Ig可与CD40L结合.体内应用CD40-Ig融合蛋白治疗可延缓小鼠GVHD病情发展并显著延长小鼠的平均存活时间.结论我们的结果证明CD40/CD40L相互作用在GVHD的病理过程中可能起到了十分重要的作用,提示人CD40-Ig融合蛋白在临床预防和治疗GVHD方面的巨大应用潜力. 相似文献
58.
目的研究间充质干细胞的体内免疫调节活性。方法将C57/BL脾脏细胞输注入受亚致死量照射的BALB/c小鼠,建立急性移植物抗宿主病模型,受体小鼠或同时接受密质骨骨髓来源的间充质干细胞,流式细胞技术检测脾细胞表面表达的活性分子。结果模型经输注间充质干细胞后,鼠脾脏CD11b+细胞表达的CD86和CD69减少,提示抗原呈递细胞的成熟度下降。此外,作为一种效应T细胞早期活化和发育的标记,CD3+CD69+细胞/CD3+细胞的比值降低,导致脾内CD3+细胞的绝对和相对数目减少。但是,在同系脾细胞输注模型中,CD11b+细胞表面的CD69和MHCⅡ表达以及CD3+细胞表面的CD69不受影响。结论 MSCs可以分3个阶段抑制急性移植物抗宿主病,有望成为急性移植物抗宿主病的有效治疗手段,但仍需进行深入研究。 相似文献
59.
532名大学生心理健康水平与成就动机考察 总被引:20,自引:0,他引:20
目的:考察大学生的心理健康水平与成就动机及其相互关系。方法:运用心理卫生自评量表(SCL-90)及学业成就动机量表对532名学生进行了测查。结果:发现17.29%的被调查学生有一定程度的心理问题;被调查学生在自我取向成就动机上得分非常显著地高于社会取向上的平均得分;被试的SCL-90总分与社会取向成就动机得分呈非常显著的正相关,学业成就低的学生的SCL-90总分与自我取向成就动机得分呈显著的负相关。结论:自我取向成就动机可能有利于维护心理健康。 相似文献
60.
阻断CD40/CD40L相互作用延长移植物抗宿主病小鼠存活时间 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:克隆表达人CD40-Ig融合蛋白,并在小鼠移植物抗宿主病(GVHD)模型中研究利用其阻断CD40/CD40L相互作用的保护性效果。方法:利用RT-PCR技术自人Daudi细胞系中克隆CD40基因胞外区,并插入含有人IgG1Fc段基因的pIG1载体中,构建携带CD40-Fc融合基因的瞬时表达载体转染COS-7细胞,间接夹心ELISA法检测CD40-Ig融合蛋白的表达,再将CD4-Fc融合基因连接入pcDNA3.1的相应位点构建稳定表达载体转染CHO细胞,筛选分泌CD40-Ig融合蛋白的阳性重组CHO细胞并进行无血清大规模培养,收获培养上清利用ProteinA亲和层析法纯化融合蛋白。SDS-PAGE,Western blot和配基结合实验鉴定CD40-Ig的性质,将C57BL6/J(H-2^b)小鼠的脾细胞经尾静脉注射入亚致死剂量照射的BALB/c(H-2^d)小鼠体内建立急性GVHD模型。通过体内注射CD40-Ig融合蛋白评价其对急性GVHD小鼠的保护效果。结果:按上述方法分别构建了哺乳动物表达载体pIG/40Ig和p3.1/40Ig。ELISA和Western blot确定在COS-7和CHO细胞中表达了CO40-Ig融合蛋白,SDS-PAGE结果显示该蛋白具有通过二硫键结合的二聚体结构并以同源二聚体的形式存在,纯化的CD40-Ig可与CD40L结合,体内应用CD40-Ig融合蛋白治疗可延缓小鼠GVHD病情发展并显著延长小鼠的平均存活时间。结论:CD40/CD40L相互作用在GVHD的病理过程中可能扮演了十分重要的角色,提示人CD40-Ig融合蛋白在临床预防和治疗GVHD方面的巨大应用潜力。 相似文献