淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶与信号转导

淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶(Lck)是近年来发现的一种非受体型蛋白酪氨酸激酶, 存在于T淋巴细胞及其它一些非T淋巴细胞内,参与细胞的信号转导过程,在多种生理及病理过程中 发挥着重要作用。本文就近年的研究进展进行综述。     

川芎嗪和地塞米松对狼疮肾炎患者PBMC IL-12表达及合成Ig的影响

应用细胞培养技术 ,采用半定量RT PCR法和ELISA检测等方法 ,以正常人为对照 ,观察川芎嗪 (33μg/ml)和地塞米松 (10 5mol/L )对培养的狼疮肾炎 (LN )活动期、静止期外周血单个核细胞 (PBMC )表达IL 12和产生免疫球蛋白 (Ig)的影响。结果表明 ,LN活动期、静止期较正常对照组IL 12蛋白、基因水平明显增高 (P <0 0 1) ,川芎嗪仅对活动期狼疮肾炎PBMCIL 12表达明显抑制 ,而地塞米松明显抑制狼疮肾炎PBMCIL 12表达 (P <0 0 1) ,两种药物对正常人对照IL 12表达及合成Ig无明显抑制作用 (P >0 0 5 ) ,川芎嗪和地塞米松均明显抑制狼疮肾炎活动期及静止期Ig合成 (P <0 0 1或 <0 0 5 )。提示 :狼疮肾炎患者有高水平的IL 12 ,川芎嗪、地塞米松通过下调狼疮肾炎IL 12表达及Ig的合成 ,减轻狼疮肾炎的发生和发展。     

狼疮性肾炎外周血单个核细胞B7-1和B7-2 mRNA表达异常及其与疾病活动的关系

目的观察活动期和静止期狼疮肾炎(LN)外周血单个核细胞(PBMC)B7-1(CD80)和B7-2(CD86)mRNA表达及其与疾病活动的关系,以探讨B7-1和B7-2mRNA表达异常在LN自身免疫发生中的作用及临床意义.方法以正常人为对照,分离15例活动期和13例静止期的LN患者PBMC,采用半定量反转录PCR的方法,检测PB-MC的B7-1和B7-2mRNA表达.B7-1和B7-2mRNA表达与SLE疾病活动评分指数(SLEDAI)的相关关系用直线相关分析.结果静止期LN组B7-1和B7-2mRNA表达与正常人对照组相比无显著性差异(P＞0.05),活动期LN组B7-1mRNA有明显的上升(P＜0.05),B7-2mRNA表达增高更加显著(P＜0.01).B7-2mRNA的增高与SLEDAI呈直线正相关关系(r＝0.8641,P＜0.05).结论活动期狼疮性肾炎存在着B7mRNA表达的异常,B7-2mRNA的增高与SLEDAI呈直线正相关关系.     

IL-12、IL-2、PHA协同诱导狼疮肾炎患者PBMC增殖和合成Ig的研究

应用细胞培养技术 ,采用MTT和ELISA等方法 ,观察IL 12、IL 2、PHA体外协同诱导狼疮肾炎 (LN )活动期、静止期外周血单个核淋巴细胞 (PBMC )增殖和产生Ig自身抗体。结果表明 :与正常对照相比 ,IL 12与IL 2、PHA可明显刺激活动期、静止期PBMC增殖和产生大量IgG、IgM ,IgA无明显变化 ,且活动期强于静止期。单独应用IL 12对活动期PBMC作用最明显。提示 :IL 12可通过促进PBMC增殖产生大量自身抗体参与狼疮肾炎的发病。     

IL—12对狼疮肾炎PBMC中信号传递分子STAT3,STAT4的作用

目的：为了探讨ＩＬ－１２对狼疮肾炎ＰＢＭＣ发挥生物学作用的细胞内信息传递机制。方法：采用ＭＴＴ、免疫沉淀、免疫印迹等方法。检测ＩＬ－１２对ＰＢＭＣ增殖及ＳＴＡＴ２、ＳＴＡＴ４的作用,并比较在狼疮肾炎活动期、静止期的差别。结果：发现与正常人对照及静止期相比,ＩＬ－１２对ＰＢＭＣ的中通过ＳＴＡＴ３、ＳＴＡ４途径发挥、存在异常活化,这时可能是ＩＬ－１２促进狼疮肾炎ＰＢＭＣ参与发病的细胞内机制之一。     

川芎嗪对活动期狼疮性肾炎外周血单个核细胞 B7-1和B7-2 mRNA表达的影响

目的：探讨川芎嗪对活动期狼疮肾炎（LN）外周血单个核细胞（PBMC）的B7－1（CD80）和B7－2（CD86）mRNA表达的,影响,为临床使用川芎嗪治疗LN提供理论依据。方法：取活动期LN患PBMC培养,分别以川芎嗪,地塞米松和川芎嗪＋地塞米松进行处理,以PBS对照,采用半定量反转录PCR的方法,检测PBMC的B7－1和B7－2mRNA表达,结果：与对照组相比,川芎嗪组和地塞米松组均能明显抑制B7－2mRNA表达（P＜0．05）,而川芎嗪＋地塞米松组对B7－2mRNA表达的抑制更加明显（P＜0．01）,各组对B7－1mRNA表达均无显影响（P＞0．05）,结论：川芎嗪能下调活动期LN外周血单个核细胞B7－2mRNA表达,合并使用地塞米检能更好地抑制B7－2mRNA表达。     

猪肾小球内皮细胞与系膜细胞的发育过程及相互关系

目的:明确中国实验用小型猪肾小球内皮细胞与系膜细胞的发育过程及相互关系。方法:采集不同时间点(胚胎28～112d及出生后1d、7d、14d、21d)中国实验用小型猪肾组织,应用免疫荧光技术检测胚肾发育不同阶段(帽状间充质、肾小囊体、逗号形体、"S"形体、毛细血管袢期肾小球及成熟肾小球)内皮细胞标志物CD31与系膜细胞标志物α-SMA的表达情况。结果:内皮细胞标志物CD31在胚肾早期呈散在性分布,继而围绕肾小囊体和逗号形体呈"环抱"状分布,然后进入"S"形体下端的血管裂隙内聚集形成无管腔的"前毛细血管束",最后表达于成熟肾小球毛细血管内皮细胞。系膜细胞标志物α-SMA在早期胚肾、肾小囊体和逗号形体阶段均无表达;"S"形体早期分布于"S"形体周围,后期进入"S"形体下端的血管裂隙;毛细血管袢期聚集在肾小球血管极根部;随着肾小球发育逐渐向肾小球内延伸,最终表达于成熟肾小球系膜区。CD31与α-SMA双重染色的结果显示,在毛细血管袢期CD31阳性的内皮细胞聚集形成无管腔的前毛细血管束,而α-SMA阳性的系膜细胞聚集在肾小球血管极的根部;随着肾小球发育,α-SMA阳性的系膜细胞逐渐由血管极根部向肾小球内迁移,同时CD31阳性的内皮细胞逐渐形成带有管腔的毛细血管丛。结论:中国实验用小型猪肾小球内皮细胞的发育开始于后肾间充质阶段,系膜细胞的发育开始于"S"形体阶段,即肾小球系膜细胞发育在内皮细胞之后;在肾小球血管丛形成过程中,内皮细胞与系膜细胞间可能存在重要的相互作用。     

马蹄肾的首诊表现、合并症及影像检查分析

目的：马蹄肾是一种常见的先天性肾脏发育畸形,容易被漏诊或者误诊。本研究的目的是加深对马蹄肾临床和影像表现的认识。方法：回顾分析2008年1月-2013年6月在解放军总医院确诊为马蹄肾患者的一般情况、首诊表现、合并症及影像学检查结果。结果：（1）一般资料：共有53例影像诊断为马蹄肾患者纳入本研究,男：女为1．3：1;平均年龄为（40．2±17．5）岁。（2）首诊时表现：以腰痛、尿检异常等泌尿系统疾病相关临床表现为主诉就诊的28例（52．8％）;体检或因其他疾病意外发现的25例（47．2％）。（3）合并症：马蹄肾合并肾实质病变[表现为血尿或／（和）蛋白尿及肾衰竭]16例（30．2％）,尿路感染10例（18．9％）,泌尿系结石10例（18．9％）,肾积水10例（18．9％）,肾囊肿7例（13．2％）。（4）影像学检查：25例患者进行了超声检查,其中6例（24．0％）被误诊;16例患者接受了静脉肾盂造影检查,其中1例（6．3％）被漏诊。29例进行了肾脏CT检查、10例进行了肾脏MRI检查,无1例漏诊或误诊。13例ECT检查提示双肾影轮廓欠清晰或呈倒“八”字,放射性同位素分布存在不同程度减低、甚至单侧肾脏不显影。结论：马蹄肾首诊时泌尿系统表现约占一半;常见的合并症是肾实质病变、尿路感染、结石、肾积水及肾囊肿;CT或MRI是诊断马蹄肾最准确的手段。     

细胞因子受体介导的信号传递JAK-STAT研究新进展

细胞信号传递途径JAKSTAT是当今研究的热点,其参与细胞因子在细胞生成、分化,胚胎发育及机体免疫等生物学作用的基因调控,配体与大多数缺少激酶结构域的受体结合后,JAK激酶通过和受体聚合以及JAK的酪氨酸磷酸化激活,使受体和STAT蛋白磷酸化,后者直接参与基因调控。本文将对JAKSTAT的信号传递机制加以综述。     

Lck反义RNA重组腺病毒载体的构建及其对肾小管上皮细胞Lck表达的影响

目的:观察淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶(Lck)在肾小管上皮细胞中的表达及Lck反义RNA对其表达的影响.方法:采用RT-PCR方法从肾小管上皮细胞中获得Lck目的基因片段,将目的基因片段反向插入pDC 316质粒中,构建Lck反义RNA穿梭质粒(pDC 316-antisenseLck),经PCR、酶切及测序鉴定正确后,将此穿梭质粒与辅助质粒pBHGloxΔE1,3Cre 共转染HEK 293细胞,重组产生Lck基因反义RNA腺病毒载体(Ad-antisenseLck).用此重组腺病毒感染体外培养的肾小管上皮细胞,Western blotting方法观测此重组腺病毒载体对IL-2诱导的Lck蛋白表达的影响.结果:构建出Lck反义RNA重组腺病毒载体,此重组腺病毒载体感染培养的肾小管上皮细胞后可明显抑制IL-2诱导的Lck蛋白表达(P<0.05),抑制率可达47%.结论:成功构建出Lck反义RNA重组腺病毒载体,此载体可在肾小管上皮细胞内发挥生物学作用,显著阻抑肾小管上皮细胞的Lck蛋白表达.