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Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗免疫原性 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:构建克隆结核分枝杆菌Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗,并在COS7细胞中表达,研究该疫苗的免疫原性。方法:克隆Mtb8.4/hIL12嵌合基因,并导入真核表达载体pCIneo中,构建pCIneoMtb8.4/hIL12重组真核质粒。用限制性内切酶消化、PCR及DNA序列测定等鉴定后,转染COS7细胞,用RTPCR和Westernblot鉴定Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平的表达。用Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗免疫C57BL/6N小鼠,收集脾细胞培养上清检测细胞因子的水平,并用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定细胞毒性T细胞(CTL)的杀伤作用。结果:pCIneoMtb8.4/hIL12重组质粒构建成功。以其转染COS7细胞后,Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平获得表达。Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗能诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,IFNγ和IL2的分泌增加,IL4的分泌减少,特异性CTL的杀伤活性增强。结论:成功地构建pCIneoMtb8.4/hIL12重组质粒,并在COS7细胞中表达。构建的Mtb8.4/hIL12基因疫苗具有较强的免疫原性,可明显诱导CTL的杀伤活性。 相似文献
63.
为研究Mtb8.4基因疫苗的免疫原性及对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果,将雌性C57BL/6N小鼠32只,随机分为4组,即Mtb8.4基因疫苗组、BCG组、pcDNA3.1(+)组和PBS组。小鼠脾细胞培养上清检测细胞因子水平;并按效靶比例分别为100∶1、50∶1、10∶1进行CTL杀伤活性检测。用结核杆菌H37Rv强毒株静脉攻击小鼠,计数肺和脾组织中的结核杆菌菌落数,对小鼠部分肺和脾组织作病理切片,HE染色观察组织病变程度,Z-N染色查抗酸杆菌,观察该疫苗对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果。结果表明,Mtb8.4基因疫苗对小鼠结核杆菌感染有一定的免疫保护效果,能够诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,细胞因子IFN-γ和IL-2分泌增加,IL-4分泌减少,特异性CTL活性增加;使小鼠肺和脾组织中的结核杆菌菌落数较空载体组显著减少,组织病变明显减轻。 相似文献
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65.
66.
建立医院药品不良反应监测系统及工作体会 总被引:3,自引:0,他引:3
20世纪以来,世界上发生过很多起重大药害事件,导致成千上万人的致死致残,如1960年震惊世界的"反应停(Thalidomide)事件"和20世纪末发生的"苯丙醇胺事件". 相似文献
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68.
Bcl-2、Bax蛋白在不同年龄组患者脑挫裂伤组织中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究不同年龄组患者颅脑损伤后脑挫裂伤组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、 Bax的表达差异,探讨年龄因素对颅脑损伤患者预后影响的分子生物学机制.方法:收集临床脑挫裂伤患者手术切除的脑挫裂伤组织,并随机选取15例颞叶癫NFDA9或血管畸形手术患者颞叶皮质脑组织作为对照.应用免疫组化和计算机显微图像分析技术,比较老年组(≥60岁)、成年组(19~59岁)和未成年组(≤18岁)患者脑损伤后3~9 h挫裂伤组织中Bcl-2、Bax蛋白表达水平的差异.结果:脑损伤后Bcl-2、Bax蛋白在脑挫裂伤组织中的表达与对照标本相比明显增强(P<0.05);老年组患者脑挫裂伤组织中Bcl-2/Bax蛋白表达比率显著低于未成年组和成年组(P<0.05);成年组患者脑挫裂伤组织中Bcl-2/Bax蛋白表达比率显著低于未成年组 (P<0.05).结论:年龄因素可影响创伤性颅脑损伤后患者脑组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达,老年颅脑损伤恢复不良可能与Bcl-2/Bax蛋白表达比率降低有关,而未成年颅脑损伤患者预后较好可能与Bcl-2/Bax蛋白表达比率较高有关. 相似文献
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目的 检验声学定量-硝酸异山梨醇酯试验(AQ-ISDN)能否在术前预测择期经皮冠脉腔内成形术(PTCA)后心功能。方法 随机对择期PTCA30例患者在介入前应用声学定量技术(AQ)测定经口吸入硝酸异山梨醇酯(ISDN)2.5mg之前及吸入后5min的左心功能参数的改变。并与介入后AQ左心功能测值相对照。结果 介入肖吸入ISDN后5min峰值射血率(PER)的改变与介入后PER的改变相关、相关系数r 相似文献
70.
目的 通过对中国人非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织中环氧化酶-2(COX-2)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、热休克蛋白27(HSP27)和P53表达的检测,观察这4种蛋白质在NSCLC肿瘤组织中的表达情况,分析其与性别、年龄、病理类型、肿瘤细胞分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移的相关性,为临床判断和有效控制NSCLC提供有价值的参考。方法采用免疫组织化学法检测50例NSCLC患者肿瘤组织中COX-2、VEGF、HSP27和P53的表达,采用原位杂交法检测COX-2 mRNA的表达。结果 COX-2、VEGF、HSP27、P53单一指标阳性均与性别、年龄、组织学分类、肿瘤直径、N分期、肿瘤细胞分化程度无关。COX-2与淋巴结转移有关(偏相关系数为0.3237,P=0.028),而VEGF、HSP27、P53与淋巴结转移无关。COX-2和P53或COX-2和VEGF共同高表达在N2期的NSCLC中明显多于N0和N1期;COX-2、P53和VEGF共同高表达或其中两种蛋白质高表达在N2期的NSCLC中明显多于N0和N1期(P=0.002)。HSP27高表达虽然与淋巴结转移无关,但与COX-2高表达有关(偏相关系数为0.5143)。结论 COX-2、P53和VEGF共同高表达或其中两种蛋白质高表达与NSCLC淋巴结转移密切相关。COX-2与NSCLC淋巴结转移有关。 相似文献