温郁金氮磷钾吸收和分配规律研究

目的研究温郁金对N、P、K的吸收和分配规律。方法定点采样,样品在50℃烘箱中烘干,分别测定叶、根茎、须根和块根中氮、磷、钾的百分含量。结果温郁金在整个生长过程中对氮肥和钾肥的需求量较大,其中钾肥需求量约为氮肥2倍,对磷肥的需求量则较少。结论通过对氮磷钾吸收量和分配规律的分析,对温郁金生长过程中肥料施用的定量化、标准化提供了理论依据。     

成纤细胞生长因子应用于冠心病治疗的研究现状

缺血性心脏病是当代死亡率较高的疾病之一,对人类的健康带来严重的威胁。近年来,人们发现一些生长因子有促进缺血组织的血管新生和加速侧枝循环建立的作用,为改善心肌缺血,治疗冠心病提供了新的思路和方法。本文就FCF(Fibroblast Growth Factor,FGF)的研究现状作相关的综述,国内外的实验研究表明,良好的冠脉侧枝血管可改善缺血心肌的血供,FGF对诱导缺血组织的血管再生改善血液循环具有重要的意义。     

地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡和ERK1/2 MAPK及钙离子浓度关系的研究

目的:研究胸腺细胞凋亡和ERK1/2途径及钙离子内流之间关系,以进一步探讨细胞凋亡可能的信号通路机制.方法:以地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,通过流式细胞术和电镜测定模型的稳定性,利用激光扫描共聚焦分析测定细胞内[Ca2 ]i、SDS-PAGE及Western blot检测细胞内总量和磷酸化ERK1/2MAPK.结果:仅在完全RMPI 1640培养基培养条件下,小鼠胸腺细胞自发凋亡百分率为(2.90±0.62)%,而在2.5×10-6mol/L DEX诱导下,3 h培养组(12.70±2.44)%、6 h培养组(53.55±4.59)%发生了细胞凋亡,细胞内Fluo-3绿色荧光明显增强;正常细胞ERK1/2总量随时间变化不明显,而DEX刺激下,ERK1/2总量随时间呈递减趋势.结论:DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中,磷酸化ERK1/2信号被迅速抑制,细胞内[Ca2 ]i迅速上升,推论磷酸化ERK1/2信号阻断与[Ca2 ]i有密切关系.     

重组人碱性成纤维细胞生长因子突变体[Ser~(69,87)]的表达、纯化及其稳定性研究

目的:对野生型人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)进行突变改造以提高其稳定性。方法:采用PCR突变方法,将hbFGFcDNA第6 9位和87位的Cys密码子突变为Ser密码子,所得的突变片断插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL2 1(DE3) /pET3c [Ser69,87]hbFGF ,IPTG诱导表达。通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法分离纯化突变体蛋白[Ser69,87]hbFGF。MTT法测定重组蛋白的促分裂活性。并对突变体蛋白的抗蛋白酶水解能力、热稳定性及其酸碱稳定性进行了检测。结果:所构建的表达菌株,其[Ser69,87]hbFGF的表达量占菌体总蛋白的30 %以上。经两步层析纯化,获得了纯度达98%的突变体[Ser69,87]hbFGF。纯化的样品促Balb/c 3T3细胞增殖的活性与野生型hbFGF相当。突变体[Ser69,87]hbFGF抗胰蛋白酶水解的能力较野生型hbFGF强;热稳定性和酸碱稳定性也较野生型hbFGF高。结论:突变体[Ser69,87]hbFGF的生物学活性与野生型hbFGF相当,其稳定性明显高于野生型hbFGF。     

一种合成人血小板因子4基因的简便有效方法(英文)

目的:用一种简便有效的方法合成hPF4基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行高效表达。方法:根据hPF4基因的序列,用touch-down PCR的方法合成hPF4基因,将合成的基因片断克隆到表达载体pGEX-4T-1中,构建了重组质粒pGEX-4T-1-hPF4,并将之转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达由谷胱甘肽转移酶和hPF4组成的融合蛋白。结果:用touch-down PCR的方法成功合成了hPF4基因。融合蛋白形成包含体,表达量约为全菌体蛋白的30%。结论:Touch-down PCR方法可作为合成其它目的基因的简便有效方法。BL21(DE3)/pGEX-4T-1表达系统能高效表达合成的hPF4基因,为下一步hPF4的纯化与生物学活性研究打下了基础。     

红花DHDPS基因全长cDNA的克隆及植物表达载体构建

目的克隆红花赖氨酸生物合成途径关键酶二氢吡啶二羧酸合酶(dihydrodipicolinate synthase DHDPS)基因的全长c DNA序列,构建植物超表达载体。方法根据红花转录组文库注释信息获得红花DHDPS(CtDHDPS)基因的中间序列,通过RT-PCR与RACE技术从红花种子中克隆CtDHDPS基因全长c DNA序列。采用DNA重组技术构建p BASTA-CtDHDPS植物超表达载体。结果分离CtDHDPS基因全长1 309 bp,开放阅读框954 bp,编码317个氨基酸,编码蛋白理论等电点为5.93,相对分子质量约为34 750.79。通过DNA重组技术成功构建了植物超表达载体p BASTA-CtDHDPS。结论获得CtDHDPS基因全长c DNA序列并成功构建植物超表达载体,为阐明CtDHDPS基因的生物学功能及其在红花赖氨酸生物合成途径中作用机制提供科学依据。     

酸性成纤维细胞生长因子对颈动脉窦损伤的保护及量效关系的探讨

目的　探讨酸性成纤维细胞因子(acidicfibroblastgrowthfactor,aFGF)对大白鼠颈动脉窦损伤的 保护作用以及量效关系。方法　将大白鼠随机分成对照组,实验组中的aFGF1组、aFGF2组、aFGF3组各8 只。实验组大鼠分别经静脉注射0.14μg/ml,0.43μg/ml,1.30μg/ml的aFGF,对照组注射同剂量的生理盐 水。20min后,用蘸有80%乙醇的棉球轻轻擦试颈动脉窦区,以损伤颈动脉窦压力感受器神经末梢,并放置 10min,观察记录各组损伤前后夹闭颈总动脉时收缩压(SP)、舒张压(DP)、平均动脉压(MP)和心率(HR)的 变化。结果　①损伤颈动脉窦前,夹闭右颈总动脉,实验组和对照组血压均升高,夹闭前后相比差异显著(P <0.01)。②损伤右颈总动脉窦后,夹闭右颈总动脉,对照组血压不变,夹闭前后相比差异不显著(P>0. 05);实验组的aFGF1组、aFGF2组、aFGF3组血压均升高,夹闭前后比差异显著(P<0.05),夹闭前后的血压 差分别与对照组的差值相比均显著(P<0.05),但未呈现明显的量效关系。在本实验中,HR均无明显变 化。结论　aFGF对大白鼠颈动脉窦损伤有保护作用。     

产学研循环互动创新人才培养模式的研究与实践——以温州医学院药学教育为例

产学研结合教育是高等教育改革与发展的方向,是提升学生创新能力和实践能力的重要途径,是推动我国经济建设和可持续发展的战略性举措.我们前期积极吸收国内外先进教学经验,充分发挥温州医学院现有条件,初步建立了一套产学研循环互动的教学模式,即以教学实验区为载体、产学研循环互动的教学体系,尝试将产学研相结合的思想贯彻到药学人才培养的全过程,探讨了产学研合作教育对药学人才创新能力培养的有效性.     

重组人成纤维细胞生长因子21降糖作用研究

目的利用肝细胞、肌肉细胞,前脂肪细胞及ob/ob小鼠进行rhFGF21体内外降糖作用研究。方法培养人正常肝细胞(HL-7702),大鼠肌肉细胞(L-6),小鼠前脂肪细胞(3T3-L1),用GOD-POD试剂盒测定细胞葡萄糖吸收量;FGF-21按照每天0.6μg·g-1的剂量颈部皮下连续注射7d,分别在d 0、d 3、d 7给药后1 h检测空腹血糖,以生理盐水做对比;rhFGF-21按照每天0.6μg·g-1的剂量颈部皮下连续注射9 d,末次给药后1 h开始口服糖耐量实验,灌胃给予2 mg.g-1的葡萄糖溶液,分别于给予葡萄糖溶液后30、60、120 min检测血糖;rhFGF-21按照每天2.5μg·g-1的剂量颈部皮下注射连续7 d,在d 0、d 3、d 7给药后1 h检测餐后血糖。结果在3.9 mg·L-1～100 mg·L-1间rhFGF21促进HL-7702细胞葡萄糖的吸收且呈现浓度-效应关系,与对照组相比差异有显著性(P<0.01);在0.3 mg·L-1～250 mg·L-1间rhFGF21促进L6肌细胞对葡萄糖的吸收,与对照组相比差异有显著性(P<0.05);在12.6 mg·L-1～100 mg·L-1间rhFGF21促进分化的3T3-L1细胞葡萄糖的吸收且呈现浓度-效应关系,与对照组相比差异有显著性(P<0.05);ob/ob小鼠血糖测试证明,rhFGF-21具有降血糖和改善葡萄糖耐受量的作用。结论 rhFGF21体外可促进肝细胞、肌肉细胞及脂肪细胞葡萄糖的吸收;rhFGF-21可降低ob/ob小鼠空腹血糖及餐后血糖,具有改善其葡萄糖耐受量的作用。     

一个新的代谢调节因子——成纤维细胞生长因子21

成纤维细胞生长因子21(FGF21)与其传统的FGFs家族不同,是一个新的代谢调节因子,虽然发现时间不长,但在代谢性疾病中的调控机制研究开展十分迅速。FGF21是2型糖尿病的潜在治疗剂,其具有持续控制脂质和糖代谢,逆转胰岛素的耐受性,改善胰岛β细胞等功能。另外,在特定靶组织/器官,很多与代谢相关的关键因子和途径,与FGF21调控机制相关。进一步研究这些作用机制不仅能更好的理解FGF21的生物学特性,还能为研究新的治疗方案奠定基础。文中叙述了糖尿病、肥胖症、肝癌、慢性肾病等疾病与FGF21的调控关系,以及目前FGF21调控机制的研究进展。