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目的: 探讨沉默c-fos基因对PM2.5染毒人支气管上皮细胞(HBE细胞)癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法: 采用RNA干扰技术,根据GenBank提供的c-fos mRNA序列,设计合成shRNA干扰序列,将重组慢病毒载体转染HBE细胞,构建c-fos基因沉默细胞株。采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot对c-fos基因沉默效果进行鉴定。以HBE细胞、c-fos基因沉默细胞为实验对象,用浓度为50 μg/mL的PM2.5混悬液染毒24 h,同时设立阴性对照组,qPCR和Western blot分别检测部分癌基因c-myc、k-ras、c-fos、p53和凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8在mRNA及蛋白质表达水平的变化。结果: 转染c-fos-shRNA慢病毒的HBE细胞中,经qPCR和Western blot检测发现,与对照组HBE细胞相比,c-fos mRNA表达水平下降70.1%,c-fos蛋白表达水平下降53.7%。PM2.5染毒HBE细胞后,与未染毒的对照组比较,c-myc和k-ras mRNA表达水平分别升高30.46%、27.17%,差异均有统计学意义(P < 0.05),c-fos、Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达水平分别升高50.78%、71.91%、74.16%,p53 mRNA表达水平下降12.27%,差异均有统计学意义(P < 0.01)。PM2.5染毒c-fos基因沉默细胞后,与未染毒组比较,c-myc、k-ras mRNA表达水平分别下降13.08%、5.39%,Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达水平分别下降25.03%、21.37%(P < 0.05),p53 mRNA下降53.39%(P < 0.01)。此外,c-fos基因沉默细胞染毒后,与HBE正常细胞染毒后比较,c-myc、k-ras、p53、c-fos、Caspase-3和Caspase-8的mRNA表达水平均有所下降(P < 0.05);仅c-myc蛋白表达下降(P < 0.01)。结论: 成功构建c-fos基因沉默细胞株;PM2.5可引起HBE细胞癌基因和凋亡相关基因表达水平明显升高,c-fos基因沉默在一定程度上能抑制PM2.5对癌基因和凋亡相关基因的激活作用。 相似文献
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硝酸甘油滴鼻在显微喉手术中的应用空军沈阳医院麻醉科(110042)李柏我们用硝酸甘油滴鼻进行选择性对抗喉手术中血压上升,效果满意,现报告如下。1病例选择与方法平时血压在18.67/12.00kPa以上者,两组各选30例。身体条件基本相同(年龄、体重、... 相似文献
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斛芪浸膏对Wistar大鼠涎腺辐射损伤的保护作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨中药复方斛芪浸膏对Wistar大鼠涎腺辐射损伤的保护作用。方法:100只Wistar大鼠随机分为假照射组,模型组和高、中、低剂量斛芪浸膏组。除假照射组大鼠外,采用60Coγ射线15Gy单次局部照射大鼠头颈部建立涎腺辐射损伤模型。于灌胃3d及40d后,分别收集唾液,比色法检测唾液中K^+、Na^+含量,碘-淀粉酶比色法检测唾液淀粉酶活性,酶联免疫吸附测定法检测唾液中分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulinA,sIgA)含量;取涎腺组织苏木精-伊红染色检测涎腺形态改变。结果:用药3d后,各辐射组大鼠均出现涎腺辐射损伤,与假照射组比较,模型组及低、中剂量斛芪浸膏组唾液sIgA含量及体质量下降,唾液淀粉酶活性升高。涎腺组织病理切片显示,用药3d后各辐射组腺泡胞浆水肿,空泡形成,40d后涎腺实质细胞萎缩,数量减少。用药40d后,高剂量斛芪浸膏组大鼠唾液sIgA含量、淀粉酶活性及体质量接近假照射组;涎腺组织结构与假照射组差别不明显。结论:斛芪浸膏能促进涎腺辐射损伤大鼠腺泡结构和功能的恢复 相似文献