鸦胆子粗提物抑制人成纤维细胞的实验研究

目的：了解中药鸦胆子粗提成分对正常成纤维细胞(NF)与瘢痕成纤维细胞(KF)的影响。方法：用四氮噻唑蓝(MTT)法测定经鸦胆子作用后离体培养的NF与KF细胞的存活与增殖能力变化。结果：两种细胞对鸦胆子反应不同：1.90 μg/mL可以明显抑制KF细胞增殖,250 μg/mL则可以完全抑制增殖;15.6 μg/mL可以明显抑制NF细胞增殖,500 μg/mL才可完全抑制其增殖。NF的IC50值为42.2 μg/mL,KF的IC50值为37.8 μg/mL。结论：鸦胆子可以抑制NF、KF,但程度不同,抑制KF反应>NF反应。为瘢痕的临床治疗提供实验依据。改良MTT法,有简单、快捷、稳定的优点。     

高纯度猪软骨II型胶原的制备与检测

探讨以猪透明软骨为原材料制备高纯度II型胶原的方法,为批量化生产提供依据.以猪透明软骨为原料,采用盐酸胍抽提蛋白多糖,酸性条件下酶解,中间过程经多步纯化去除杂胶原、降解及变性产物,最后经Sepharose H.P.阴离子柱层析纯化制备出产品并以Sigma公司产品作对照.SDS-PAGE电泳、氨基酸成份分析和紫外最大吸收光谱的结果表明,所提取的II型胶原性质符合文献报导,纯度比Sigma公司的产品高.所提取的II型胶原为高纯度的II型胶原,由于采用肉用猪作原料,来源丰富,成本低,适合批量化的产品开发.     

肝素诱导结晶紫比色法检测成纤维细胞生长因子的生物活性

目的：为寻找一种简便，灵敏度高而不需使用放射性同位素的生物活性检测方法对成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）进行检测。方法：利用肝素对Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３细胞株进行诱导，然后运用结晶紫比色法对其进行生物活性检测，结果：最大吸光度Ａ值的一半为０．３１５，所对应的ａＦＧＦ浓度为２４ｐｇ／ｍｌ，而没肝肝素诱导的最大Ａ值一半为０．１６，所对应的浓度为１５６ｐｇ／ｍｌ，结论：肝素的存在提高了结晶紫法的灵敏度，因此是一     

兔抗猪Ⅱ型交原抗血清的制备与检测

目的 采用纯化的猪Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔制备Ⅱ型胶原抗体，并经改良的ＥＬＩＳＡ法检测确定Ⅱ型胶原抗体效价。方法 提取猪Ⅱ型胶原，经导析纯化，将纯化无菌Ⅱ型胶原与不完全佛氏佐剂等量混合，注射于兔脚掌、背部和皮下。并每隔２０天追加抗原刺激，共３次，每隔一定时间收集血浆，以ＥＬＩＳＡ法检测抗Ⅱ型胶原抗体。结果 提纯猪Ⅱ型胶原纯度与Ｓｉｇｍａ标准品一致。Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔，抗体抗量具有二个高峰期，     

交腿移植小腿皮神经营养血管皮瓣治疗糖尿病足溃疡

目的：探讨骨外固定架固定交腿移植的小腿皮神经营养血管皮辩在治疗糖尿病足溃疡（diabetic foot，DF）中的应用。方法：回顾性分析16例应用组合式骨外固定架固定交腿移植的小腿皮神经营养血管皮瓣在糖尿病足溃疡中的应用。结果：皮瓣全部成活，无l例发生褥疮、感染及皮瓣坏死。结论：骨外固定架固定交腿移植皮瓣的方法治疗糖尿病足溃疡简单有效，成功率高，便于观察。     

bFGF胶原海绵的制备及其组织相容性评价

目的 以重组人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、I型胶原蛋白为主要原料，研制一种新型的创伤敷料，并对其组织相容性进行检测，评价其作为医用生物材料的安全性。方法 制备高纯度的I型胶原蛋白溶液，加入bFGF后冷冻干燥成为海绵体，进行组织相容性试验，包括急性毒性试验、刺激性试验、过敏性试验和溶血性试验。结果 制备的bFGF胶原海绵的急性毒性试验、刺激性试验、过敏性试验和溶血性试验结果均呈阴性。结论 所研制的bFGF胶原海绵具有良好的生物相容性，无毒副作用，是可以安全使用的医用生物材料。     

Ⅱ型胶原移植修复关节软骨缺损过程中抗体水平的动态变化

目的建立检测Ⅱ型胶原抗体水平的间接法ELISA,研究猪Ⅱ型胶原移植修复兔关节软骨缺损过程中Ⅱ型胶原抗体水平的动态变化。方法取28只新西兰大白兔,随机分成2组。所有动物均在股骨外髁钻直径5mm、深3mm的软骨缺损区,深达软骨下骨,其中实验组在缺损区植入Ⅱ型胶原;另一组不植入Ⅱ型胶原作为对照。术前及术后每隔2周收集血清直至第12周,采用间接法ELISA检测血清中Ⅱ型胶原抗体。结果实验组Ⅱ型胶原抗体水平术后与术前比较均差异无显著性(P>0.05);而对照组术后第8周抗体水平显著高于术前(P<0.05);实验组与对照组同期比较,两者差异均无显著性。结论关节软骨缺损可引起机体自身免疫反应,产生一定水平的Ⅱ型胶原抗体。Ⅱ型胶原移植不但可以促进关节软骨缺损的修复,还可以降低机体的自身免疫反应,减少抗体的产生。     

Ⅱ型胶原海绵填充材料修复兔关节软骨缺损

背景：修复关节软骨缺损一直是骨科医师致力解决的难题，以前采用自体软骨膜、骨膜或异体骨软骨片移植，但存在供体来源有限、固定困难，以及出现软骨内骨化、软骨下骨与修复性软骨的分层现象等。Ⅱ型胶原是软骨基质的主要成分，对关节软骨缺损的修复应有一定的作用。目的：探讨Ⅱ型胶原海绵对修复关节软骨缺损的效果。设计：随机对照的实验研究。地点和材料：实验地点为广州市创伤外科研究所。材料：普通级成年雄性纯种新西兰兔24只48膝，体质量(2.29&;#177;0．25)kg，标准饲料分笼喂养。干预：在股骨滑车面钻孔为直径5mm、深3mm的全层关节软骨缺损，按随机数分为填充组(左膝关节缺损部位植入Ⅱ型胶原海绵)和对照组(右膝关节缺损部位作为空白对照)。主要观察指标：术后12周内，每双数周对缺损修复情况行大体形态和组织学观察。结果：10～12周，对照组：缺损区由白色、质软、按压无阻抗的组织修复，修复组织仍低于周围关节面，边界仍清晰可辨，组织学以类似炎症反应的机制修复缺损，最终以透明变性的纤维组织的增生来填补缺损部位；填充组：缺损区由半透明状、质韧光滑有光泽，按压有阻抗并有弹性的组织修复，修复组织与周围软骨外形上已基本相似，不易区分，组织学未见有炎症反应的过程，内骨组织和软骨组织增生活跃，并可见大量类骨组织和骨小梁形成，新生软骨和周围软骨组织融合，并与周围组织连接。Ⅱ型胶原对关节软骨缺损的修复有明显的促进作用，修复结果接近正常软骨。结论：自行研制的高纯度Ⅱ型胶原海绵，对关节软骨缺损具有良好的促进修复作用，且组织相容性好，无明显的毒副作用。     

经椎弓根定量植骨和骨髓治疗胸腰椎爆裂性骨折

目的：评价椎弓根钉系统内固定并经椎弓根植入定量自体松质骨和骨髓治疗胸腰椎爆裂性骨折的临床效果。方法：对35例胸腰椎爆裂性骨折患者实施后路撑开复位内固定或加经椎弓根移植自体骨和骨髓进行治疗。对比观察不同时期伤椎的前后缘高度比、楔变角、后凸角的变化。结果：35例病人术后早期椎体高度和形态得到明显恢复,Cobb’s角、伤椎前后缘相对高度也得到改善,但远期效果二组有明显差别,定量植骨组矫正角度丢失及高度丧失比未植骨组少。结论：后路椎弓根钉系统固定并经椎弓根定量移植自体骨和骨髓能增加远期椎体骨容量和脊柱前柱的抗压稳定性。     

Ⅱ型胶原海绵修复兔膝关节软骨缺损的组织学观察

目的：观察Ⅱ型胶原海绵修复兔膝关节软骨缺损的组织学变化。方法：将28只成年雄性新西兰兔制作膝关节缺损模型并随机分成2组，A组在缺损局部植入Ⅱ型胶原海绵，B组不植入以作对照。于术后2、4、6、8、10、12周分别作HE、Safranin O染色及S-100蛋白检测。结果：（1）HE染色显示AXEG 2周后即出现新生软骨细胞，12周后新生软骨组织完全填满缺损区并与周围组织整合，而B组直至术后第12周仍由纤维组织所填充；（2）S-100蛋白免疫组化检测结果显示A组新生软骨细胞具有正常兔软骨细胞的表型；（3）Safranin O染色结果显示A组新生软骨细胞具有分泌软骨基质的功能。结论：Ⅱ型胶原具有较强的诱导软骨细胞生长的能力，其诱导生长的新生软骨具有正常透明软骨的表型和功能。