哈萨克族食管癌中cdc42启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体

目的构建cdc42基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究cdc42基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出cdc42基因,以阳性组织基因组DNA扩增出cdc42基因启动子区CpG岛,cdc42基因经双酶切后与真核表达载体pEGFP-N1相连,并转入甲基化酶缺陷的大肠杆菌E.coliER1793中扩增。经测序成功后,将重组质粒及cdc42基因启动子区CpG岛用HindⅢ酶切,连接后再次转入E.coliER1793中扩增。将重组质粒转染至食管癌细胞株Eca-109中,荧光显微镜观察结果。结果 DNA测序证明获得了包含ORF全长的cdc42基因及其启动子区CpG岛,并将双序列成功克隆入真核表达载体pEGFP-N1中。转染后荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白。结论成功构建真核表达载体,为进一步探讨cdc42基因启动子区CpG岛甲基化状态对该基因在哈萨克族食管癌细胞株中的表达及功能的影响奠定了基础。     

新疆维族非综合征型遗传性耳聋肾虚血瘀型与线粒体DNA 12SrRNA A1555G突变分析

目的：研究新疆地区维族非综合征型遗传性耳聋线粒体DNA12SrRNAA1555G突变频率,探讨与肾虚血瘀型的关系。方法：收集新疆地区51例非综合征型遗传性耳聋患者,其中肾虚血瘀型占67％（34／51）,另选53例维族听力正常者作为对照。抽取外周静脉血,从白细胞中提取DNA,多聚酶链反应（PCR）扩增线粒体DNA目的片断,Alw26I限制性内切酶检测A1555G点突变,而后对阳性患者的PCR产物进行DNA测序验证。结果：在所有样本中,2例存在mtDNAA1555G点突变,均为维族肾虚血瘀非综合征型遗传性耳聋患者。结论：携带有该突变的个体对氨基糖甙类抗生素的耳毒作用有高度易感性。遗传性耳聋肾虚血瘀型患者较mtDNAA1555G突变非肾虚血瘀型高。但突变检出率比较,差异无显著性意义（P〉0．05）。     

椎体楔形截骨在脊柱矫形外科中的应用

我院自 1995年以来 ,对脊柱畸形的患者既行软组织松解 ,又行椎体楔形截骨及附加内固定进行脊柱矫形手术 36例 ,获得了满意的矫正效果 ,报告如下。1　资料与方法1.1　临床资料　本组脊柱畸形 36例 ,其中特发性脊柱侧凸10例 ,先天性侧方半椎体侧凸畸形 3例 ,两者皆为椎体冠状面横     

抗肿瘤药研究新进展

药物在恶性肿瘤治疗中发挥着重要的作用,肿瘤化疗与外科手术、放射治疗是肿瘤综合治疗中的三大重要组成部分。近年来,功能基因组学、功能蛋白质组学、分子病理学、分子药理学以及分子治疗学等领域研究的进展大大加深了对恶性肿瘤的生物学本质与特征的认识,并促进了恶性肿瘤治疗药物的发现、研制与应用。虽然肿瘤化疗取得了一定的的进展,肿瘤患者的生存时间明显延长,但在致命性最强的实体瘤方面仍没有取得令人满意的疗效。本文着重从抗肿瘤新药的发展趋势及热点领域作一综述。     

survivin基因A9194G位点在新疆维、哈、汉3个民族正常人群的分布研究

目的探讨survivin基因A9194G位点在新疆维吾尔族、哈萨克族及汉族正常人群的分布情况。方法采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态技术（PCR—RFLP）检测survivin基因A9194G位点在304例正常人群（哈萨克族100例、维吾尔族102例、汉族102例）的分布情况。结果3个民族正常人群A、G基因频率分布差异无统计学意义。3个民族正常人群基因型AA、AG、GG分布差异有统计学意义，其中哈萨克族与维吾尔族正常人群AG基因型分布低于汉族，差异有统计学意义，但维吾尔族与哈萨克族正常人群基因型分布无统计学差异。结论维、哈族与汉族survivin基因A9194G位点分布存在差异，为今后开展其基因多态性与民族特高发疾病的相关研究奠定了基础。     

Rb/E2F1调控途径在新疆哈萨克族食管鳞癌发生中的作用

目的:探讨Rb基因与转录因子E2F1在新疆哈萨克族食管鳞癌中的表达及临床意义.方法:应用RT-PCR法对48例新疆哈萨克族食管鳞癌组织及其配对的癌旁正常组织进行Rb和E2F1表达检测,分析Rb/E2F1通路与新疆哈萨克族食管鳞癌发生发展之间的关系.结果:新疆哈萨克族食管鳞癌组织中Rb的阳性表达高于癌旁正常组织(64.6%,43.8%)差异有统计学意义(P<0.05);转录因子E2F1的阳性表达率与癌旁正常组织阳性表达率(70.8%,75%)差异无统计学意义(P>0.05).Rb、E2F1的表达与组织学分级及临床分期无关(P>0.05).Rb阳性表达强度与E2F1的阳性表达强度之间呈正相关(r=0.867,P<0.05).结论:Rb的高表达伴随新疆哈萨克族食管鳞癌的发生,E2F1可能作用于食管癌发生的早期阶段,二者在新疆哈萨克族食管鳞癌的发生发展中起拮抗作用.     

白细胞介素1受体拮抗剂基因多态性与2型糖尿病相关性的研究

目的探讨白细胞介素1受体拮抗剂（IL-1Ra）基因多态性分布与2型糖尿病的相关性。方法应用聚合酶链反应-产物长度多态性,检测74例2型糖尿病患者和99名对照者的IL-1Ra第2内含子的86个碱基（bp）数目可变重复片段（VNTR）多态性。结果IL-1Ra基因的5种不同组合等位基因,本研究发现A1A1、A1A2、A2A2、A1A3、A1A4、A2A36种基因型。IL-1Ra A1和A2基因型频率和等位基因频率在T2DM组和对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论IL-1Ra内含子2基因多态性可能与2型糖尿病易感性无关。     

人转化生长因子β1重组腺病毒转染传代髓核细胞对细胞外基质合成的影响

目的探讨人转化生长因子融（transforming growthfactorβ，TGF-β1）对传代羊髓核细胞的细胞外基质（extracellular matrix，ECM）和DNA合成调节因子的作用。方法取1岁龄成年山羊腰椎间盘，体外分离培养羊髓核细胞，传至第3代后以携人TGF-β1（humanTGF-β1，hTGF-β1）或lacZ基因的复制缺陷型腺病毒（Ad／hTGF—β1及Ad／lacZ）感染，分别为实验组和阴性对照组；未加病毒液的细胞为空白对照组；原代髓核细胞为原代组。然后继续单层或藻酸钙凝胶三维（3-D）培养10d。对两种系统培养的细胞分别行DNA荧光定量、Westernblot分析和蛋白多糖（glycosaminoglycan，GAG）定量检测。结果DNA荧光定量显示，单层培养时实验组细胞的DNA合成显著高于两对照组（P〈0．05），藻酸钙凝胶3-D培养各组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。Western blot检测hTGF—β1、Ⅱ型胶原、Ⅰ型胶原和Aggrecan的表达显示，两种培养系统中，实验组hTGF—β1、Ⅱ型胶原和Aggrecan的表达均显著高于两对照组（P〈0．05），Ⅰ型胶原的表达显著低于两对照组（P〈0．05），实验组Ⅱ型胶原／Ⅰ型胶原比值较两对照组显著增高（P〈0．05）。GAG定量结果显示，两种培养系统中实验组细胞的GAG合成均显著高于两对照组（P〈0．05）。结论hTGF-β1在很大程度上可起到维持髓核细胞表型，并在细胞传代后仍发挥表型的调节作用。通过基因工程方法使髓核细胞表达hTGF—β1，有望遏制、甚至逆转椎间盘退变；而以Ad／hTGF—β1感染过的髓核细胞，在藻酸钙凝胶3-D培养系统中培养则表现出原始表型。     

Cdc42，Rb基因在哈萨克族食管癌中的表达及其意义的研究

目的 研究Cdc42和Rb基因在哈萨克族食管癌组织中的表达.方法 采用逆转录多聚酶链反应技术检测Cdc42和Rb基因在20例食管癌组织及其相应癌旁组织中的表达.结果 Cdc42基因在20例癌组织中有15例表达阳性,占75%,20例癌旁组织中有11例表达,占55%,其中癌组织表达量明显高于癌旁组织的有7例,占35%.Rb基因在20例癌组织中有13例表达阳性,占65%,20例癌旁组织中有9例表达,占45%,其中癌组织表达量明显高于癌旁组织的有10例,占50%,癌旁组织表达量高于癌组织的有6例,占30%.结论 Cdc42基因表达的改变,提示它们所参与的细胞凋亡及细胞周期过程的变化在哈萨克族食管癌的发生、发展过程中起了一定的作用.抑癌基因Rb在哈萨克族食管癌的发生发展中与其在其他民族中的作用可能有所不同.