松弛素保护心肌微血管内皮细胞缺氧复氧损伤的机制

背景：研究报道松弛素可显著改善病理因素导致的心肾功能障碍,抑制心肌肥厚、抗纤维化以及改善缺血再灌注损伤等,但其对内皮细胞缺氧复氧损伤的保护机制尚不明确。目的：探讨松弛素保护心肌微血管内皮细胞缺氧复氧损伤的机制。方法：取生长状态良好的小鼠心肌微血管内皮细胞系(H5V),分3组处理：对照组常规培养33 h,模型组常规培养24 h后给予6 h缺氧+3 h复氧模拟心肌缺氧再灌注损伤,松弛素组常规培养(加180 ng/mL松弛素)24 h后给予6 h缺氧+3 h复氧(加180 ng/mL松弛素)模拟心肌缺氧再灌注损伤。检测细胞通透性与Caspase-3的表达,细胞上清中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6水平,RT-PCR检测细胞中钙黏蛋白、Akt1、GSK-3β mRNA表达;Western blot检测细胞中钙黏蛋白、Akt、GSK-3β蛋白表达。结果与结论：(1)与对照组比较,模型组细胞通透性增强(P <0.05),细胞内Caspase-3表达升高(P <0.05);与模型组比较,松弛素组细胞通透性降低(P <0.05),细胞内Caspase-3表达降低(P &l...     

婴幼儿双主动脉弓合并Kommerell憩室的外科治疗

目的:探讨婴幼儿双主动脉弓合并Kommerell憩室的诊断、手术方法、围手术期治疗及手术结果。方法:首都医科大学附属北京儿童医院2014年12月至2019年12月手术治疗双主动脉弓合并Kommerell憩室22例,男14例,女8例,年龄(13.7±11.6)个月(1～36个月),体质量(9.8±3.4)kg(5～20 ...     

《临床流行病学》教学中研究生科研能力提升自评调查

目的 了解《临床流行病学》教学对研究生临床科研能力提升的情况,并探讨可能的影响因素。方法 采用横断面研究设计,以某医学院2020级全体研究生为对象,在《临床流行病学》第1次授课前和最后1次授课后进行问卷调查。内容包括人口学特征、授课前对本门课程的认知和科研能力需求,以及授课后临床科研能力提升等。采用多因素Logistic回归分析评价临床科研能力提升的影响因素。结果 医学生希望提高的科研能力依次为科研设计(95.2%)、统计分析(95.4%)、结果解释(86.0%)、论文写作(86.2%)。该课讲授完后调查发现,医学生对于临床科研能力提升的多个指标,均显示帮助非常大。其中,硕士研究生在开拓科研视野这一指标评价帮助非常大的比例为62.3%;博士研究生多个指标评价帮助非常大,分别为开拓科研视野(69.1%)、改善思维方式(65.4%)、提高科研设计能力(66.3%)、结果解释能力(61.7%)。多因素Logistic回归分析结果显示,既往无工作经验(OR=1.713,95%CI:1.209～2.428),课前自学(OR=2.048,95%CI:1.151～3.645),课前有意愿提高(OR=...     

SOCS1调控JAK/STAT通路传导抑制肝癌细胞增殖、侵袭、迁移的机制研究

目的 探讨SOCS1在肝癌进展过程中的功能及其分子机制.方法 采用qRT-PCR和Western bolt检测人正常肝细胞和肝癌细胞系中SOCS1的表达.构建SOCS1过表达及干扰表达载体,转染肝癌细胞,MTT检测肝癌细胞增殖,细胞划痕实验检测细胞迁移情况,transwell实验检测细胞侵袭性变化.qRT-PCR检测J...     

直接前入路全髋关节置换术治疗髋关节骨关节炎的效果评价

目的评价直接前入路全髋关节置换术治疗髋关节骨关节炎的临床疗效。方法选择2017年12月至2020年12月于五四一总医院骨科接受全髋关节置换术治疗的82例髋关节骨关节炎患者作为观察对象, 其中41例行直接前入路全髋关节置换术治疗的患者作为观察组, 41例行外侧入路全髋关节置换术治疗的患者作为对照组。比较两组患者围手术期一般指标(离床活动时间、住院时间、术中出血量、手术耗时), 以及临床疗效评价指标[视觉模拟评分(VAS)、Harris髋关节功能评分、西安大略和麦克马斯特大学关节炎指数(WOMAC)评分]。结果观察组和对照组患者离床活动时间分别为术后(15.54 ± 2.67)、(19.32 ± 3.18)h, 住院时间分别为(6.87 ± 0.87)、(8.03 ± 1.04)d, 组间比较差异均有统计学意义(t = 5.83、5.48, 均P < 0.001);两组患者术中出血量、手术耗时比较差异均无统计学意义(t = 0.81、0.13, 均P > 0.05)。观察组和对照组患者术后各时间点VAS(术后3 d、1个月、6个月), Harris髋关节功能(术后1、6个月)及...     

脾虚小鼠脏器组织学变化及强肌健力口服液的修复作用

【目的】观察脾虚证模型小鼠肝、脾、肾、胸腺等脏器组织形态学的变化及强肌健力口服液对其修复作用。【方法】将健康雄性NIH小鼠40只随机分为正常对照组、脾虚模型组、强肌健力口服液组和四君子汤组;除正常组外,其他3组均采用腹腔注射利血平法复制脾虚模型,强肌健力口服液组与四君子汤组均按26 g.kg-1.d-1剂量灌胃给药,其他2组灌服等容积蒸馏水,连续21 d;最后1次给药后12 h,各组动物称体质量,取肝、肾、脾、胸腺进行组织病理学观察。【结果】模型组小鼠体质量下降,肝、肾、脾、胸腺均有不同程度的组织损伤;强肌健力口服液与四君子汤均能使模型小鼠体质量增加,使已遭损伤的各脏器组织得以修复。【结论】脾虚模型小鼠的肝、脾、肾、胸腺均呈现不同程度的损伤,而健脾方药对其具有修复作用,验证了《内经》有关“脾主身之肌肉,”“脾为孤脏,中央土以灌四傍”的理论。     

泮托拉唑与奥美拉唑治疗急性非静脉曲张性上消化道出血的疗效比较

目的 观察泮托拉唑与奥美拉唑治疗急性非静脉曲张性上消化道出血的疗效.方法 选择非静脉曲张性上消化道出血患者106例,随机分为两组,泮托拉唑组静脉滴注泮托拉唑40 mg,1次/12 h,持续5d;奥美拉唑组,静脉注射奥美拉唑40 mg,1次/12 h,持续5 d.观察止血效果、监测胃内24h pH值变化.结果 泮托拉唑与奥美拉唑总有效率比较差异无显著性(P＞0.05),但是泮托拉唑显效率和止血时间明显高于奥美拉唑(P＜0.05);胃内24h pH值＞4的持续时间比较,泮托拉唑组明显优于奥美拉唑组(P＜0.01),两组差异有统计学意义.结论 泮托拉唑是治疗急性非静脉曲张性上消化道出血有效、安全的药物.     

CYP2C19基因多态性与氯吡格雷治疗缺血性脑卒中复发风险的相关性研究

目的探讨CYP2C19基因多态性与氯吡格雷治疗缺血性脑卒中复发风险的相关性。方法规律服用氯吡格雷常规治疗剂量≥1a的缺血性脑卒中患者147例,根据有无卒中复发分为无卒中复发组119例和卒中复发组28例,2组应用PCR限制性片段长度多态性方法检测CYP2C19*2、*3基因型,采用多因素logistic回归分析其对缺血性脑卒中复发的影响。结果卒中复发组患者合并糖尿病(39.3%)、既往卒中史比率(28.6%)高于无卒中复发组(19.3%、11.8%)(P0.05);卒中复发组CYP2C19*1/*1基因型和*1等位基因频率(28.6%、53.6%)低于无卒中复发组(46.2%、67.2%)(P0.05),CYP2C19*2/*2基因型和*2等位基因频率(14.3%、39.3%)高于无卒中复发组(6.7%、26.9%)(P0.05);卒中复发组CYP2C19*3等位基因频率(7.1%)与无卒中复发组(5.9%)比较差异无统计学意义(P0.05);多因素logistic回归分析显示,糖尿病(OR=4.215,95%CI:1.284~12.214,P=0.008)、既往卒中史(OR=3.236,95%CI:1.324~10.329,P=0.015)和CYP2C19*2等位基因(OR=2.792,95%CI:1.245~6.436,P=0.014)是卒中复发的独立危险因素。结论携带CYP2C19*2等位基因的缺血性脑卒中患者氯吡格雷治疗效果差,卒中复发的风险增高。     

缺氧条件下胶质瘤U251细胞培养上清液对血管内皮细胞形成管样结构的影响

目的探讨缺氧条件下胶质瘤细胞培养上清液对血管生成的影响及其与尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）的关系。方法在常氧、缺氧条件下对人胶质瘤U251细胞进行培养,随后取其上清液作为内皮细胞ECV304的条件培养液,并分别加入uPA及其受体（uPAR）、组织型纤溶酶原激活物（tPA）的单克隆抗体、αvβ3和αvβ5整联蛋白特异性阻滞剂,观察内皮细胞管样结构形成变化;免疫细胞化学法检测ECV304中uPA、uPAR、NF—KB的表达。结果缺氧组ECV304形成管样结构数量较常氧组增加（P〈0．05）,且随上清液浓度增加差异更明显;uPA、uPAR单克隆抗体可抑制此促进作用,而tPA抗体、αvβ3和αvβ5则无此作用;缺氧培养U251的上清液能刺激ECV304中uPA、uPAR、NF—kB表达。结论在缺氧条件下培养胶质瘤细胞培养液的上清液对血管内皮细胞管样结构形成有促进作用,且与uPA、uPAR的表达有关,与tPA、αvβ3和αvβ5整联蛋白的关系不密切。     

SLC22A18基因启动子甲基化与胶质瘤SLC22A18表达的关系

目的 探讨胶质瘤中SLC2218基因肩动子甲基化与其表达的关系.方法 选取上海交通大学医学院附属第三人民医院神经外科自2006年9月至2009年6月、武汉大学中南医院神经外科自2002年9月至2005年6月间手术切除的胶质瘤标本30例,另选10例行内减压术颅脑损伤患者的正常脑组织作为对照.采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测标本中SLC22A18基因启动子甲基化的状态,RT-PCR和Westem blotting分别检测SLC22A18 mRNA和蛋白的表达.体外培养胶质瘤U251细胞于含2 μmol/L去甲基化药物5-aza-2-deoxycytidine的培养液(实验组1中,同时设普通培养液作对照,培养3、5、7 d后进行细胞计数并应用Western blotting检测SLC22A18蛋白的表达.结果 MSP检测结果显示15例胶质瘤组织出现甲基化,对照脑组织均表现出非甲基化;15例甲基化胶质瘤组织中SLC22A18 mRNA、蛋白的表达明显低于对照脑组织.培养5、7 d实验组U251细胞计数少于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).培养7 d Western blotting检测结果发现实验组细胞SLC22A18蛋白的表达明显高于对照组.结论 SLC22A18基因启动子甲基化导致其表达下调;去甲基化药物能恢复U251细胞SLC22A18的表达,并抑制U251细胞增殖.

Abstract：

Objective To investigate the relationship between aberrant methylation of SLC22A18 gene promoter and SLC22A18 expression in human glioma. Methods Thirty patients with glioma and 10 patients with craniocerebral injury performed decompression were chosen in our study;their tissue samples were prepared. Methylation-specific PCR (MSP) was used to detect the methylation status of SLC22A18 gene promoter;and Western blotting and RT-PCR were employed to measure the protein and mRAN expressions of SLC22A18 in these tissue samples. U251 cells were cultured in vitro with demethylating agent 5-aza-2-deoxycytidine (experimental group, 2μmol/L) and common medium (control group), resepectively;the re-expression of SLC22A18 in U251 cells was measured by Western blotting and cell growth suppression induced by 5-aza-2-deoxycytidine was also observed 3, 5 and 7 d after the culture. Results The methlylation of SLC22A18 gene promoter existed in glioma tissues of 15 patients (50%) but that did not exist in the tissues of patients with craniocerebral injury. The protein and mRAN expressions of SLC22A18 in the tissue samples of these 15 patients were significantly decreased as compared with those in patients with craniocerebral injury (P<0.05);cell counting of U251 cells in the experimental group on the 5th and 7th d of culture was significantly decreased as compared with that of those in the control group (P<0.05). On the 7ht d of culture, Western blotting indicated that the protein b expression level of SLC22A18 in the experimental group was obviously higher than that in the control group. Conclusion The aberrant methylation of SLC22A18 gene promoter plays a key role in down-regulating SLC22A18 expression, and demethylation agents can restore the SLC22A18 expression and suppress the growth of U251 cells.