RP-HPLC法测定五苓散中麦角甾醇和桂皮醛的含量

目的建立五苓散中麦角甾醇和桂皮醛的含量测定方法。方法五苓散样品经甲醇超声提取后,用HPLC法测定。色谱柱为HypersllC18（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-水梯度洗脱,流速为1mL.min-1,检测波长为283nm,柱温为30℃。结果麦角甾醇在0.0437~1.3098mg.mL-1浓度范围内线性关系良好（r=0.9991）,平均回收率为102.9%,RSD为1.5%（n=6）;桂皮醛在0。0062~0.1872mg.mL-1浓度范围内线性关系良好（r=1.0000）,平均回收率为97.8%,RSD为1.9%（n=6）。结论该方法简便、准确、可靠,可用于五苓散中麦角甾醇和桂皮醛的同时含量测定。     

人循环纤维细胞的分离和鉴定

目的 建立分离、培养人循环纤维细胞的方法,并探讨其细胞生物学特征.方法 取成人外周血白细胞,经淋巴细胞分离液分离,接种于含20%胎牛血清的DMEM培养液中进行培养.对贴壁生长的成纤维样细胞进行免疫组织化学鉴定,流式细胞仪分析和电镜观察,并通过测定培养液中羟脯氨酸含量,研究其胶原合成能力.结果 细胞培养9d后CD34、CD45、Ⅰ型胶原分子阳性,其中Ⅰ型胶原分子阳性细胞含量为83.5%;电镜下观察具有典型的成纤维细胞特征;培养液中羟脯氨酸含量为11.17mg/L,明显高于空白对照组8.07mg/L (P＜0.01),表明培养细胞具有胶原合成能力.结论 成人外周血中存在成纤维细胞的前体细胞,经体外分离、培养可分化为循环纤维细胞.     

床边插管腹膜透析治疗重症急性胰腺炎的护理

我们于2001-10~2007-03应用床边插管腹膜透析(PD)治疗重症急性胰腺炎(SAP)取得较好疗效,现将结果报道如下。1临床资料1.1一般资料本组男11例,女5例,年龄33~71岁,平均(42.2±10.6)岁。本组入院后检查血、尿及腹水淀粉酶均明显高于正常;腹部CT或B超检查均示胰腺肿大,胰周可见渗出,胰腺可见散在大小不等的低密度灶。所有病例均符合SAP诊断标准[1],即APACHEⅡ积分≥8分。1.2治疗方法SAP常规治疗方法包括禁食、胃肠减压、解痉、预防和控制感染、生长抑素抑制胰腺分泌、止痛、改善微循环及营养支持等治疗;床边插管PD治疗:在床边局麻下经…     

血吸虫病性肝硬化兔的部分实验指标测定

血吸虫病性肝硬化实验动物模型,常用于各类医学和药学实验中。本研究在前人工作的基础上,检测了家兔血吸虫病性肝硬化的门脉血流动力学、微量元素、与肝硬化发病有关的液递物质及肝脏储备功能等数值。材料和方法 1.材料 (1)动物及饲养条件:健康美系新西兰兔共28只,从上海车墩实验动物良种场引入,本院实验动物室生产供应。雌雄各半,体重1.7～2.0kg。实验时间:1990年5月7日至8月17日。室内温度18～25℃(8月份气温可达30℃);相对湿度70％±5％,自然通风。     

丙肝合剂联合安珐特治疗慢性丙型肝炎临床观察

目的:观察丙肝合剂联合安珐特治疗慢性丙型肝炎肝纤维化的临床疗效。方法:选择慢性丙型肝炎气虚毒瘀型38例,随机分为丙肝合剂联合安珐特治疗组20例和安珐特对照组18例,疗程均为3个月,观察两组患者治疗前后症状、体征、肝功能以及肝纤维化指标。结果:治疗组总有效率为90.00%,临床疗效与对照组差异有统计学意义(P<0.05);肝功能治疗前后比较,治疗组可降低血清ALT、AST、TBIL。治疗后两组ALT、TBIL比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组HA、PCⅢ显著下降,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对于慢性丙型肝炎气虚毒瘀型患者,丙肝合剂联合安珐特较单用安珐特治疗,保肝、降酶、抗纤维化的作用更为显著。     

AdTGF-β1223/225气管内注射制备大鼠肺间质纤维化动物模型

目的观察TGF-β1基因过表达诱发大鼠肺间质纤维化动物模型的组织病理学变化.方法成年健康SD大鼠30只,随机分为空白对照组10只,模型组10只和空载体对照组10只,其中对模型组大鼠气管内一次性注射携带TGF-β1基因腺病毒载体(AdTGF-β1 223/225,1×109 pfu,0.4 mL),空白对照组大鼠气管内注射等量的生理盐水,空载体对照组大鼠气管内注射等量的腺病毒空载体.结果一次性肺气管内注射 AdTGF-β1 223/225可造成肺急性炎症和肺间质纤维化,而对照(腺病毒空载体)并不引起相应的变化.结论肺组织局部分泌的细胞因子TGF-β1可以单独诱发肺间质纤维化.     

姜黄素对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞增殖的影响

目的通过观察姜黄素(Curcumin,Cur)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)增殖的影响,探讨姜黄素在防治肾间质纤维化方面的作用机制。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养;实验分为5组:空白对照组、TGF-β1组(TGF-β110μg/L)、干预1组(TGF-β110μg/L Cur1μmoL/L)、干预2组(TGF-β110μg/L Cur5μmoL/L)、干预3组(TGF-β110μg/L Cur10μmoL/L)。在倒置显微镜下观察各组细胞形态的改变,并通过MTT法检测姜黄素对细胞增殖的影响。结果TGF-β110μg/L能显著诱导人肾小管上皮细胞增殖,与空白对照组相比有显著性差异(P(0.05),并随着处理时间延长而作用增强,但和姜黄素共同作用后,其促细胞增殖作用受到显著抑制(P(0.05)。结论姜黄素能够维持HK-2细胞形态的稳定性,防止细胞纤维样改变,在一定程度上具有抑制TGF-β1诱导细胞增殖的作用,这可能是其防治肾间质纤维化的机制所在。     

温脾汤对5/6肾切除大鼠残余肾脏的保护作用

摘要背景:肾纤维化是几乎所有肾脏疾病进展到终末期肾衰的共同通路,大多数抗肾纤维化的治疗尚处于实验阶段。研究表明中药具有良好的抗肾纤维化应用前景,温脾汤是临床上治疗慢性肾衰、保护肾功能的有效方剂。目的:探讨温脾汤对5/6肾切除大鼠残余肾脏功能和形态学的影响。设计:随机对照的实验研究。地点、材料和干预:本实验在北京中医药大学细胞与生化实验室完成。实验选用雄性Wistar大鼠44只,质量(200±20)g。实验动物于术前按质量随机分组,其中36只大鼠接受5/6肾切除术(分别为温脾汤组、尿毒清组),8只留作假手术组。采用5/6肾切除大鼠模型,动态观察温脾汤对病理大鼠质量、血清肌酐、尿素氮以及24h尿蛋白的影响。并对肾组织六铵银染色(PAM)结果进行光镜观察和图像分析,观察大鼠组织形态学变化。主要观察指标:假手术组大鼠与其他3组肾切除术前,术后4,8,12,16周血清肌酐、尿素氮、24h尿蛋白、体质量比较。结果:温脾汤组术后12,16周时血清肌酐犤(9.4±1.0),(12.8±2.2)mg/L犦显著低于模型组犤(11.7±1.7),(16.1±1.7)mg/L犦,差异有显著性意义(t=4.052,P<0.01)。温脾汤组大鼠血清尿素氮在术后呈缓慢上升趋势,但在术后12,16周时仍明显低于模型组(t=6.504～15.498,P<0.05)。温脾汤和尿毒清组大鼠24h尿蛋白呈缓     

阿片类毒品对HIV感染者PBMCs中IFN-α、ISG56、MxA表达的影响

目的 通过检测阿片类毒品(opiates)对HIV感染者中干扰素α(interferon-oα,IFN-α)、干扰素诱导基因56(interferon-stimulated gene 56,ISG56)、粘病毒抵抗蛋白A(myxovirus resistance protein A,MxA)表达水平的影响,初步探讨阿片类毒品对人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)复制影响的机制.方法 研究对象选取美沙酮门诊、艾滋病自愿咨询检测门诊人群200名,分为4组:Opiate+ HIV+组、Opiate+ HIV-组、Opiate-HIV+组和对照组.面对面问卷调查并采集研究对象外周静脉血,分离外周血单核细胞,采用实时荧光定量PCR法、免疫印迹法、ELISA法等检测4组人群中IFN-oα、ISG56、MxA的mRNA,蛋白表达水平,比较相关因子相对表达量的差异.结果 4组人群在年龄、性别、民族、户籍所在地、婚姻状况、文化程度及职业等人口学特征方面差异均无统计学意义(均有P＞0.05).无论是在基因还是蛋白水平上,HIV感染人群中毒品滥用者的IFN-α、ISG56和MxA的表达水平均低于非毒品滥用者,差异均有统计学意义(均有P＜0.05).结论 阿片类毒品可能抑制抗病毒效应因子IFN-α、ISG56和MxA的表达,从而促进HIV-1的复制.