γ射线照射对肺腺癌细胞迁移能力的影响及其分子机制

目的探讨辐射对肺腺癌A549细胞迁移能力的影响及其所依赖的信号通路。方法划痕实验检测2和4 Gyγ射线照射后A549细胞的迁移能力,Western印迹实验检测STAT3及磷酸化STAT3水平,ELISA法检测IL-6的分泌水平,间接免疫荧光染色观察STAT3在细胞内定位情况。结果 2或4 Gyγ射线照射均能显著增强A549细胞的迁移能力,并能激活STAT3的磷酸化,促进STAT3入核以及IL-6的分泌。JAK-2激酶特异性抑制剂AG490能阻断辐射诱导的STAT3磷酸化并进一步抑制辐射诱导的A549细胞迁移。结论本研究结果表明辐射能通过激活JAK-2/STAT3信号通路促进A549细胞的迁移,而IL-6可能参与了辐射诱导的JAK-2/STAT3信号通路的激活。     

S100A4-siRNA体外转染下调MMP-2表达抑制胰腺癌细胞侵袭能力的研究

目的观察S100A4基因沉默后人胰腺癌Bxpc-3细胞株S100A4和MMP-2的表达及肿瘤细胞迁移和侵袭能力的变化,探讨S100A4基因在肿瘤转移中的作用机制。方法采用RNA干扰技术将S100A4-siRNA转染至人胰腺癌Bxpc-3细胞,采用荧光实时定量PCR和Western免疫印迹方法检测转染前后S100A4和MMP-2的mRNA和蛋白表达;以Transwell小室模型检测转染前后癌细胞迁移和侵袭能力变化。结果转染后S100A4和MMP-2的表达均下调;细胞体外迁移和侵袭能力显著降低（P〈0.05）。结论 S100A4基因上调MMP-2的表达是肿瘤细胞具有高侵袭性的机制之一。S100A4基因可以作为胰腺癌基因治疗的一个靶点。     

STAT3RNAi联合γ射线照射对U251细胞增殖的影响

目的 构建特异性抑制信号转导与转录激活因子3 (STAT3)的小干扰RNA(siRNA)表达载体并检测联合 ⁶⁰Co γ射线照射对U251细胞STAT3表达及细胞增殖的抑制作用。方法 设计、合成STAT3特异性的19 bp短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到pSilence2.1-U6-H1载体中,构建STAT3特异siRNA的表达载体, HindⅢ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组体,并转染U251细胞,免疫印迹法(Western blot)检测STAT3 mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性,克隆形成率及MTT实验确定放疗剂量。结果 经双酶切与测序鉴定成功构建pSilence2.1-STAT3表达载体,转染星形胶质瘤细胞株U251细胞可显著抑制细胞中STAT3 蛋白的表达水平;确定2 Gy为放疗剂量。转染pSilence2.1-STAT3,细胞增殖活性较未转染U251细胞显著降低(P<0.05),联合 ⁶⁰Co γ射线照射U251细胞增殖活性单独转染进一步显著降低(P<0.05)。结论 运用pSilence2.1-U6-H1载体构建的pSilence2.1-STAT3表达载体可有效抑制STAT3的表达及星形胶质瘤细胞的增殖; 联合2 Gy ⁶⁰Co γ射线照射可增加抑制效果。     

γ射线对人肺癌A549细胞和人淋巴细胞Cx43基因转录表达的影响

目的:研究γ射线对人肺癌A549细胞和淋巴细胞Cx43基因转录表达的影响.方法:对数生长期的肺癌A549细胞和外周血淋巴细胞,分别给予1、2、3、5和6 Gy的60Co γ射线照射,并于照射前(对照组)和照射后4、8、12、24、36、48和72 h分别提取总RNA,反转录成cDNA.应用实时荧光定量PCR技术,检测各时相点Cx43基因表达改变.结果:低剂量1～6 Gy照射后12 h,人外周血淋巴细胞Cx43 mRNA表达水平明显增高,P<0.05.肺癌A549细胞照射后Cx43 mRNA表达水平(在1、3和6 Gy照射12 h后分别为0.06、0.12和0.09)与对照组(1.00)相比明显降低,P<0.05.结论:γ射线照射后能上调人淋巴细胞Cx43 mRNA表达和下调肺癌A549 Cx43 mRNA表达,其机制可能与细胞类型及对γ射线的反应性有关.     

敲低Plk1对人肝癌血管内皮细胞迁移影响研究

目的研究人Polo样激酶1(polo-like kinase 1,Plk1)在人肝癌血管内皮细胞(human hepatocellular carcinoma tumor-derived endothelial cell,TEC)迁移过程中的作用。方法用含有20%胎牛血清的RPMI1640培养基培养TEC细胞,合成Plk1和阴性对照小干扰片段。实验设置Plk1siRNA处理组和siRNA阴性组(对照组)。分别用Plk1siRNA和阴性对照siRNA转染TEC,采用蛋白质印迹法验证Plk1siRNA干扰能否有效降低TEC细胞的Plk1蛋白表达水平;采用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验评估Plk1siRNA转染后TEC迁移能力的变化。结果蛋白质印迹法检测结果显示,Plk1siRNA转染后TEC细胞中Plk1蛋白表达降低。Transwell细胞迁移实验发现,Plk1siRNA处理组12h穿膜细胞数为130.9±23.0,低于siRNA阴性组的184.9±26.6,t=-5.943,P<0.001。细胞划痕实验显示,Plk1siRNA处理组细胞12h迁移距离为(17.5±7.0)像素,低于siRNA阴性组的(72.6±12.4)像素,t=-6.698,P=0.006;Plk1siRNA处理组细胞24h迁移距离为(70.9±6.9)像素,低于siRNA阴性组的(137.9±18.9)像素,t=-5.761,P=0.016。结论敲低Plk1能显著抑制人肝癌血管内皮细胞的迁移能力,提示Plk1可能在人肝癌血管内皮细胞转移中具有一定作用。     

福岛第一核电站应急工作人员的职业照射管理和健康监护

<正>核或辐射紧急情况下,为避免不必要的辐射照射风险和有效支持现场减灾活动,应急工作人员的防护与安全是必须考虑的一个关键问题[1]。政府必须制定关于管理、控制和记录应急工作人员在紧急情况下所受剂量的计划,该计划必须由响应组织和雇主实施[2]。文献[3]介绍了日本东京电力公司(TEPCO)福岛第一核电站特大事故(以下或简称福岛事故)期间放射工作人员的受照情况和剂量管理措施,对改善应急照射剂量管理应关注的问题也进行了有益的探讨。现对其所涉问题进一步补充说明如下。1关于应急照射情况下的个人剂量参考水平     

4 Gy X线照射通过上调MMP-2/9表达增强骨肉瘤细胞迁移能力

目的 研究4 Gy X线照射对骨肉瘤细胞迁移能力的影响及其机制.方法 将143B细胞和U2OS细胞分为对照组和4 Gy照射组,分别于照射后12、24、36和48 h,采用Transwell法检测细胞的迁移能力,Western印迹检测细胞MMP-2和MMP-9蛋白表达水平;siRNA法干扰细胞MMP-2/MMP-9表达....