重症急性胰腺炎的治疗

近年来 ,随着对重症急性胰腺炎 (SAP)发病机制认识的不断深入 ,以及影像学诊断技术、监测手段、抗生素和抑酶药物的发展 ,使SAP的治疗有了概念上的更新。由过去“手术→保守→早期手术”的探索转变到采取“个体化治疗方案”指导下 ,按病因、病期的“综合治疗” ;从单一手术发展到以胰腺坏死合并感染与否来决定手术与非手术的“双轨治疗”方案 ,将“保护机体功能活动 ,有效引流和排除毒素 ,合理的营养要素供给 ,适时外科清创引流”原则作为整个治疗的基础。目前SAP的治疗效果 ,总体生存率已达83% ,其中手术治疗的生存率达70%以上 ,非手术…     

慢病毒载体介导RNAi靶向抑制胰腺癌细胞survivin表达并诱导细胞凋亡的实验研究

目的探讨运用慢病毒载体介导的RNA干扰技术对survivin的抑制效率及对胰腺癌细胞SW1990凋亡的影响。方法应用pGCSIL-neo质粒构建3对针对survivin的慢病毒ShRNA载体,转染包装细胞293T,收集病毒上清转染胰腺癌细胞系SW1990,实时荧光定量PCR和western-blot免疫印迹检测癌细胞内survivin的表达;测定caspase3/7活性和DAPI染色检测细胞凋亡。结果成功构建3个survivin-ShRNA慢病毒载体,LV-shRNA-survivin-1对survivn的mRNA和蛋白表达抑制效率分别为73.50%和87.64%;与对照组相比,其caspase3/7活性升高14.5倍,细胞凋亡明显增加(11.95%)。结论慢病毒载体介导的Suvivin-ShRNA靶向转染可有效抑制survivin表达,并显著增加胰腺癌细胞的凋亡。     

妊娠期急性胰腺炎：单中心20年52例分析

目的：总结妊娠期急性胰腺炎（APP）的发病特点和预后及20年的变迁,探讨其临床诊治要点。 方法：回顾性分析近20年（1994—2013年）中南大学湘雅医院收治的52例APP患者的临床资料。 结果：52例APP中,孕早期3例（5.8%）,孕中期12例（23.0%）,孕晚期37例（71.2%）;轻型胰腺炎26例（50.0%）,中度重症胰腺炎13例（25.0%）,重症胰腺炎13例（25.0%）。病因方面：高脂血症性胰腺炎28例（53.8%）,胆源性14例（27.0%）,特发性胰腺炎10例（19.2%）。全组孕产妇病死率为0;胎儿病死率为19.2%（10/52）,其中2例胎死宫内,4例早产后新生儿窘迫,4例因考虑药物对胎儿影响而行流产或引产。 结论：近20年APP的发病率呈逐年上升趋势,且多数发生于孕晚期,高脂血症和胆道疾病是其主要病因,其中前者所占比例尤为突出。APP仍伴有较高的胎儿病死率,进一步规范的治疗和加强围产期新生儿的护理对于改善APP总体预后具有重要价值。     

survivin在胰腺癌组织中的表达及其意义

[目的]检测生存素基因(survivin)在胰腺癌组织中的表迭情况,并分析其与临床病理指标的关系.[方法]应用免疫组化法检测35例胰腺癌手术切除标本和10例癌旁正常组织,分析survivin的表达与病理分级和临床分期的关系.[结果]免疫组化显示胰腺癌组织中有survivin的阳性表达,而癌旁组织中无sur-vivin的表达.胰腺癌组织中其表迭的阳性率(26/35,74.29%)明显高于癌旁组织(0/10,0%)(P<0.05),survivin在胰腺癌组织中的表达水平与肿瘤的临床分期和病理分级有关;两病理因素分组间差异有显著性(P<0.05),而与肿瘤的远处转移无明显关系;远处转移分组间差异无显著性(P>0.05).[结论]Survivin在胰腺癌组织中的阳性率高于癌旁组织,并与其病理分级和临床分期相关,可作为早期判别胰腺癌及其预后的指标.     

蛋白质组学技术筛选结直肠癌淋巴结转移相关蛋白的初步研究

目的应用蛋白质组学技术寻找与结直肠癌淋巴结转移相关的蛋白。方法根据术后病理结果将10例结直肠癌新鲜标本分为有淋巴结转移的A组、及无淋巴结转移的B组,以该病例的正常大肠黏膜作为对照(C组)。将组织总蛋白进行双向凝胶电泳,对部分差异蛋白质点进行质谱分析和鉴定。应用免疫组织化学方法检测组织中蛋白表达。结果A组、B组、C组的平均蛋白质点数分别为874±28、860±45、756±32;A组与C组、B组与C组的平均匹配率分别为89．7％、86．1％;A组与C组、B组与C组、A组与B组的差异表达蛋白质点数分别为72±12、64±9、21±4。确定A组表达高于B组表达的5种蛋白质为:HSP27、Annexin A2、AnnexinⅣ、GST、LFBP。免疫组织化学结果显示,GST在正常黏膜组,非转移组、转移组、转移灶中的表达阳性率分别为25％,57．5％, 90％,95％,多组间比较差异有统计学意义。HSP27在正常黏膜组,非转移组、转移组、转移灶组中的表达阳性率分别为5％,50％,90％,95％,多组间比较差异有统计学意义。GST和HSP27表达之间无显著性相关。结论结直肠癌组织淋巴结转移组、无淋巴结转移组和正常肠黏膜组存在差异表达蛋白,GST和HSP27表达可能在淋巴结转移中有重要意义。     

人Endostatin cDNA的克隆及其在HT1080细胞中的表达

目的 :构建能表达人Endostatin的真核表达质粒。方法 :设计引物从成人肝cDNA文库中通过PCR扩增到EndostatincDNA ,并在 5′端融合编码人胰岛素信号肽序列 ,经测序证实后连接到真核表达载体pcDNA3.1(- )中。将携带基因的真核表达载体质粒pcDNA3.1(- ) SEND转染HT10 80细胞后用G4 18筛选获得克隆 ,采用RT PCR和West ern blot检测Endostatin的表达。结果 :测序结果表明克隆的人EndostatincDNA完全正确 ,并且在其 5′端融合编码人胰岛素信号肽序列 ;RT PCR显示转染后的HT10 80细胞可以有效地转录EndostatinmRNA ;Western blot检测到转染后的HT10 80细胞上清有相应的蛋白质 ,大小为 2 0kD左右。结论 :含有人胰岛素信号肽序列的人EndostatincDNA重组质粒pcDNA3.1(- ) SEND转染HT10 80细胞后可以有效的表达目的蛋白并能分泌到细胞外 ,本研究为Endostatin的功能研究及应用于基因治疗提供基础     

外科手术学教学质量的调查分析

外科手术学是外科的重要启门课程，也是所有需要进行手术操作学科的基础。为了适应当前培养高素质医学人才的需要，我们对外科手术学教学的方法、内容和手段等方面进行了调查，旨在进一步提高手术学教学质量，为相关临床课程打好基础。     

ESKAPE血流感染对急性坏死型胰腺炎预后的影响

目的:探讨ESKAPE血流感染对急性坏死性胰腺炎(ANP)患者预后及并发症的影响。方法:回顾性分析2003年1月—2014年7月收治的有血培养结果的87例ANP患者,其中血培养阴性49例,阳性38例,分析血流感染,尤其是ESKAPE血流感染对ANP患者治疗结果的影响。结果:在38例血培养阳性ANP患者的69份的病原学结果中,40.6%为ESKAPE,其中鲍曼不动杆菌占比50.0%,其余依次为屎肠球菌(14.3%)、肺炎克雷伯菌(10.7%),肠杆菌属(10.7%),金黄色葡萄球菌(7.1%)和铜绿假单胞菌(7.1%)。血流感染患者休克、呼吸衰竭、肾功能衰竭与消化道出血等并发症的发生率、病死率、住院费用及ICU住院天数均较非血流感染患者明显增高(均P<0.05);ESKAPE血流感染患者休克发生率以及住院费用均高于非ESKAPE血流感染患者(均P<0.05)。结论:血流感染明显增加ANP患者的并发症和病死率。ESKAPE是导致ANP患者血流感染的主要病原体,其与患者休克的发生密切相关。     

环氧合酶-2在重症急性胰腺炎大鼠模型中表达的实验研究

目的：研究环氧合酶-2（COX-2）在重症急性胰腺炎（SAP）大鼠胰腺组织中的表达，探讨其在SAP发病中的可能机制。方法：健康成年雄性SD大鼠40只随机分成重症急性胰腺炎组（SAP，n=20）和正常对照组（NC，n=20）。术后12h 2组各处死10只大鼠，检测血清淀粉酶活性、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度，血浆TXB2和6-keto-PGF1α浓度及胰腺组织中COX-2的表达，光镜观察胰腺组织的病理变化，并进行评分。2组其余10只大鼠观察24h及72h存活率。结果：SAP组12h大鼠胰腺组织中COX-2蛋白表达为强阳性（10／10），而NC组中仅1例表达（1／10）。血清淀粉酶活性、TNF-α浓度，血浆TXB2和6-keto-PGF1α浓度均显著高于NC组（P〈0．01）。光镜病理评分显示，SAP组水肿、炎症、出血和坏死评分均较NC组有明显升高（P〈0．05）。SAP组大鼠24h死亡率为100％，NC组死亡率24h为0。结论：重症急性胰腺炎时有COX-2的过表达和前列腺素（PGs）增加，COX-2可能通过促进PGs增加而在SAP发病中起重要作用。