阶梯式手术培训模式在后腹腔镜肾根治性切除术教学中的应用

目的：介绍我中心阶梯式手术培训模式在后腹腔镜肾根治性切除术教学中的初步探索经验。方法：根据随机数字表的方式,将2017年1月至2021年12月,在中国人民解放军总医院第三医学中心泌尿外科进修或者攻读研究生学位并接受腹腔镜培训的泌尿外科医师30名,随机分为阶梯式培训组和传统教学组。比较两组学员的基线资料,包括年龄、学历、职称以及既往腹腔镜手术经验。达到研究终点后,比较两组的首例手术资料、手术培训时间和例数、学员评分。结果：两组学员在年龄、学历、职称和腹腔镜手术经验方面均无明显差异（P>0.05）。通过系统培训,两组共30名成员均可在导师指导下独立完成后腹腔镜肾根治性切除术。首例患者年龄、性别、肿瘤侧别、肿瘤最大径均无明显差异（P>0.05）。与传统教学组相比,阶梯培训组手术培训时间更短（5.7月vs. 6.8月,P=0.007）,培训例数更少（5.3例vs. 6.5例,P=0.002）,首例手术时间更短（88.1 min vs.101.3min,P=0.010）,学员评分更高（8.2 vs. 7.0,P=0.014）。两组在首例出血量和并发症方面没有明显差异（P>0.0...     

RAPN与LPN治疗孤立肾肾肿瘤的效果比较

目的比较机器人辅助腹腔镜肾部分切除术(RAPN)与腹腔镜肾部分切除术(LPN)治疗孤立肾肾肿瘤的效果, 并分析患者术后肾功能和远期生存的影响因素。方法回顾性分析2010年11月至2022年1月在解放军总医院行手术治疗的67例孤立肾肾肿瘤患者的临床资料。男48例, 女19例;年龄(58.6±10.1)岁。按照手术方式不同分为RAPN组(43例)和LPN组(24例)。RAPN组较LPN组的R.E.N.A.L.评分更高[(8.7±1.5)分与(7.9±1.7)分, P=0.042], 两组年龄[(57.4±10.2)岁与(60.9±9.8)岁, P=0.185]、体质量指数(BMI)[(25.7±3.5)kg/m2与(25.1±3.6)kg/m2, P=0.518]及术前血肌酐[(102.9±31.6)μmol/L与(102.3±22.4)μmol/L, P=0.930]差异均无统计学意义。12例术中采用低温处理, 其中RAPN组9例(20.9%), LPN组3例(12.5%, P=0.596)。比较两组手术时间、术中热缺血时间、术中失血量、术后禁食时间、围手术期并发症发生率、术后血肌酐等指...     

Fibulin-5过表达对膀胱癌细胞增殖的影响

目的 观察Fibulin-5对膀胱癌细胞增殖的影响.方法 采用脂质体介导法将构建好的p-EGFP-N1-Fibulin-5表达载体转染到膀胱癌5637细胞中.通过噻唑蓝(MTT)比色法和细胞计数法检测Fibulin-5表达上调后膀胱癌细胞生长率的变化.结果 酶切鉴定及DNA测序结果显示Fibulin-5 cDNA插入正确;转染48 h后,观测到p-EGFP-N1-F5表达载体转染成功的细胞均有不同程度的绿色荧光表达.培养第7天,MTT法测得转染Fibulin-5、转染空载体和未转染的膀胱癌细胞的吸光值分别为0.330±0.025、0.640 ±0.030和0.72±0.060.绘制生长曲线发现转染Fibulin-5的膀胱癌细胞的生长率明显低于转染空载体(P＜0.05)和未转染的细胞(P＜0.05).细胞计数结果和MTT一致.结论 Fibulin-5可能通过抑制膀胱癌细胞的增殖而在膀胱癌中起抑癌基因的作用.     

Inhibitory effects of microRNA-34a on cell migration and invasion of invasive urothelial bladder carcinoma by targeting notch1

MicroRNAs (miRNAs or miRs) are a class of short, non-coding RNAs that participate in various oncological processes. This study aims to explore the roles of microRNA-34a (miR-34a) in invasive urothelial bladder carcinoma. miR-34a was transfected into bladder cancer cell lines 253J and J82. The miR-34a expression levels in tissues and cells were detected by using qRT-PCR. The Notch1 expression was detected by qRT-PCR and Western blotting. Cell migratory and invasive abilities were measured by Transwell chamber assay. Bioinformatics and luciferase assay were performed to predict and analyze the binding sites between miRNA-34a and Notch1. It was found that there was aberrant expression of miR-34a in bladder cancer tissues. Moreover, we revealed that ectopic expression of miR-34a suppressed cell migration and invasion, while forced expression of Notch1 increased cell migratory and invasive abilities. Finally, we observed that miR-34a transfection significantly down-regulated luciferase activity and reduced the mRNA and protein levels of Notch1. Our study concluded that microRNA-34a antagonizes Notch1 and inhibits cell migration and invasion of bladder cancer cells, which indicates the tumor-suppressive function of microRNA-34a in bladder cancer.     

类固醇生成因子-1基因沉默在介导血管紧张素Ⅱ对醛固酮分泌调控的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)刺激人肾上腺皮质癌H295R细胞后醛固酮合成酶(CYP11B2)mRNA及醛固酮激素的改变,探讨类固醇生成因子-1(SF-1)基因沉默在介导该反应中的作用.方法 用携带U6启动子和SF-1特异性短发夹RNA(shRNA)序列的质粒载体pGenesil1-SF-1-shRNA及含非特异性shRNA编码序列的阴性对照质粒pGenesill-negative-shRNA转染人肾上腺皮质癌H295R细胞,应用Westem blot和荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测SF-1表达的改变,以100 nmol/L浓度ATⅡ刺激实验组和对照组细胞,检测ATⅡ刺激后3、6、9、12、15、18 h时间点CYP11B2 mRNA表达水平,与未刺激时对比,检测两组细胞CYP11B2 mRNA的最大增幅.用放射免疫法测定醛固酮激素在ATⅡ刺激24 h后的分泌水平,对比两组细胞醛固酮增幅.结果 实验组细胞SF-1在蛋白水平和mRNA水平分别下降了69.07%和71.20%(P＜0.01).ATⅡ刺激后12 h时CYP11B2 mRNA表达水平最高,与未刺激前比较,实验组和对照组的CYP11B2 mRNA增幅分别是50.21倍和800.09倍(P＜0.01),后者是前者的15.93倍(P＜0.01).同样,ATⅡ刺激后醛固酮激素分泌水平均升高,对照组细胞刺激前后分别为(0.061±0.007)μg/L和(0.256±0.014)μg/L(P＜0.01);而实验组醛固酮激素在ATⅡ刺激前后则分别为(0.101±0.010)μg/L和(0.252±0.016)μg/L(P＜0.01),两组比较,前者增幅高于后者1.7倍(P＜0.01).结论 SF-1表达下调可以降低CYP11B2 mRNA及醛固酮对ATⅡ的敏感性和反应性.     

类固醇生成因子-1在醛固酮瘤中的表达及意义

目的 探讨类固醇生成因子-1(SF-1)在原发性醛固酮增多症(PA)发病中的作用.方法 分别收集16例醛固酮瘤组织标本和12例正常肾上腺组织标本,Western b1ot法检测各标本SF-1蛋白表达水平,荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测其mRNA表达水平.结果 醛固酮瘤组SF-1无论在蛋白表达水平还是在mRNA表达水平均高于正常肾上腺组,蛋白表达水平分别为(0.87±0.05和0.39±0.07,P＜0.01),mRNA水平则前者是后者的10.48倍(P＜0.01),差异均有统计学意义.结论 SF-1表达上调在PA的发病中发挥着重要作用.     

后腹腔镜活体供肾切取术:附58例报告

目的 总结后腹腔镜活体供肾切取术(RLDN)的临床经验.方法 回顾性分析2008年3月至2010年1月58例RLDN临床资料,供者男32例,女26例,年龄20～61岁,平均42岁,56例取左侧供肾,2例取右侧供肾.前35例采用后腹腔镜活体供肾切取术,后23例采用改良后腹腔镜活体供肾切取术.结果 58例供肾切取术均获得成功,无供体死亡,无中转开放手术.手术时间70～130min,平均93min,术中出血10～50ml,平均20ml,供肾热缺血时间1.3～6min,平均2.8min.术后发生腹膜后血肿1例,无其他手术并发症,术后5～10d出院,平均6.4d.58例受者中2例发生移植肾功能延迟恢复,术后4周肾功能恢复正常,1例因急性排斥反应切除移植肾,3例术后4周肾功能恢复正常,余52例肾功能2周内恢复正常.结论 后腹腔镜活体供肾切取术安全、可靠、微创,改良后腹腔镜活体供肾切取术在保证供肾质量、微创前提下,降低了学习曲线,更易于掌握推广.     

腹腔镜保留肾单位术三级培训模式初探

目的 介绍腹腔镜保留肾单位术的三级培训模式.方法 三级培训模式的内容包括体外模拟阶段、动物模型训练和临床实践操作.以小型猪作为实验模型建立腹腔镜保留肾单位术的标准操作方式.临床实践操作又细分为三步进行,包括辅助手术、开展相对简单的腹腔镜手术和进行LNSS. 结果 4名学员均成功完成全部三级培训内容.其中体外模拟培训累计时间平均为70 h.经过体外模拟培训后全部学员均能够熟练地掌握腔镜器械下缝针打结等基本操作技能.4名学员均完成动物模型LNSS 20例,其中半肾切除术6例.肾上极或下极平均手术时间由最初的(120.0±10.9)min降低到在完成12台LNSS时的(69.0±5.2)min,差异有统计学意义(P<0.01).学员在开展后腹腔镜肾囊肿去顶术和上段输尿管切开取石术等相对简单的手术7～9例后,各自成功地完成LNSS手术3例,均未出现术中并发症.LNSS平均手术时间为87 rain,肾脏热缺血时间平均为25 min.结论 "三级培训模式"能够帮助年轻医生掌握LNSS这类高难度复杂性泌尿外科腹腔镜手术,显著地降低手术并发症的发生,提高手术疗效,有利于腹腔镜手术的推广应用.     

腹腔镜离断性肾盂成形术动物模型的建立方法

目的建立模拟训练腹腔镜离断性肾盂成形术的动物模型。方法选择体质量25kg左右的小型猪作为实验模型，速眠新（0．1ml／kg）和戊巴比妥钠（0．25g／kg）麻醉。经脐部导入CO2制备气腹，取侧卧位后，放置3个套管。分离肾脏和输尿管，斜形裁剪输尿管远切端。取肾门附近一段小肠与肾上极固定后，环形裁剪小肠壁约3cm，以此段小肠模拟扩张肾盂。按腹腔镜离断性肾盂成形术的标准方法进行肾盂输尿管吻合。术中顺行放置双J管于肾盂输尿管内。4名学员均有体外模拟训练经验，按照手术时间和肾盂输尿管吻合质量评估学员的学习曲线。结果该模型能够模拟完成腹腔镜离断性肾盂成形术的各项技术要求，而且每侧肾脏输尿管可以在相同解剖毗邻关系下进行3次肾盂成形术。在学员接受了12次肾盂成形术训练后，平均手术时间从最初的（140．0±20．3）min降为（63．0±7．1）min（P＜0．01）。学员均能熟练完成无张力的肾盂输尿管吻合。结论本模型的建立能够使学员掌握肾盂成形术的腔内操作技巧和手术方法。此外，本模型利用小肠替代扩张肾盂从而能够提供更多的训练机会。     

经腹膜外腹腔镜前列腺癌根治术329例报告

目的:回顾分析329例经腹膜外腹腔镜前列腺癌根治术的手术方法和疗效。方法:2005年3月～2010年3月经腹膜外腹腔镜前列腺癌根治术329例,中位年龄67岁,初始前列腺特异性抗原中位数为17.35μg/L,活检Gleason评分中位数为7。结果:329例手术均成功完成,无中转开放手术。膀胱尿道吻合时间中位数为13min,手术时间中位数为90min,术中失血量中位数为75ml,术后尿管留置时间中位数为6d。整体切缘阳性率为16.7%,与病理分期和Gleason评分具有相关性(P<0.001)。术后1年内,年轻患者的尿控能力恢复较快,而且性功能恢复较好。术后随访时间中位数为27(14～72)个月,89例出现生化复发;多因素分析显示初始PSA值、切缘阳性率、病理分期和Gleason评分是无生化复发生存的独立预后因素。术前新辅助激素治疗对病理Gl-eason评分(P<0.001)和手术切缘阳性率(P=0.027)有显著影响,但对生化复发没有显著影响(P=0.202)。结论:经腹膜外腹腔镜前列腺癌根治术是局限性前列腺癌安全有效的微创外科治疗方法,值得临床推广。