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背景:获得大量功能良好的肝细胞是生物人工肝的核心。探索出一种可靠的肝细胞低温保存方法进而构建一个肝细胞库是目前生物人工肝研究的热点。
目的:比较用UW液在4 ℃条件下保存已经进入Ⅲ期临床试验的C3A细胞与国内构建的永生化肝细胞株L-02细胞的生物学特性。
方法:贴壁培养C3A与L-02细胞,胰酶消化,制备成细胞悬液,UW液保存。4 ℃低温保存0,24,48及72 h后,采用流式细胞术分别测定细胞存活率与凋亡率,测定谷草转氨酶与乳酸脱氢酶释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能。
结果与结论:随低温保存时间延长,C3A与L-02细胞存活率呈下降的趋势,但C3A细胞的存活率明显高于L-02细胞(P < 0.01);细胞凋亡率呈上升趋势,但48 h后C3A细胞同L-02细胞无差异(P > 0.05)。谷草转氨酶及乳酸脱氢酶释放呈现上升的趋势,但C3A细胞明显低于L-02细胞(P < 0.01)。白蛋白分泌功能呈下降的趋势,但C3A细胞明显优于L-02细胞(P < 0.01)。尿素合成功能呈下降的趋势,但是L-02细胞明显优于C3A细胞(P < 0.01)。结果提示,UW液4 ℃保存C3A细胞与L-02细胞时间不易超过48 h。以C3A细胞为材料的人工肝可能更适用于肝功能衰竭合并低白蛋白血症,以L-02细胞为材料的人工肝更适用于肝功能衰竭合并肝性脑病。 相似文献
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胆囊切除术门静脉损伤的教训分析李安全(安徽省淮南市第一人民医院普外科232000)例1,女性,72岁,慢性胆囊炎、胆囊结石。行胆囊切除术,术中发现胆囊Hartmann’s袋粘连于Winslow’s孔内,用血管钳提起Hartmann’s袋,锐性分离粘连... 相似文献
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目的 比较UW液、Celsior液和HTK液4℃常规低温保存生物人工肝用L-02细胞的效果。方法 制备好的L-02细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组)。各组细胞于4℃低温保存72h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术),ALT及LDH释放,尿素合成功能及白蛋白分泌功能。结果 UW液较Celsior液和HTK液显著提高了4℃常规低温保存保存72h的L-02细胞的存活率[(60.05 ± 4.23)% vs (50.12 ± 3.99)%、(44.20 ±4.67)%],均P<0.05;降低了细胞死亡率[(39.95±4.23)%vs (49.88 ±3.99)%、(55.80%±4.67)%], 均P<0.05;抑制了ALT、LDH释放(均P <0.05);更好地维持了L-02细胞尿素合成功能[ (1.03 ± 0.23)mmol/L vs (0.80± 0.14)mmol/L、(0.48± 0.05)mmol/L]和白蛋白分泌功能[(8.36 ±1.38 )mg/L vs (6.41±1.25)mg/L、(5.19±0.41)mg/L), 均P<0.05。结论 同Celsior液和HTK液相比,使用UW液4℃常规低温保存L-02肝细胞可以明显的提高复温后细胞存活率,降低低温损伤引起的ALT、LDH释放,有效的保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能,但保存时间不应超过72h。 相似文献
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目的 比较零下非结冰(-0.8℃)与常规低温(4℃)分别用于人工肝用永生化L-02细胞保存的效果,探索零下非结冰保存肝细胞与细胞凋亡的关系.方法 制备好的UW液保存的L-02细胞悬液分为以下2组:-0.8℃组(零下非结冰组),4℃组(对照组).低温保存24、48 h及72 h后,分别测定细胞存活率、凋亡率、坏死率(流式细胞术)及ALT释放、尿素合成功能、白蛋白分泌功能.结果 -0.8℃(零下非结冰)较4℃明显提高了长时间低温保存L-02细胞的存活率[72 h:(70.17±2.82)%vs(60.05 4±3.17)%,P<0.01],降低了细胞凋亡率[72 h:(5.73±1.68)%vs(9.20±2.35)%,P=0.02],抑制了ALT释放[72h:(6.21±O.65)U/L vs(8.68±1.18)U/L,P<0.01],更好地维持了L-02细胞的尿素合成功能[72 h:(1.01±0.14)mmol/L vs(0.66±0.09)mmot/L,P<0.01]及白蛋白分泌功能[72 h:(9.04±0.53)μg/ml vs(7.70±0.52)μg/ml,P<0.01].2组间细胞坏死率差异无统计学意义[72 h:(18.45±1.88)%vs(21.82±3.86)%,P>0.05].结论 零下非结冰可明显维持L-02细胞存活率,降低低温损伤引起的细胞凋亡,有效保护肝细胞尿素合成和白蛋白分泌功能. 相似文献
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零下非结冰保存L-02细胞的效果及与细胞凋亡的关系 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 采用UW液零下非结冰(-0.8℃)保存生物人工肝用L-02细胞,与常规低温(4℃及0℃)比较,探索零下非结冰保存肝细胞的效果以及同细胞凋亡的关系.方法 制备好的UW液保存的L-02细胞悬液分为3组:-0.8℃组(零下非结冰组),0℃组(0℃非结冰组),4℃组(对照组).低温保存24 h、48 h及72 h后,分别测定细胞存活率及凋亡率(流式细胞术)、LDH释放、尿素合成功能、白蛋白分泌功能.结果 零下非结冰(-0.8℃)较常规低温(0℃及4℃)明显提高了低温保存L-02细胞的存活率[72 h:-0.8℃(70.17±2.82)% vs 4℃(60.05±3.17)%],降低了细胞凋亡率[72 h:-0.8℃(5.73±1.68)% vs 4℃(9.20±2.35)%].零下非结冰明显抑制了LDH的释放[72 h:-0.8℃(113.88±5.64)U/L vs 4℃(170.47±11.80)U/L],更好地维持了L-02细胞的尿素合成功能[72 h:-0.8℃(1.01±0.14)mmol/L vs 4℃(0.66±0.09)mmol/L]及白蛋白分泌功能[72 h:-0.8℃(9.04±0.53)μg/ml vs 4℃(7.70±0.52)μg/ml].结论 与0℃及4℃相比,零下非结冰(-0.8℃)可明显提高L-02细胞存活率,降低低温损伤引起的细胞凋亡,有效的保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能. 相似文献
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目的 探讨胆囊切除术后胆囊残余病变的原因、治疗及预防方法.方法 回顾分析2000年1月至2007年12月间收治的24例胆囊切除术后残余病变的原因、类型、处理方法及效果.结果 24例均行再次手术.切除过长胆囊管或小胆囊,其中胆囊管或小胆囊内残余结石21例,残余胆囊合并有胆总管结石1例,加行胆总管切开取石,T型管引流,另2例为残余胆囊.术后恢复良好,均治愈.切除标本送病理检查,无肿瘤及恶变.结论 首次手术前全面、系统的影像学检查,合理掌握胆囊切除术的手术时机,术中辩清胆总管、肝总管、胆囊管三管之间的关系,术中仔细探查、规范切除胆囊是预防胆囊残余病变的关键. 相似文献
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目的探讨Barrett食管及反流性食管炎患者血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)检测的意义。方法采用ELISA法测定50例Barrett食管患者、30例反流性食管炎患者及30例健康对照者血清TNF-α、IL-2水平,进行比较。结果 Barrett食管组和反流性食管炎组,血清TNF-α含量较正常对照组升高;而IL-2含量较正常对照组低下,但差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论 Barrett食管及反流性食管炎患者TNF-α、IL-2检测的意义不大。 相似文献