生物人工肝支持系统研究新进展

体外人工肝支持系统 (人工肝 )是国外近年来发展起来的用以为肝衰竭患者提供体外肝功能支持的装置 ,这一技术的出现和发展为肝衰竭的治疗开辟了新途径。国外人工肝的研究开始于 2 0世纪 5 0年代 ,已有近 5 0年的历史。近 10余年来有关生物型人工肝 (ｂｉｏａｒｔｉｆｉｃｉａｌｌｉｖｅｒ ,ＢＡＬ)的研究成效最大 ,其基本原理是将体外培养增殖的肝细胞 (人肝细胞、哺乳动物肝细胞或肝细胞系 )置于体外循环装置 (生物反应器 )中 ,患者血液(血浆 )流过生物反应器时 ,通过容器内的纤维素半透膜或直接与肝细胞进行物质交换 ,从而达到人工肝支持…     

物理型人工肝治疗肝衰竭的研究近况

近年来,生物型人工肝逐渐成为体外人工肝支持系统(extracorporeal liver support sys tem,ELSS)的研究重点,但以解毒功能为主的物理型人工肝并未因此而退出历史舞台.相 反,随着材料与技术的不断进步,其血液净化效果不断提高,成为体外人工肝支持的重要方 法,可单独或与生物型人工肝联合组成混合型生物人工肝用于肝衰竭的临床治疗.现将近几年国外在物理型人工肝研究方面的主要进展作一综述.     

蛋白转导结构域介导乙型肝炎病毒聚合酶末端蛋白重链可变区抗体体外抑制病毒的复制

Objective To study a functional variable fragment of heavy chain(VH)antibody against the terminal protein(TP)region of hepatitis B virus(HBV)polymerase introduced by human immunodeficiency virus Tat protein transduction domain(TAT)and the inhibitive activity of TAT-VH on the replication of HBV in vitro.Methods The gene encoding TAT-VH was cloned into prokaryotic expression vector pET28a(+).Recombinant plasmid was transduced into E coli BL21(DE3)LysS,then the protein was expressed and purified.The purified TAT-VH fusion protein was added into HepG2.2.15 cell culture.The transduction efficiency was evaluated by indirect fluorescence assay(IFA).The cytotoxicity of TAT-VH was detected by Methabenzthiazuron(MTT)assay.HBV DNA level in HepG2.2.15 cell culture was measured using quantitative polymerase chain reaction(PCR).The data were analyzed by one-factor analysis of variance and t test.Results TAT-VH fusion protein was successfully expressed and purified.It was confirmed by IFA and MTT assay that TAT-VH was introduced into HepG2.2.15 cells and the cell growth was not affected.The level of HBV DNA in supernatant of HeDG2.2.15 cell culture with 5 000 nmol/L TAT-VH was(1.211±0.132)lg copy/mL,which was significantly lower than control group[(5.325±0.041)lg copy/mL,t=72.91,P＜0.05].Meanwhile,the level of intracellular HBV DNA was(3.521±0.411)lg copy/mL,which was significantly lower than control group[(8.532±0.132)lg copy/mL.t=28.41,P＜0.05].Conclusion The HBV replication is inhibited by anti-TP TAT-VH antibodies in vitro,which provides valuable experimemal basis for developing therapy of HBV infection with intracellular antibody.     

重庆地区急性肝衰竭病因和结局分析

目的了解重庆地区急性肝衰竭（acute liver failure,ALF）的病因和结局,评价英国皇家学院（King’s College Hospital,KCH）标准和终末期肝病模型（modelforend-stage liver disease,MELD）评分对其结局的判断价值。方法回顾性分析第三军医大学西南医院1999年12月-2008年4月国际标准化比值≥1．5,且伴有肝性脑病的ALF住院患者的病因与结局,用KCH标准和MELD评分预测患者的结局。结果共323例符合标准,纳入研究。270例（83．6％）病因为HBV感染,22例（6．8％）病因不明,16例（5．0％）为药物引起,15例（4．6％）由其他原因引起。24例（7．4％）失访。获随访的299例中,240例（80．3％）死亡,59例（19．7％）自然康复。KCH标准预测ALF患者死亡或存活的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和正确率分别为74．2％、64．4％、89．4％、38．0％和72．2％;MELD评分预测AIJF患者死亡或存活的上述指标分别为82．1％、61．0％、89．5％、45．6％和77．9％。结论重庆地区AIF的主要病因为HBV感染,KCH标准和MELD评分预测患者结局的阳性预测值较高,MELD评分的预测正确率高于KCH标准。     

复方甘草酸苷对重型肝炎的治疗作用及机制研究

目的 观察复方甘草酸苷对于重型肝炎的治疗作用并探讨其作用机制.方法 在综合支持疗法的基础上加用复方甘草酸苷注射液治疗重型肝炎患者30例,对照组仅采用相同的综合支持疗法,动态观察2组患者病死率、肝功能指标、血浆内毒素及多种炎性因子水平.结果 治疗第3周末,治疗组病死率为26.7%(8/30),对照组病死率为43.3%(13/30);治疗过程中治疗组患者血清ALT及AST水平显著低于对照组(P<0.01);治疗第3周末,治疗组血清总胆红素水平及血浆凝血酶原时间均值显著低于对照组(P<0.05);治疗后各时相点治疗组TNF-α水平均显著低于对照组(P<0.01);治疗后第2、3周,治疗组患者血浆内毒素及IL-6水平显著低于对照组(P<0.01).结论 复方甘草酸苷用于治疗重型肝炎,可促进肝功能恢复,可能有助于降低病死率,其机制与降低患者血浆内毒素及细胞因子所致的继发性肝损伤有关.     

胆心综合征外科诊疗技术在临床中的应用

目的回顾性分析42例胆心综合征的外科治疗。方法对42例胆心综合征患者行急诊或择期手术,其中因胆总管结石行胆囊切除＋胆总管探查＋“T”管引流术3例。结果手术结果证实,胆囊结石并发慢性胆囊炎21例,并发急性胆囊炎3例,其中并发胆总管结石3例。平均住院时间9．2d,42例患者均顺利完成手术。术后40例症状消失,复查心电图正常;2例术后仍有偶发室早,含服心律平3d后消失,复查心电图正常。结论术后胆道症状缓解,心电图改变恢复正常是诊断胆心综合征的可靠依据,值得在临床中推广应用。     

Mirizzi综合征17例的诊治分析

目的：探讨Mirizzi综合征的诊断、治疗在不同病例中的运用,更好的了解Mirizzi综合征诊治方法。方法：Mirizzi综合征17例术前主要以B超、CTERCP、MRCP等检查手段进行筛查,以术中结果为最终诊断,针对不同的病例选用不同手术治疗方式。结果：Mirizzi综合征患者17例,按Csendes分型法分为Ⅰ型10例,Ⅱ型4例,Ⅲ型2例,Ⅳ型1例。均行手术治疗,患者住院时间最短5天,最长2个月,平均15天。全组无手术死亡。术后随访6个月～10年,3例失访,2例因其他疾病死亡,2例胆道再发结石手术治愈,其余均健康生存。结论：Mirizzi综合征,需借助多种影像学技术,选用适合不同个体的诊断和治疗手段,可减少术中胆道损伤的发生率．     

严重急性呼吸综合征患者肺组织中S基因病毒准种特性的初步研究

严重急性呼吸综合征(SARS)病原体是一种与冠状病毒(coronaviruses)类似的新的正链 RNA 病毒,基因组全长约为30 kb,包括复制酶 A、复制酶 B、S、E、M 基因编码区和14个目前尚未清楚功能的开放阅读框。SARS 病毒的变异率估计为每天(8.26×10~(-6)±2.16×10~(-6))/nt,与普通RNA 病毒类似。SARS 病毒感染呈很短暂的急性自限性过程,变异株在患者体内能否积累形成准种,所形成准种的异质性如何?有关研究目前报道还不多,为此我们采用构象敏感凝胶电泳(CSGE)及核酸序列分析的方法初步检测了1例患者肺组织中 SARS 病毒准种的复杂性及差异性,结果报道如下。     

阿德福韦酯治疗拉米夫定耐药慢性乙型肝炎的临床研究

目的研究阿德福韦酯片对拉米夫定耐药慢性乙型肝炎患者的疗效和安全性。方法采用多中心、随机，双盲双模拟、拉米夫定对照的临床试验，选择拉米夫定耐药的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者209例，按1：1的比例随机分为阿德福韦酯组105例，拉米夫定组104例。完成24周和48周治疗时，检测血清HBV DNA水平、乙型肝炎病毒血清学标志物及肝功能变化。结果治疗24周时阿德福韦酯组血清HBV DNA水平，平均下降2．40log10，病毒应答率为59．0％，丙氨酸氨基转移酶（ALT）复常率为54．3％，均显著高于拉米夫定组；治疗48周时阿德福韦酯组血清HBV DNA水平，平均下降2．71log10病毒应答率为61．9％，ALT复常率为54．3％，显著优于拉米夫定组；阿德福韦酯组治疗后血清HBeAg阴转率、HBeAg血清转换率及不良事件发生率与拉米夫定组相比，差异无统计学意义。未发生与研究药物相关的严重不良反应。结论阿德福韦酯片治疗拉米夫定耐药慢性乙型肝炎，可在病毒学及生物化学方面取得较好疗效，且安全性良好。     

慢性重型乙型肝炎预后影响因素分析及拉米夫定抗病毒治疗对患者生存的影响

目的探讨慢性重型乙型肝炎预后影响因素及应用拉米夫定（LAM）抗病毒治疗对患者生存的影响。方法选择经LAM治疗的810例慢性巫型乙型肝炎患者临床指标和随访资料,用Cox比例风险模型对预后因素进行分析,并比较抗病毒治疗对患者近期临床指标和远期生存的影响。结果除年龄、总胆红素、凝血酶原时间、国际标准化比率（INR）、白细胞和肌酐外,血清HBVDNA和钠水平是影响患者预后的重要因素,其风险比（RR）分别为2．347和0．023。早期和晚期抗病毒治疗组患者中位生存时间分别54d和36d,3个月的中位生存率分别为41．6％和18．3％（X^2=153．230,P〈0．001）。结论血清HBVDNA和钠水平是影响生存的重要因素;尽早抗病毒治疗和纠正低钠血症可能改善慢性重型乙型肝炎患者的生存。