利用RNAi技术抑制结肠癌NRF2基因表达

目的构建RNA干扰真核表达载体pSUPER-NRF2,并在结肠癌细胞中进行表达,验证NRF2基因表达是否受到抑制。方法设计特异性针对NRF2基因的寡核苷酸序列及相应的对照序列,分别构建重组载体并转染人结肠癌Caco-2细胞。同时转染pEGFP-N1质粒,通过荧光显微镜观察及流式细胞仪检测绿色荧光来监测转染效率,共转染pEGFP-N1 48 h后G418筛选稳定表达的细胞。利用RT-PCR和W estern b lot检测瞬时及稳定转染细胞NRF2基因的表达。结果成功构建RNA i真核表达载体。转染pEGFP-N1后48 h达转染效率高峰。瞬时及稳定转染pSUPER-NRF2-A2、B2重组质粒NRF2 mRNA的表达无差异;转染48 h后,pSUPER-NRF2-A1、B1可显著抑制NRF2 mRNA的表达;pSUPER-NRF2-B1稳定转染后,NRF2 mRNA的表达也显著降低。瞬时和稳定筛选后NRF2蛋白表达亦显著降低。结论成功构建了NRF2的RNA i表达载体,可有效抑制靶基因表达,共转染带有筛选标记的pEGFP-N1质粒,筛选可获得低表达NRF2的稳定克隆,为进一步研究NRF2在结肠癌发生、发展中的作用提供了重要的实验材料。     

男性警察个性特征分析

男性警察个性特征分析海军杭州疗养院王强高万忠姚继红朱强本文对上海市嘉定区的５４名健康疗养的男性警察进行了修订卡氏十六种人格因素（１６ＰＦ）测验，了解健康男性警察群体的个性特征，为特群心理卫生咨询服务提供参考依据。对象与方法对象来我院健康疗养的男性警察...     

SD大鼠肝细胞、Kupffer分离与培养/共同培养的实验研究

目的 建立稳定高效分离SD大鼠肝细胞与Kupffer细胞的实验流程,研究SD大鼠Kupffer细胞与肝实质细胞共同培养Kupffer细胞对肝实质细胞生长、形态功能的影响,为体外原代培养肝细胞的应用及进行相关研究提供参考数据.方法 (1)原位2步Ⅳ型胶原灌注法消化SD大鼠的肝脏;(2)低速离心法分离肝实质细胞;(3)Percoll液密度梯度离心法分离肝Kupffer细胞;(4)单独培养肝实质细胞;以61比例贴壁共培养肝实质细胞与Kupffer细胞;(5)光镜分别观察单独培养与共同培养情况下肝实质细胞的生存和形态;(6)全自动生化仪检测单独与共同培养情况下培养上清白蛋白和糖水平并进行比较.结果 每只大鼠可分离的肝细胞产量平均为(2.03±0.26)×108,细胞活力为88%～95%,平均(91.7±2.11)%.Kupffer细胞产量平均为(3.19±0.20)×107,纯度为85%～92%.平均(88.5±1.83)%.192 h原代贴壁培养观察,单独培养组肝细胞的生长、增殖迅速,并向正常肝细胞的形态演变.2周后细胞开始死亡,培养至21 d时细胞全部死亡.结论 (1)通过本实验研究成功地建立了以肝下腔静脉为流人道的Ⅳ型胶原酶二步灌流法分离肝实质细胞以及联合Pereoll液密度梯度离心法分离Kupffer细胞的实验室操作程序.该操作程序稳定高效实用.(2)按61的比例在体外进行肝实质细胞与Kupffer细胞192 h贴壁共同培养实验,实验结果提示,肝实质细胞和Kuffer细胞在适宜的培养条件下可进行共培养;这两种细胞简单的同步贴壁共同培养,肝细胞的生长、白蛋白合成功能和糖代谢会受到影响,提示在共培养体系中,要实现肝实质细胞租Kupffer细胞良好生长和两者功能的协调发挥,尚需进一步建立更适宜的共同培养系统.     

健康管理对糖尿病慢性并发症发生的影响

随着我国社会经济发展水平的提高,糖尿病发病率也呈上升趋势,严重威胁人民群众的生活质量和生命健康〔1〕。糖尿病及并发症的发生、发展与人的生活行为方式密切相关,对糖尿病患者生活行为中的危险因素进行有效干预,是糖尿病现代综合治疗的关键。笔者通过健康管理的形式对糖尿病患者进行了干预对照研究,以探讨控制糖尿病慢性并发症的有效方法。     

医疗卫生监督量化分级管理的作用与不足

为了建立长效监督管理机制，规范医疗机构的准入和执业行为，更好地为当地群众提供安全优质的医疗卫生服务。2006年浙江省在余姚市和常山县对中小医疗机构进行了卫生监督量化分级管理试点，量化分级管理标准采用危险性评估原则评定，并对不同等级的医疗机构进行不同频率的监督来进行管理。     

补阳还五汤加减结合牵引按摩治疗颈椎病疗效观察

为了探讨补阳还五汤加减结合牵引按摩治疗颈椎病的效果，对1999—2006年来本院就诊的96例神经根型、椎动脉型、交感神经型颈椎病病人进行治疗和随访，就病人的一般状态、疼痛、联带症状等因素进行分析，对治疗结果进行详细的报道。     

军队现役干部疗养需求现状

目的：了解现役团以上干部的疗养需求,方法：对海军某基地现役团以上61名干部的疗养意愿进行调查,结果：现役团以上干部的疗养意愿十分强烈,对个人的健康状况有不同程度的信心不足,结论：上级有关部门可考虑在不影响工作的前提下,充分增加现役团以上干扰的疗养安排,这对增强部队战斗力,增加凝聚力必将起到积极的作用。     

联合检测AFP、CA19-9、γ-GT、ALP以提高肝癌诊断及鉴别诊断价值

目的探索三种血清肿瘤标志物对肝癌的诊断及临床意义,提高对原发性肝癌检测的敏感性。方法应用放射免疫法检测AFP、CA19-9、速率法检测ALP、γ-GT。测定原发性肝癌50例,肝硬化患者50例,其他恶性肿瘤患者50例,健康体检者60例血清。结果原发性肝癌各项指标与其他恶性肿瘤组、肝硬化组比较除ALP无差异(P>0.05)外,其他三项都有明显差异。原发性肝癌组单项AFP、CA19-9、ALP、γ-GT阳性检出率分别是81%、78%、68%、79%。AFP、CA19-9、ALP、γ-GT诊断符合率分别是87%、68%、65%、70%。联合检测敏感性达95%,与单项AFP(81%)检测敏感性比较有显著性差异(P<0.01)。结论联合测定AFP、CA19-9、ALP、γ-GT可提高对肝癌的阳性诊断率。     

不同品系黄连产量和质量的研究

目的考察和比较湖北黄连GAP基地选育的3个不同品系黄连(大花叶、无光叶、小花叶)的产量和质量。方法采用田间随机区组设计,连续3年采集3个品系黄连根茎样品,分别以烘干法测定其质量,用紫外分光光度法和高压液相色谱法分别测定其总生物碱和盐酸小檗碱的量。结果在考察的3个品系药材样本中,各品系三年生黄连产量没有显著差异(P>0.05),在四年生和五年生黄连中,大花叶和无光叶品系产量均明显高于小花叶品系(P<0.05);在三年生、四年生、五年生黄连中,各品系总生物碱和盐酸小檗碱的量无明显差异(P>0.05)。结论大花叶和无光叶品系的黄连产量高、质量合格,可作为黄连规范化种植的种子基原。