许旺细胞源神经营养因子对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的 了解许旺细胞源神经营养因子对神经损伤所致脊髓前角运动神经元死亡的保护作用。方法 选用出生３周ＳＤ鼠切断坐骨神经,神经近侧行旺细胞源神经营养因子或生理盐水,４周后观察腰４－５节段脊髓前角运动神经元的存活率和一氧化氮合成酶表达情况。结果术后４周,营养因子组神经元的存活率是９３．４％,生理盐一是５９．６％,两组一氧化氮合酶表达均未见增加。结论 许旺细胞源神经营养因子对员的俏髓前角运动神经元有明显     

周围神经损伤的显微外科治疗

周围神经损伤后,应采用显微外科技术进行缝合。注意掌握好手术指标与手术时机,在无张力下缝合,根据不同的部位选用外膜缝合法或束膜缝合法。若神经有缺损可采用延长神经或缩短缺损距离去解决。若所有办法都无法克服神经缺损,就只有神经移植和神经移位。近年有采用神经延长术、神经植入术和神经端侧缝合术。     

猕猴去细胞同种异体神经体内移植的组织学观察

目的观察去细胞同种异体神经体内移植后组织形态学改变,寻找合适的人工神经支架材料。方法共使用成年猕猴9只,随机取其中的6只,培养自体Scs,应用已经制备好的去细胞神经为支架材料,体外构建组织工程化周围神经移植体修复猕猴尺神经40mm缺损。分实验组、空白组、正常对照组3组。术后5个月取材,观察大体形态、HE染色、免疫组织化学染色及组织形态学改变。结果3组移植物表面均有不同程度的血管化,HE染色均有细胞核和髓鞘的蓝染成份出现,NF免疫组织化学染色后,均有淡黄色神经微丝出现。实验组、正常对照组效果相似,它们均优于空白组、实验组,正常对照组再生神经纤维的数量差异均无统计学意义（P〉0．05）。但在实验组与空白组间的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论去细胞同种异体神经具有良好的生物相容性和促进神经再生能力,是最具应用前景的神经修复材料之一。     

大剂量尿激酶在断肢(指)再植溶栓治疗中的临床应用

目的 研究在断肢(指)再植术中,静脉推注尿激酶防治血管危象的效果。方法 1999年9月~2003年10月,对158例断肢(指)再植术中血管缝接后,静推尿激酶60万U;术后小剂量维持用药,每12h用20万U;术后出现血管危象时,用大剂量100万~150万U尿激酶治疗。用药前后监测D-二聚体、纤维蛋白原、血红蛋白、血小板。结果 158例再植术后未出现血管危象117例,有效率74.1%。大剂量尿激酶治疗术后41例血管危象获得解除者37例,仅4例(1例断腕,3例断指)需再次探查,有效率达90.2%。以上结果均高于相关报道。结论 在再植术中用中剂量尿激酶溶栓,术后小剂量间隔用药是可行的,可防止血栓形成;一次性大剂量用药能解救术后出现的血管危象,避免再次手术探查,既安全又有效,具有临床实用价值。     

我与Harry J.Buncke教授的二三事

1973年,以Buncke.Kleinert为首的第一批美国再植代表团来华访问,第一站就是广州,我参与接待并不遗余力地向美国再植代表团介绍了中国显微外科的发展。这是我第一次与Buncke教授会面。访问期间,美国同道报道了游离皮瓣移植手术、断肢断指再植手术。     

小儿手部疤痕挛缩畸形的整复治疗(附86例报告)

小儿手部常因烧伤、电击伤、外伤感染等原因致成疤痕挛缩畸形。由于小儿处在生长发育阶段,疤痕挛缩不及时整复,将会给手的功能带来严重后果。我院自1961年以来,共收治此病86例(116只手),经手术整复治疗,效果良好,报告如下。     

雪旺细胞分泌的＞10kD蛋白分子支持脊髓前角神经元生存的初步报告

目的：探讨成年大鼠坐骨神经瓦勒变性期雪旺细胞（SC）促进周围神经再生的物质基础。方法：将215mlSC无血清条件培养液经PM10超滤浓缩器（分子筛）分离，获得分子量＜10kD（1dalton＝0．9921u）蛋白质滤过液及＞10kD蛋白质浓缩液，分别加入24孔、96孔培养板内脊髓前角神经元（SAHN）的培养液中，用倒置显微镜及MTT微量自动比色法进行神经营养活性观察。结果：在＞10kD蛋白分子影响下，SAHN在体外培养48小时仍存活良好，并伴有少部分SAHN长出短突起。MTT微量自动比色法进一步显示，＞10kD蛋白分子神经营养活性在统计学上显著高于＜10kD蛋白分子。结论：成年大鼠瓦勒变性期SC在无血清培养条件下仍能合成与分泌神经营养因子，其活性存在于＞10kD蛋白分子中。     

改良法体外诱导骨髓基质干细胞分化为类许旺细胞

目的　探讨一种较为有效的诱导方法将骨髓基质干细胞体外定向诱导分化为类许旺细胞。　方法　用Dezawa所述方法 (称为传统诱导法 )加以改良成将所有诱导剂一起联合半量间隔诱导两次的方法 (称为改良诱导法 ) ,诱导后的细胞从形态学、抗S 10 0和抗GFAP细胞免疫化学染色的阳性率、MTT细胞活性测定及流式细胞仪检测细胞DNA含量来比较此两种方法对细胞的综合作用。　结果　改良法诱导的细胞在形态上更具有许旺细胞的长梭形外观 ,抗S 10 0及抗 GFAP阳性率分别由5 8 1%和 60 3 %提高到 79 4%、81 2 % (P <0 0 5 ) ;MTT法细胞活性测定表明改良法对细胞活性影响小(P <0 0 1) ;流式细胞仪DNA含量测定显示S期DNA含量较高 (P <0 0 5 )。　结论　改良法体外诱导骨髓基质干细胞为类许旺细胞具有诱导效果更好 ,对细胞损害小的优越性。     

去细胞组织工程化神经支架的制备与形态学研究

目的 探讨如何去除人类长段粗大神经中的细胞。为构建人类组织工程化神经提供具有仿生结构的支架。方法 取4段长10cm、直径6mm人的胫神经，其中3段用3％三硝基甲苯和4％脱氧胆酸钠分别萃取1、2和3次，在萃取神经和未萃取神经的中段取材，行HE染色、砂罗铬花青染色和S—100免疫组化染色，在光镜和电镜下观察神经萃取前后形态学的变化。结果 用三硝基甲苯和脱氧胆酸钠萃取后，胫神经内的细胞消失，而纤维性支架结构与未经萃取的神经相仿，电镜下可见萃取后的神经由空的神经基底膜管和管之间的胶原纤维构成。随着萃取次数的增加，神经内残留的S—100蛋白显著减少，但反复萃取后神经的支架结构受破坏。结论 用三硝基甲苯和脱氧胆酸钠萃取2次可去除人体长段、粗大神经的细咆而保留完整的神经基底膜管和纤维支架结构，可能是制备具有仿生结构的人类组织工程化神经支架较为理想的方法。