胰腺癌关键基因CTTNBP2NL的筛选与功能验证

背景和目的：胰腺癌是一种常见的恶性消化系统疾病,其难以诊断和治愈。多数患者在确诊时已经错过了手术机会,寻找胰腺癌的早期诊断和治疗靶标具有重要意义。因此,本研究使用生物信息学筛选与胰腺癌进展相关的关键基因,并鉴定其影响肿瘤进展的具体作用机制。方法 选用GEO的GSE15471、GSE16515和GSE132956数据集,使用R语言“limma”包对3个GEO数据集进行差异基因分析,筛选胰腺癌中差异基因并用Venn图取交集。通过Metascape富集分析差异基因的功能,KMPLOT生存分析差异基因与患者预后生存的相关性,GEPIA数据库验证差异表达情况。选择其中关键基因,用Linkedomics分析其与胰腺癌临床病理信息的相关性,KEGG、GO富集分析其相互作用因子的生物学功能,用Cytoscape软件构建PPI网络并分析相关信号通路。随后在胰腺癌组织样本和细胞系中验证关键基因的表达,细胞功能实验验证其功能。结果 在3个GEO数据集中共筛选了177个基因上调,104个基因下调。Metascape富集分析发现上调基因富集在组织形态发生、血管形成、细胞运动和细胞增殖等过程,下调基因富集在代谢、胰腺分泌等过程。KMPLOT生存分析发现,差异基因中有6个因子（CTTNBP2NL、FGD6、ITGA2、KRT19、S100P、TMPRSS4）与胰腺癌明显相关,且都是胰腺癌患者生存的危险因素（均P<0.05）,GEPIA验证亦显示其均在胰腺癌中显著上调（均P<0.05）。其中,CTTNBP2NL在胰腺癌中的功能不明,故选择其为研究对象,其后,临床相关性分析显示CTTNBP2NL与胰腺癌TNM分型中的N分期明显相关,且随分期增加而上调。PPI分析得到17个与CTTNBP2NL互作蛋白,KEGG富集分析发现其相互蛋白与PI3K/Akt、TGF-β等通路相关,GO富集分析也发现其与细胞分离和凋亡相关。3个GEO数据芯片显示CTTNB2NL在胰腺癌中高表达,且在胰腺癌组织和细胞系,CTTNB2NL的mRNA和蛋白表达也均上调（均P<0.05）。细胞功能实验结果显示,沉默CTTNBP2NL后,胰腺癌细胞增殖,迁移和侵袭明显抑制,凋亡明显增加,同时,PI3K/Akt信号通路活性明显抑制（均P<0.05）。结论 CTTNBP2NL在胰腺癌中高表达,并与胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭密切相关,其作用机制可能与活化PI3K/Akt信号通路有关。CTTNBP2NL可以作为胰腺癌的潜在预后生物标志物和诊断靶点。     

哮喘临证辨治心法

支气管哮喘为临床常见病及疑难疾病,中医学将其归属＂哮病＂、＂喘证＂等范畴,认为本病的发生多为宿痰内伏于肺,复加外感、饮食、情志、劳倦等因素,以致痰阻气道、肺气上逆所致。该病反复发作,发作期大多存在着寒热错杂、虚实相兼的情况,因此很难将其单纯地归于某一孤立的证型。     

黄芪针穴位注射治疗慢乙肝临床研究与中医外治理论探讨

目的:临床观察慢乙肝口服拉米夫定联合黄芪针足三里穴位注射的临床疗效;并以此来探讨中医特色外治疗法的理论基础即"经气学说",为中西医结合治疗慢性肝病提供新的疗法和新的理论依据。方法:将2008年9月-2010年6月期间门诊及住院符合入组标准的慢性乙型肝炎患者70例,其中男43例,女27例,年龄18～58岁,随机分为治疗组和对照组,治疗组加用黄芪针穴位(足三里)注射,分别于治疗后第6个月和第12个月观察两组患者的乙肝三系定量(HBeAg转阴率、HBeAg/抗-HBe血清转换率)。结果:拉米夫定联合黄芪针穴位(足三里)注射与单用拉米夫定抗病毒治疗组比较,治疗组各时间点HBeAg转阴率、HBeAg/抗-HBe血清转换率显著高于对照组,P<0.05,有统计学意义。结论:拉米夫定联合黄芪针穴位(足三里)注射组较单用拉米夫定抗病毒治疗组更能显著提高患者HBeAg转阴率和HBeAg/抗-HBe血清转换率,且无明显不良反应。"经气学说"是慢性肝病中医外治法的理论基础,"脏腑-经络-皮部(腧穴)-经气-药气"是"经气学说"的精髓。     

难治性青光眼的治疗现状

难治性青光眼是眼科常见病,常见病因包括多次滤过手术失败、新生血管性青光眼、角膜移植术后继发性青光眼等。因其病因复杂,病情多变,治疗手段虽较多,但疗效较差,常因药物耐受、滤过术后瘢痕阻塞通道等导致手术失败。针对难治性青光眼的特征,一些改良术式及联合术式逐渐应用,如复合式小梁切除术、脉络膜上腔引流术、房角金环植入术及全视网膜光凝联合avastin球内注射等。就难治性青光眼的各种治疗方法、临床疗效及术后并发症等进行综述。     

IL-33／TLR4信号通路在A549细胞上皮间质转化中的作用

［摘要］目的: 探讨IL-33／TLR4信号通路在上皮来源的A549细胞上皮间质转化中的作用。方法: 培养A549细胞,用5 ng／mL的转化生长因子β1(TGF-β1)刺激A549细胞;在不同时间点(0,12,24,48 h)MTT法检测TGF-β1对A549细胞增殖的影响;荧光定量PCR方法检测IL-33信号通路中关键因子IL-33,Toll样受体4(TLR4)基因的表达改变;蛋白质印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏蛋白(E-cad)、磷酸化蛋白激酶(p-AKT)的动态表达。结果： TGF-β1刺激A549细胞后,细胞增殖无明显变化(P>0.05),IL-33 表达量先升高,后下降(P<0.05);E-钙黏蛋白表达量逐渐下降,α-SMA表达量逐渐升高,TLR4先升高后下降(P<0.05);p-AKT表达量逐渐升高(P<0.05)。结论： IL-33／TLR4信号通路在A549细胞的上皮间质转化中发挥了重要作用。     

人脐静脉血管内皮细胞在体移植替代猴角膜内皮细胞的形态学分析

目的　使用去除后弹力层的恒河猴自体角膜为细胞载体,将培养的人脐静脉血管内皮细胞（ｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｖｅｉｎｅｎ-ｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＨＵＶＥＣ）种植到角膜内表面,观察ＨＵＶＥＣ替代恒河猴角膜内皮细胞的功能情况以及ＨＵＶＥＣ在恒河猴眼内生长的情况。方法　取恒河猴６只随机分为３组:实验组（３只）、实验对照组（２只）、空白对照组（１只）。实验组:用离心沉淀法将培养的ＨＵＶＥＣ移植到去除后弹力层的恒河猴自体角膜内表面,之后将自体角膜缝回植床;实验对照组:将撕除部分后弹力层的术眼角膜植片原位缝回植床;空白对照组:取下术眼角膜植片不做任何处理原位缝回植床。术后观察各组角膜植片透明情况;实验组及实验对照组于术后３０ｄ及６０ｄ、空白对照组于术后６０ｄ行术眼摘除,标本做病理切片、ＣＤ３４免疫组化及扫描电镜,观察房角结构及ＨＵＶＥＣ在角膜植片内表面形态分布。结果　实验组角膜植片维持了一定的厚度和透明性,而实验对照组角膜植片发生严重大泡性改变。病理切片示实验组角膜内表面可见一层细胞生长,ＣＤ３４染色阳性,提示为血管内皮细胞;实验对照组角膜内表面未见任何细胞生长;空白对照组角膜植片保留完整后弹力层及内皮细胞层。扫描电镜示实验组有ＨＵＶＥＣ单层在角膜内表面生长但有大量白细胞聚集及少量细胞碎片嵌顿于小梁网;实验对照组角膜内表面残留胶原纤维样物质,无细胞生长;空白对照组见完整六边形角膜内皮细胞层。结论　ＨＵＶＥＣ能够在撕除后弹力层的恒河猴角膜内表面生长并发挥一定的屏障作用,维持角膜的厚度和透明性,但会产生较重的排斥反应。     

内镜下静脉曲张套扎联合内镜下静脉曲张硬化术治疗食管静脉曲张出血的临床研究

目的 探讨内镜下静脉曲张套扎(EVL)联合内镜下静脉曲张硬化术(EVS)治疗食管静脉曲张出血(EVB)的临床疗效和安全性.方法 90例EVB患者根据治疗方法分为EVL联合EVS治疗组(观察组,45例)和EVL治疗组(对照组,45例).观察两组首次治疗后静脉曲张消除情况、达到静脉曲张消除所需时间、消除所需治疗次数、再出血、静脉曲张复发、并发症及预后等.结果 观察组静脉曲张消除率为97.8％(44/45),对照组为93.3％(42/45),两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).观察组首次治疗后静脉曲张消除率明显高于对照组,达到静脉曲张消除所需时间和消除所需治疗次数均显著低于对照组[71.1％(32/45)比48.9％(22/45)、(17.24±5.65)d比(36.01±11.81)d、(1.42±0.47)次比(1.87±0.61)次,P＜ 0.05或＜0.01].观察组早发再出血率、迟发再出血率、静脉曲张复发率分别为4.4％(2/45)、6.7％(3/45)、2.2％ (1/45),显著低于对照组的17.8％(8/45)、22.2％(10/45)、22.2％(10/45),差异有统计学意义(P＜0.05).观察组并发症发生率为11.1％(5/45),显著低于对照组的42.2％(19/45)(P＜ 0.01).结论 EVL联合EVS可使EVB患者快速止血,并能预防再出血.     

甲泼尼龙联合环磷酰胺冲击治疗皮肌炎合并肺间质纤维化的护理

[目的]总结甲泼尼龙联合环磷酰胺冲击治疗皮肌炎合并肺间质纤维化的护理。[方法]对23例皮肌炎合并肺间质纤维化病人采用甲泼尼龙联合环磷酰胺冲击治疗,同时针对病情及药物副反应采取相应的护理。[结果]1例病人并发重症肺炎死亡,其余病人均顺利度过双冲击治疗。2例病人出现高血压,5例病人在冲击治疗后第10天～第14天出现中性粒细胞减少,8例出现恶心、呕吐、食欲不振等消化道反应,3例出现肝肾功能损害,1例出现心率加快,均有不同程度的脱发,均无出血性膀胱炎。[结论]加强皮肌炎合并肺间质纤维化病人行甲泼尼龙联合环磷酰胺冲击治疗的护理,可使病人顺利完成治疗,保证治疗效果。     

妊高征致双眼视网膜脱离伴脑梗死1例分析

笔者遇妊高征致双眼视网膜脱离伴脑梗死1例,分析如下。 1病历摘要 女,27岁。因双眼视力下降1周入院。入院前2周（孕38周）患者院外诊断妊娠高血压综合征（最高BP 170/130mm Hg）,1周前剖宫产终止妊娠后出现双眼视力下降。入院检查：视力左眼：数指/2m,右眼0.02,不能矫正。双眼球各方位运动正常,双眼睑略水肿,双球结膜水肿,角膜透明,瞳孔等大等园,光反射存在。     

陈洪宇从风论治糖尿病肾病经验浅析

<正>糖尿病肾病是糖尿病常见的微血管并发症和主要致死原因之一,是终末期肾病进行血液透析治疗的主要病因[1]。高血糖引起高滤过、高灌注导致肾脏血流动力学及血管内皮细胞改变,并发代谢紊乱、免疫系统活化、氧化应激、炎性细胞激活等,加重肾脏损伤[2]。陈洪宇系浙江省名中医,杭州市中医院肾病科主任中医师,在治疗糖尿病肾病方面有丰富的临床经验,笔者有幸随师临证,受益匪浅,浅述如下。1病因病机糖尿病肾病在中医古籍中多有记载,如隋·巢元方《诸病源候论》曰：“消渴其久病变,或发痈疽,或成水