表达载脂蛋白L1稳定细胞系的构建北大核心CSCD

目的利用Cumate系统实现APOL1基因在293T细胞内的可诱导稳定表达。方法通过查询NCBI数据库,设计APOL1基因编码区全长引物,克隆至Cumate慢病毒质粒。嘌呤霉素筛选包装慢病毒感染的293T细胞,阳性细胞扩大培养后用不同浓度的Cumate诱导表达,利用Real-time PCR和Western blot验证APOL1的表达情况。结果构建的293T细胞系可被Cumate诱导表达APOL1,且不同浓度的Cumate对细胞表达载脂蛋白L1有不同的影响。Real-time PCR和Western blot均证明在诱导48 h后,随着诱导剂浓度的增加,APOL1表达增多,在Cumate为50μg/ml时APOL1达到最高值。结论成功构建了可诱导表达APOL1基因的293T细胞系,为研究APOL1在EV71感染人体细胞过程中的作用机制提供了稳定的实验材料。     

儿童颞骨郎格罕细胞组织细胞增生症的CT诊断与鉴别诊断

目的总结7例儿童颞骨郎格罕组织细胞增生症（LCH）的CT影像特点,提高CT诊断准确性。方法回顾性分析我院2005年3月～2011年5月期间经手术病理证实的儿童颞骨LCH7例,术前均行颞骨螺旋cT轴位薄层平扫（层厚2-3mm）,3例行增强扫描,分析其cT表现。结果5例为颞骨单发病灶,2例颅骨有多发病灶;5例cT表现为颞骨乳突部的溶骨性骨质破坏．2例颞骨乳突部及颞骨鳞部的骨质破坏,1例听小骨骨质破坏,7例颞骨骨质破坏区均见软组织肿块形成,软组织肿块突入外耳道,3例侵入左侧中颅窝,2例侵入后颅窝,2例肿块侵及颞下窝,4例肿块累及鼓室及乳突窦,3例乙状窦前壁骨质破坏缺损;2例累及面神经管乳突段,1例见多发点状残留骨,7例均未见明显骨膜反应及骨质硬化。结论儿童颞骨LCH好发于颞骨乳突部,CT表现为溶骨性骨质破坏并局部软组织肿块形成,无骨质硬化及骨膜反应,软组织肿块强化明显,cT检查可以提高本病的诊断准确性。     

桂枝茯苓丸抑制大鼠子宫内膜异位症血管生成的作用及机制

目的：探讨桂枝茯苓丸抑制大鼠子宫内膜异位症血管生成的作用及机制。方法：采用自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,分为模型对照组（阴性对照）、桂枝茯苓丸低、高剂量组（4.13,8.26 g·kg^-1）、孕三烯酮组（阳性对照,0.23 g·kg^-1）。另设假手术对照组。连续给药28 d后处死大鼠,免疫组化法检测异位内膜中的增殖细胞核抗原（PCNA）和血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）的表达,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测腹腔液中血管内皮生长因子（VEGF）的水平,RT-qPCR检测异位内膜中VEGF和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达。结果：桂枝茯苓丸显著抑制异位内膜中PCNA,CD31的表达,降低腹腔液中VEGF的水平（P<0.05）以及异位病灶中VEGF、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的mRNA表达水平（P<0.01）。结论：桂枝茯苓丸显著抑制大鼠子宫内膜异位症的血管生成作用,其作用机制与抑制VEGF和HIF-1α的表达有关。     

平菇浸出液及其成分对结核杆菌生长的影响

目的研究以平菇浸出液及其分离的脂溶性和水溶性溶液代替蒸馏水制作改良罗氏培养基,对结核杆菌生长的影响。方法分别以平菇浸出液及其分离的脂溶性和水溶性溶液代替蒸馏水制作改良罗氏培养基,罗氏培养基作为对照,培养卡介苗中的结核杆菌。结果结核杆菌在平菇液罗氏培养基的生长情况最好,其次是水溶性平菇液罗氏培养基,在罗氏培养基和脂溶性平菇液罗氏培养基上的生长情况相对较差,而后者更差一些。结论单独加入平菇分离液中的脂溶性萃取液或非脂溶性萃取液对结核杆菌的生长均有一定的促进作用,但并不明显,两者只有按适当的比例混合时才能发挥协同作用,促进结核杆菌的生长。     

一种可用于多DNA片段连接的新SOE-PCR方法

目的通过对重叠延伸PCR技术的改进,建立一种可用于多DNA片段连接的SOE-PCR方法。方法扩增获得相互重叠的1.8、1.1、1.3kb的短片段,以之作为亚片段模板。在SOE-PCR反应体系中加入不同数量用于重叠的亚片段模板及延伸所得目的长片段扩增所需的外引物,同时加入了稀释100倍的内引物,使得亚片段模板在扩增过程中能动态达到最佳重叠延伸浓度。结果获得了特异性强、丰度高的两段连接产物,与原有的SOE-PCR方法相比,大大减小了反应的非特异性条带扩增,产物丰度也优于传统的扩增方法。采用同样方法尝试了单管反应对三个片段进行连接,获得了总长度为4.2kb的长片段,且实验重复性、特异性好。结论本研究以相互重叠的多个短片段为模板,实现多片段的连接和扩增,可降低受模板浓度条件的影响的实验操作难度。多片段连接时减少了操作步骤和突变几率,可广泛用于多DNA片段连接操作。     

脑卒中患者心理护理分析

目的探讨对脑血管病患者的心理护理干预。方法对我院2008年2月至2012年10月32例脑卒中患者的心理护理干预总结分析。结果患者对护理服务的满意度明显提高,融洽了医患关系,促进了患者的康复信心。结论心理护理是一种科学的护理干预方法,有利于护理工作全面、协调,更加贴近患者、贴近临床,促进患者早日康复。     

寨卡病毒检测技术研究进展

  目的  分析亚洲型寨卡病毒基因组序列特征,建立亚洲型寨卡病毒的荧光定量PCR检测技术。  方法  通过分析亚洲型寨卡病毒全基因组核酸序列,选取亚洲型寨卡病毒的保守区设计引物和TaqMan 探针,建立标准曲线并检测其特异性与敏感性。  结果  荧光定量PCR测试结果表明所设计的引物和探针特异性良好,对非洲型寨卡病毒、I～Ⅳ型登革病毒和丙型肝炎病毒核酸检测无交叉反应;同时灵敏度较高,可达3.415 × 10⁰ copies/μL;构建了标准曲线,回归方程为Y = – 3.227 3logX + 38.79,相关系数R² = 1,扩增效率E = 102 %。  结论  建立了一种检测亚洲型寨卡病毒的荧光定量PCR技术,可用于临床亚洲型寨卡病毒感染患者的病原分型、早期诊断及预防。     

远程术中快速病理会诊200例的实践与体会北大核心CSCD

目前,远程病理诊断主要针对疑难病例开展,有助于缓解基层百姓日益增长的医疗需求与城乡医疗资源结构巨大反差之间的矛盾,也有助于充分利用全社会医疗卫生资源,极大方便边远地区群众问诊寻医. 术中快速病理诊断可以直接决定患者手术方案,而且基层病理医师快速病理诊断经验有限,均导致基层病理医师对远程术中快速会诊的需求迫切. 远程术中快速病理诊断可实现上级医院与基层病理医师面对面讨论,提升基层病理医师的术中快速诊断能力,可以实现各地病理资源、专家技术和经验的共享. 2015年5月中南大学湘雅医院病理科试点向株洲市三三一医院和株洲市人民医院提供200例远程术中快速病理诊断服务,我们在总结会诊实践的基础上探讨远程术中快速病理诊断的质控措施.