胰腺癌组织中Slug、VEGF表达与MVD的关系及其临床意义

目的 研究锌指转录因子Slug、血管内皮生长因子VEGF在人胰腺癌组织中的表达及其与微血管密度MVD值之间及其与胰腺癌临床病理特征的相关性.方法 应用免疫组化SP法检测20组胰腺癌组织及正常胰腺组织中Slug、VEGF的表达情况,计数MVD,并分析三者之间及其与肿瘤临床病理特征之间的相关性.结果 Slug、VEGF及MVD在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织,差异具有统计学意义.三者之间的表达均成正相关,VEGF表达与肿瘤大小及肿瘤局部浸润有关（P＜0.05）,Slug表达与局部浸润有关（P＜0.05）,MVD值与肿瘤大小和局部浸润有关（P＜0.05）.结论 Slug、VEGF在胰腺癌组织中的表达高于正常胰腺组织,并且与肿瘤血管的形成有相关性.     

Stat3 mRNA靶向MicroRNA重组质粒的构建及其在HepG2肝癌细胞系中的表达

目的构建并筛选靶向信号转导和转录激活因子3（Stat3mRNA）的微小RNA（MicroRNA）表达质粒。观察其在肝癌细胞系HepG2中对Stat3表达的影响。方法针对人Stat3mRNA设计3条MicroRNA序列,经退火成互补双链,将双链DNA插入线性质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR质粒中,分别构建重组表达质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-1、2、3等3组质粒,并测序鉴定。脂质体法转染重组质粒至人肝癌HepG2细胞中,观察转染效果。RT-PCR和Western blot分别检测Stat3mRNA和蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖能力。结果成功构建靶向Stat3的MicroRNA重组质粒,经测序证实插入的DNA片段的序列与设计序列完全一致,转染人肝癌HepG2细胞后,荧光显微镜下可观察到带有绿色荧光的HepG2细胞。流式细胞仪检测3组质粒的转染效率分别为：76%、73%和63%。RT-PCR分析pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-1、2、3的抑制率分别为：73.5%、47.2%和39.6%,下调Stat3蛋白的比例分别为：89.1%、71.6%、67.3%。其中pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-1的下调效应最明显。MiR-1质粒转染组的细胞凋亡率升高,增殖受抑制,与阴性对照质粒组和未转染组比较,差异均有高度统计学意义（均P〈0.01）。结论成功构建了靶向Stat3的MicroRNA表达质粒,其对肝癌HepG2细胞Stat3的表达及增殖有显著抑制。     

原位杂交法检测太行山猕猴食管癌的人乳头瘤病毒

乳头瘤病毒(简称PV)是一组DNA致瘤病毒,可感染人和高等动物的鳞状上皮,引起疣状增生性病变。运用分子生物学技术,目前已发现人类许多器官发生人乳头瘤病毒(简称HPV)感染。周健等用分子杂交技术证实了人食管是HPV感染的多发部位之一,并在食管癌高发区的人食管癌标本中检测到HPV。最近,在食管癌高发区太行山生长的太行山猕猴发现两例自发性食管癌。猕猴的食管癌是否也与HPV感染有关,国内外尚未见报道。我们用人乳头瘤病毒探针对这两例太行山猕猴自发食管鳞状细胞癌标本进行了检测。     

术后早期炎症性肠梗阻的临床诊治

目的 探讨术后早期炎症性肠梗阻的临床特点及诊治方法.方法 回顾性分析30例术后早期炎症性肠梗阻病例的临床资料.结果 30例病人在腹部手术后5～10d发病,经胃肠减压、营养支持及生长抑素等保守治疗治愈.无肠瘘、腹膜炎或肠坏死等并发症发生.结论 术后早期炎症性肠梗阻多是腹腔内无菌性炎症所致的动力性和机械性并存的肠梗阻.根据临床特点诊断并非很困难,宜保守治疗,禁忌手术.     

太行山猕猴部分血清生化值的测定

关于猕猴的血液生化参数,国内已有诸多报道,但太行山猕猴血液生化参数还未见过报告。为此我们测定了太行山猕猴的部分血清生化值,为了使测定更为客观,我们运用Grubbs准则对取得的测定值进行了坏值分析处理,得出正常值。     

THE ESOPHAGEAL CARCINOMA OF RHESUS MONKEYS FROM TAIHANG MOUNTAIN AREA OF HIGH MORBIDITY OF ESOPHAGEAL CARCINOMA

Taihang Mountain area, a high Incidence area of human esophageal cancer in Northern China. 124 Rhesus monkeys (Macacs Mulatta) were caught in the area in January 1989. Among them, two monkeys died of esophageal carcinoma in 1990. Case 1, a male monkey about 6. 5 yean old and weighing 14. 5 kg, had symptoms of salivation, vomiting and dysphagia in Fabruary 1990. The symptoms became gradually more serious and died in march 1990. Postmortem examination revealed a huge tumor in the distal segment of esophagus, causing severe structure of the organ. The tumor was classified as medullary type and histopathologically diagnosed as a well differentiated squamous cell carcinoma, with metastases to mediastinum and lymph nodes of right gastric group. Case 2, a female monkey ablut 11-year-old and weighing 10. 0 kg, showed loss of appetite, tiredness, somnolence, caughing and vomiting in September and died in December 1990. Autopsy revealed an annular tumor involving the whole clcumference of lower portion of the eso     

PUMA基因转染胰腺癌AsPC-1细胞增强对5-FU致凋亡的敏感性

目的: 探讨PUMA基因转染是否增强胰腺癌AsPC1细胞对5FU致凋亡的敏感性。方法: 采用脂质体转染法将PUMApCEP4和空载体pCEP4质粒转染入胰腺癌AsPC1细胞中,G418筛选阳性细胞。将系列浓度（0.01～100 μmol/L）的5FU 分别作用于AsPC1、AsPC1/PUMA和AsPC1/pCEP4细胞72 h,MTT法测定各组细胞的存活率并计算IC50, FCM、断裂DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blotting检测各组细胞PUMA蛋白表达的变化。〖HT5W〗结果: 〖HT5"SS〗AsPC1、AsPC1/PUMA和AsPC1/pCEP4细胞的5FU IC50分别为(12±1.9)、（1.6±04）和(10.4±1.6)μmol/L,AsPC1/PUMA细胞对5FU作用的敏感性增加了7.5倍。5FU以剂量依赖方式诱导AsPC1细胞凋亡,但对AsPC1/PUMA细胞所诱导的凋亡比AsPC1和AsPC1/pCEP4 更明显。低浓度5FU(0.1 μmol/L)轻微引起AsPC1/pCEP4\[(1.14±0.28)%\]和AsPC1细胞凋亡\[（0.9±0.23)%\],但能诱导AsPC1/PUMA细胞明显凋亡\[（6.47±1.42)%\];高浓度5FU (1 μmol/L)诱导各组细胞凋亡,但AsPC1/PUMA细胞凋亡率\[（34.54±9.36)%\]明显高于AsPC1\[（12.8±3.74)%\]和AsPC1/pCEP4细胞\[（15.8±5.15)%\],差异均有统计学意义（P<0.01）;FCM、断裂DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测显示相同的结果。PUMA蛋白在AsPC1/PUMA细胞中的表达明显高于AsPC1和AsPC1/pCEP4细胞。结论:PUMA基因转染明显地增强了胰腺癌AsPC1细胞对5FU致凋亡作用的敏感性。     

miRNA-375对胰腺癌细胞Panc-1增殖和凋亡的影响

  目的  探讨miRNA-375的外源性表达对人胰腺癌细胞Panc-1增殖和凋亡的影响。   方法  将miRNA-375表达质粒或对照质粒转染Panc-1细胞, qRT-PCR方法检测miRNA-375在转染细胞中的表达水平, 细胞计数法、流式细胞术分别检测外源性miRNA-375表达后Panc-1细胞增殖、凋亡和周期的变化情况。   结果  miRNA-375表达质粒组与对照组比较, 其miRNA-375表达诱导性升高, 细胞增殖受到抑制, 细胞凋亡率增加, 细胞周期阻滞于G₀~G₁期。   结论  在胰腺癌细胞Panc-1中增加miRNA-375的表达, 可抑制细胞增殖, 促进细胞凋亡和细胞周期阻滞, miRNA-375在胰腺癌细胞Panc-1中可能发挥潜在的抑癌基因作用。      

56例原发性腹膜后肿瘤诊治分析

目的 研究原发性腹膜后肿瘤(PRT)的临床特点、诊断和治疗方法.方法 回顾性分析经手术治疗的56例PRT患者的临床资料.其中恶性41例,良性15例.行根治性手术切除(根治组)37例,非根治性手术切除(非根治组)19例.结果 56例患者均获随访,随访时间为3～62个月,根治组最短复发时间为9个月,2年复发18例,复发率为48.6%;非根治组最短复发时间为2个月,2年复发15例,复发率为78.9%.两组患者术后存活时间均超过1年.结论 PRT治疗效果差,手术彻底性及肿瘤分化是影响预后的重要因素.     

诱骗受体3在胰腺癌组织中的表达及意义北大核心CSCD

目的探讨诱骗受体3(decoy receptor,DcR3)在胰腺癌组织中的表达及其与预后生存的相关性。方法通过免疫组织化学和ELISA分别检测组织和血清中DcR3蛋白的表达,并分析其与预后生存的关系。结果 DcR3阳性细胞染色定位于胞质中,胰腺癌组织中DcR3阳性率为50%(25/50),而非癌胰腺组织中DcR3阳性率为24%(12/50),两者差异有统计学意义(P<0.05)。术前胰腺癌患者血清中DcR3为(73.71±18.26)pg/ml,与胰腺囊腺瘤组(7.96±1.25)pg/ml相比,差异有统计学意义(P<0.01)。胰腺癌组术后DcR3水平(19.76±4.52)pg/ml明显下降,与术前相比,有统计学差异(P<0.01)。50例随访患者中位生存时间为27.4月。DcR3在血清中的表达水平与患者术后总体生存时间有关(P<0.05)。Cox回归分析显示与胰腺癌患者总体生存时间相关的指标有肿瘤大小、TNM分期、淋巴转移和血清中DcR3的表达水平。结论 (1)胰腺癌组织和血清中DcR3蛋白高表达;(2)胰腺癌患者血清中DcR3的水平将有助于肿瘤的临床诊断和预后判断。