胰胆管合流异常与肝外胆系癌的相关性探讨

目的　探讨胰胆管合流异常与肝外胆道系统癌（胆囊癌和肝外胆管癌）的相关性。 方法　回顾性分析2008年1月～2009年12月连续857例患者行磁共振胰胆管造影的临床及影像学资料,测量其胆胰汇合角度及共同管长度,确诊胰胆管合流异常67例。随机在790例不伴有胰胆管合流异常的病例中抽取78例为对照组,与67例胰胆管合流异常的病例行对照研究,分析胰胆管合流异常与肝外胆道系统癌的相关性。 结果　67例胰胆管合流异常的患者中发生胆系癌56.72%（38例),对照组中发生胆系癌 14.10% (11例),两组病例中胆系癌发生率存在显著性差异（χ2=22.27, P<0.05）。胰胆管合流异常并发胆系癌的病例中,胰胆管汇合类型对胆系癌的分化程度无显著影响（χ2=2.70, P>0.05）。 结论　胰胆管合流异常与肝外胆道系统癌发生有显著相关性,而胰胆管汇合类型对胆系癌的分化程度无显著影响。     

食管癌高发区太行山猕猴食管癌前病变的初步研究

太行山区是我国食管癌的高发区，在该地区捕获的124例猕猴(Macaca Mulata)中，于1990年相继发现2例食管癌，其症状及病理形态结构与人类食管高分化鳞癌相似，同时对90只不同性别，不同年龄的猕猴进行了细胞学检查，结果为：正常27例，占30％；轻增35例。占39％：重增118例，占20％；重增Ⅱ9例，占10％，     

人体椎骨松质骨力学参数实验研究

本文作了椎骨松质骨力学特性实验。首先建立了包括微机数据采集系统的实验系统。对314个人体胸椎,腰椎松质骨试件分别沿轴向,横向和矢向压缩做了破坏实验。测定了中国成人椎骨松质骨的强度、弹性模量,泊松比和密度等参数。对各类不同试件力学特性的差异进行了统计检验,并对各参数间的关系进行了回归分析。由实验和计算结果可以得出:椎骨松质骨轴向强度、弹性模量显著大于其正交方向的值,与轴向正交各方向的力学特性参数间无显著差导。整椎强度明显大于松质骨强度,皮质骨起着不同于松质骨的承载作用。松质骨强度、弹性模量,密度之间显著正相关。数据集中反映了中国人青壮年组椎骨力学参数的特点,实验结果为建立脊柱动力学模型及研究各类椎骨损伤提供了基础数据。     

RNA干扰Twist基因表达抑制HCC9402侵袭转移的实验研究

目的 探讨RNA干扰Twist基因表达对肝细胞癌细胞(HCC9402)转移的抑制作用.方法 用脂质体转染法将表达siPNA-Twist的真核表达载体pGenesil-1-Twist-siPNA(pTwist-siRNA)和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入HCC9402细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆.观察siRNA-Twist对Twist表达的沉默及对肝细胞癌细胞体外侵袭转移的抑制作用,采用RT-PCR技术检测不同处理组细胞中Twist mRNA的表达水平,Western-blot测定蛋白表达水平.建立不同组裸鼠原位肝细胞肝癌模型,观察Twist沉默对裸鼠原位肝细胞肝癌转移的抑制作用.结果 pTwist-siRNA组胞内Twist mRNA及Twist蛋白的表达被有效沉默.重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,pTwist-siENA组、空白对照组、pNeg-sigNA组穿透基底膜细胞数分别为(35±10)、(219±72)、(228±71)个/高倍镜(×200),前组明显低于后两组,差异分别有统计学意义(P<0.05).裸鼠体内实验表明.pTwist-siRNA组的肿瘤转移结节、肝脏转移结节、腹水明显减少.结论 RNA干扰Twist基因表达对肝细胞肝癌细胞侵袭转移有抑制作用,Twist可能成为肝细胞肝癌基因治疗的新靶点.     

miR-375在胰腺癌的表达及其临床意义

目的 探讨miR-375在胰腺癌的表达及其与临床病理特征的关系.方法 应用RT-PCR方法定量检测44例胰腺癌及其癌旁正常组织中miR-375.结果 胰腺癌组织中miR-375表达水平明显低于癌旁正常组织(P＜0.05);miR-375在胰腺癌组织中的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、分化程度均无相关性(P＞0.05),而与T分期、淋巴结转移、TNM分期密切相关(P＜0.01).结论 miR-375在胰腺癌中表达下调,可能与胰腺癌发生、发展及转移过程有关.     

靶向MMP-2基因的RNA干扰质粒表达载体的构建

目的 构建基质金属蛋白酶2(MMP-2)特异的RNA干扰(RNAi)质粒载体,用于探讨抑制MMP-2基因表达在抗胰腺癌侵袭转移中的意义.方法 根据GenBank中提供的MMP-2基因序列,设计能存体内转录小发央结构RNA(shRNA)的cDNA序列,合成该序列并将其连接到pGCsi-U6/Neo/GFP质粒,构建受控于人U6启动子的质粒表达载体.结果 PCR鉴定和测序鉴定显示构建的重组质粒pGCsi-MMP-2含有目的 基因序列.结论 靶向MMP-2基因的RNAi质粒表达载体被成功构建.     

EPAS1、VEGF在胰腺癌中表达及其相关性

目的 研究胰腺癌组织中缺氧诱导因子2(EPAS1/HIF-2α)、血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的表达及与临床病理特征之间的关系.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹Western blot、免疫组化SP法检测60例胰腺癌及相应正常胰腺组织中EPAS1、VEGF mRNA和蛋白的表达和分布,同时检测MVD作为判断血管生成的指标,分析其间的相关性以及与肿瘤临床病理特征之间的关系.结果 EPAS1、VEGF和MVD在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织,VEGF在mRNA和蛋白水平均增高(P＜0.01),但EPAS1只在蛋白水平增高(P＜0.01).此外,三者之间的表达具有显著相关性(P＜0.01).EPAS1和VEGF的阳性表达与胰腺癌的TNM 分期、肿瘤大小有关.结论 胰腺癌组织中EPAS1和VEGF呈过量表达,且EPAS1的表达与VEGF及MVD呈显著正相关.EPAS1可通过上调VEGF表达来促进胰腺癌血管生成从而在胰腺癌的发生、发展中起重要作用.     

siRNA沉默EPAS1基因对胰腺癌细胞凋亡和增殖的影响

目的 研究由2型重组腺相关病毒(rAAV2)介导的靶向缺氧诱导因子2(EPAS1/HIF-2)的小干扰RNA(siR-NA)对人胰腺癌PANC-1细胞凋亡和增殖的影响.方法 将人胰腺癌细胞株PANC-1分为实验组、阴性对照组(阴性组)和空白对照组(空白组),实验组和阴性组分别转染rAAV2-EPAS1-siRNA和rAAV2-EGFP病毒,空白组不转染病毒,进行常氧和缺氧培养.RT-PCR和Western blot检测EPAS1基因表达,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖能力.结果 在常氧和缺氧状态下,实验组细胞EPAS1 mRNA和蛋白表达受抑制,显著低于阴性组和空白组,差异均有高度统计学意义(p<0.001).在缺氧状态下,实验组细胞的凋亡率明显升高,增殖受抑制,与阴性组和空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 通过siRNA抑制缺氧状态下胰腺癌细胞中EPAS1基因表达,能诱导胰腺癌细胞凋亡,抑制胰腺癌细胞增殖.     

胰体尾切除术后24例并发症的危险因素分析

目的 分析影响胰体尾切除术后并发症发生的危险因素。方法 回顾性分析了78例行胰体尾切除术患者的临床资料,分析术后并发症的发生情况及其影响因素。结果术后24例(30.8%)患者出现术后并发症,其中死亡1例。术前空腹血糖水平、术中出血量和输血以及结扎主胰管与术后并发症的发生密切相关(P<0.05)。术前空腹血糖水平和结扎主胰管是胰体尾切除术后并发症发生的独立危险因素(P<0.05)。结论 为了降低胰体尾切除术后并发症的发生,应重视针对高危因素采取相应的预防措施。     

靶向人DcR3的microRNA表达载体的构建

诱骗受体3(decoy receptor,DcR3)属于肿瘤坏死因子受体(TNFR)超家族成员,是一种凋亡抑制蛋白[1].有研究发现,DcR3基因的表达与人类多种恶性肿瘤的发生、发展及肿瘤免疫逃逸密切相关[2-3].microRNA(miRNA)干扰技术以其高效、特异的优势,已经成为一种有效的基因沉默工具.我们前期的实验研究表明,DcR3基因在人胰腺癌组织和外周血中高表达,并抑制肿瘤细胞凋亡[4].本研究构建靶向DcR3基因的miRNA表达载体,为胰腺癌的基因治疗提供一个新的靶点.