5-氮-2''''-脱氧胞苷对RKO结肠癌细胞株maspin基因去甲基化的转录调节作用

目的探讨DNA5'CpG岛去甲基化对RKO结肠癌细胞株maspin基因的转录调控作用及对细胞株生长增殖的生物学影响,寻找抗癌治疗的新靶点。方法应用甲基化特异性PCR(methylationspecificPCR,MSP)检测RKO结肠癌细胞株maspin基因核心启动子区CpG岛甲基化情况;用特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-aza-CdR)作用结肠癌细胞株72h后,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测maspinmRNA表达,四唑盐(MTT)比色、流式细胞仪检测用药前后RKO细胞株生长存活率和细胞周期的变化。结果RKO结肠癌细胞株maspin基因核心启动子区存在CpG岛甲基化。与对照组相比,3组不同浓度5-aza-CdR作用后,maspin基因mRNA表达分别增加了10.89、16.91和23.97倍,明显抑制肿瘤细胞生长,阻滞细胞周期于G0/G1期,诱导细胞凋亡,凋亡率分别为5.17%、8.71%和11.23%。结论RKO结肠癌细胞株maspin基因5'端核心启动子甲基化可能是导致该基因表达沉默的主要原因;特异性甲基转移酶抑制剂5-aza-CdR能较好地逆转RKO细胞DNA异常甲基化,并有效地激活因高甲基化所致maspin基因沉默的再转录,诱导该基因表达,从而抑制肿瘤细胞生长,诱导细胞凋亡。     

腹腔镜微创术治疗老年直肠癌患者的疗效

消化道恶性肿瘤中,直肠癌发病率仅次于胃癌、食道癌,是大肠部位最常见的肿瘤.目前,对直肠癌的主要治疗方法为手术干预,近年来腹腔镜技术在直肠癌手术中的重要性日益凸显[1].本文探讨直肠癌患者行腹腔镜微创治疗的临床疗效. 1 资料与方法 1.1 临床资料纳入我院2008年3月至2012年3月收治的154例直肠癌患者,按随机数字表分为微创组94例及传统组60例,纳入研究对象在入院时积极行疾病相关辅助检查,争取早期明确诊断,制定患者个性化治疗计划.两组患者间临床资料(性别、年龄、病程、Dukes分级手术方式)比较见表1.     

奥沙利铂联合氟尿嘧啶与亚叶酸钙术前化疗诱导胃癌细胞早期凋亡的研究

观察奥沙利铂联合氟尿嘧啶、亚叶酸钙诱导胃癌细胞早期凋亡的效果。胃癌患者 17例 ,术前 1周应用奥沙利铂联合氟尿嘧啶、亚叶酸钙化疗 (治疗组 ) ,术中取胃癌组织 ,应用流式细胞术 (AV与PI双参数法 )检测其凋亡 ;并与 18例术前未化疗 (对照组 )的胃癌患者进行比较。术前化疗组胃癌细胞凋亡比例为 2 8 5 3 %明显高于术前未化疗组的 13 5 9%P <0 0 5。奥沙利铂联合氟尿嘧啶、亚叶酸钙化疗可通过促进胃癌细胞凋亡而发挥其抗胃癌作用     

血管密度与结直肠癌关系的研究

如何减少结直肠癌术后复发和转移,目前仍无有效的方法.我们对结直肠癌微血管密度的研究,旨在为开展抗结直肠癌血管形成治疗,减少术后复发和转移,以提高临床疗效.     

二氧化碳气腹对胃癌MKN-45细胞侵袭能力的影响

目的 探讨CO2气腹对人胃癌细胞在裸鼠体内侵袭能力的影响.方法 建立体外CO2气腹模型,实验组胃癌细胞暴露于CO2气腹2 h(压力分别设为9、12、15 mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa).对照组胃癌细胞普通培养,然后注入裸鼠腹腔(2×106个细胞/只),每组10只.4周后每组取5只处死,记录腹腔及各脏器成瘤情况,剩余裸鼠观察生存时间.结果 各组裸鼠腹腔种植成瘤率、不同脏器成瘤率差异均无统计学意义(P＞0.05).腹腔内成瘤数:对照组(26.40±5.59)个,9 mm Hg组(25.40±5.27)个,12 mm Hg组(25.00±5.43)个,15 mm Hg组(22.40±5.37)个,各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).裸鼠生存分析各组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 常用CO2气腹压力不会促使胃癌细胞裸鼠腹腔侵袭转移,不缩短被接种裸鼠的生存时间.     

CO2气腹对胃癌细胞SGC-7901裸鼠腹腔增殖和侵袭能力的影响

目的 通过体内模拟腹腔镜气腹环境,探讨CO2:气腹对裸鼠腹腔胃癌细胞增殖和侵袭转移能力的影响.方法 棵鼠随机分成3组:对照组(A组).行开腹探查;5 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)CO2气腹组(B组);8 mmHg CO2:气腹组(C组);每组9只.人胃癌细胞SGC-7901棵鼠腹腔注射后建立CO2气腹胃癌细胞裸鼠腹腔种植模型,气腹持续1 h.建模后每周秤体质量,观察各组裸鼠生长情况和腹腔成瘤情况.28 d后处死解部裸鼠,记录腹水量、腹腔各脏器、穿刺口和腹壁切口成瘤情况和肿瘤数,测量肿瘤最大径、总重量,并检测胃癌种植瘤组织中乙酰肝素酶(Hpa)mRNA的表达.结果 各组裸鼠成瘤率100%.各组裸鼠体质量、腹腔不同脏器成瘤率、腹水量差异均无统计学意义(P>0.05).肿瘤结节数:A组(7.4±2.5)个,B组(7.3±2.4)个,C组(7.5±2.1)个.肿瘤最大径:A组(7.0±2.2)mm,B组(6.9±2.0)nnn,C组(6.8±1.9)mm;肿瘤重量:A组(0.99±0.30)g.B组(0.87±0.20)g,C组(0.91±0.13)g.Hpa mRNA表达指数:A组0.41±0.07,B组0.45±0.06,C组0.43±0.09,各组间差异均无统计学意义(P>0.05).结论 在5 mmHg和8 mmHg气腹压力下,CO2:气腹不促进胃癌细胞裸鼠腹腔内增殖和侵袭转移,也未明显影响胃癌细胞成瘤组织Hpa mRNA的表达.     

缺氧诱导因子1α对CO2气腹环境下人胃癌细胞凋亡的影响

目的 通过体外模拟CO2气腹环境,构建沉默缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的RNAi表达载体,探讨HIF-1α对CO2气腹环境下人胃癌细胞MKN-45凋亡的影响及机制.方法 利用密闭培养箱模拟CO2气腹,气腹机维持培养箱内压力分别为0、5、10、15mm Hg.采用荧光定量RT-PCR方法和Western blot方法观察沉默HIF-1α前后MKN-45细胞HIF-1α mRNA和蛋白表达的变化;免疫细胞化学技术观察沉默HIF-1α前后细胞bcl-2/bax表达的变化;Annexin V-FITC/PI双标染色、流式细胞仪检测沉默HIF-1α前后细胞凋亡比例的变化.结果 沉默HIF-1α前15 mm Hg组细胞HIF-1αmRNA和蛋白表达(分别为1.51±0.04、4.44±0.30)均显著高于对照组(0.584±0.06、2.01±0.06)(P<0.01).沉默HIF-1α前15mmHg组细胞bcl-2/bax比值(0.77±0.05)较对照组(1.43±0.02)明显降低(P<0.05),细胞凋亡比例(11.60±2.11)较对照组(0.30±0.02)增加.而在沉默HI-1α后15 mm Hg组细胞HIF-1α mRNA(0.464±0.04)和蛋白表达(0.92±0.02)、bcl-2/bax比值(1.61±0.04)、细胞凋亡比例(0.4±0.03)与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05).结论 在CO2气腹环境压力为0、5、10mm Hg CO2时MKN-45细胞凋亡比例与对照组比较无差异,压力为15mm Hg时CO2气腹可促进胃癌细胞凋亡.HIF-1α可能为促进细胞凋亡的原因之一.     

腹腔镜与开腹直肠全系膜切除保肛治疗低位直肠癌的临床研究

目的探讨腹腔镜下直肠全系膜切除保肛治疗低位直肠癌的可行性和近期临床疗效。方法将我院2002年6月~2005年6月同期收治的低位或超低位直肠癌病人分为腹腔镜组(145例)和传统开腹组(152例)进行手术,对其临床资料进行回顾性分析。结果腹腔镜组有6例中转开腹。两组均无手术死亡病例。两组手术时间分别为(167.5±49.3)m in和(142.4±32.7)m in,腹腔镜组时间长于开腹组,但无显著性差异(P>0.05)。术中平均出血量分别为(78.4±25.6)m l和(131.5±45.5)m l,腹腔镜组明显少于开腹组(P<0.05)。两组在肿块切除范围和淋巴结清扫范围方面比较,无显著性差异(P>0.05)。肠道功能恢复时间分别为(2.4±1.0)d和(3.7±1.5)d,两组比较有显著性差异(P<0.05)。术后并发症发生率分别为9.0%和11.2%,两组比较无显著性差异(P>0.05)。局部复发率分别为7.2%和5.9%,无显著性差异(P>0.05)。结论腹腔镜直肠全系膜切除保肛治疗低位直肠癌能取得与开腹手术同样的肿瘤根治性效果,并具有出血少、肠功能恢复快、术后肛门括约肌功能及排尿功能良好等优点。     

晚期胃肠道肿瘤癌性腹水对树突状细胞的抑制效应研究

目的对癌性腹水体外抑制树突状细胞(dendritic cells,DC)免疫功能的效应进行观察,着重探讨癌性腹水免疫抑制效应与腹水中IL-10含量的关系.方法分离10例晚期胃肠道恶性肿瘤患者癌性腹水上清,检测IL-10含量;癌性腹水采用抗IL-10中和或直接加入DC体外培养的系统,观察癌性腹水对DC表面分子表达、细胞凋亡及T淋巴细胞刺激功能的影响.结果癌性腹水较对照IL-10含量显著增高,体外对DC有显著抑制作用,能降低DC表面分子表达、抑制DC对T淋巴细胞刺激增殖效应,并显著促进DC凋亡.中和IL-10处理显著减低癌性腹水对DC的抑制效应,但对DC凋亡率无明显影响.结论晚期胃肠道恶性肿瘤患者癌性腹水对树突状细胞免疫功能有显著抑制作用,IL-10含量增高可能是其抑制效应的重要机制.     

反义B7-H1对人树突状细胞生物学特性的影响研究

目的研究反义B7-H1基因转染对人树突状细胞(dendritic cells,DCs)生物学特性的影响.方法以稳定表达反义B7-H1的重组腺病毒Ad.ASB7-H1转染DCs,转染后1、3、5、7及9 d以流式细胞术检测转染DCs表面B7-H1、CD1、CD14、D80、CD83及HLA-DR的表达,ELISA技术检测Ad.ASB7-H1转染DCs培养上清中IL-12的水平,3H-TdR掺入法检测Ad.ASB7-H1转染DCs诱导的T淋巴细胞增殖能力.结果反义B7-H1转染DCs后可明显抑制细胞表面B7-H1表达,其抑制效应在转染后24 h即开始出现.对DCs其他粘附分子表型表达无明显影响.Ad.ASB7-H1转染DCs刺激同种异体混合淋巴细胞反应能力增强;Ad.ASB7-H1转染DCs分泌IL-12能力提高.结论Ad.ASB7-H1转染可抑制DCsB7-H1的表达并使DCs生物学行为发生改变,反义B7-H1可能成为提高DCs疫苗生物学效能的一个潜在靶点.