毒胡萝卜内酯对人晶状体上皮细胞HLE-B3生长抑制作用的研究

目的： 探讨青胡萝卜内酯(TG)对人晶状体上皮细胞HLE-B3细胞系的生长抑制作用及其机制。方法：采用MTT法分析TG对HLE-B3细胞生长抑制作用，流式细胞术和DNA琼脂糖凝胶电泳观察TG对HLE-B3细胞凋亡诱导作用，Western blotting分析凋亡诱导过程中的相关蛋白的变化。此外，应用荧光分光光度计分析处理后不同时间的细胞内Ca2+浓度变化。结果：不同剂量的TG对HLE-B3细胞生长有不同的抑制作用，并呈现出时间和剂量依赖性关系，12 h、24 h和48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为：（2.27±0.61）μmol/L、（0.77±0.12）μmol/L和（0.15±0.04）μmol/L。0.01、0.1、1和10μmol/L TG明显诱导HLE-B3细胞凋亡。在凋亡诱导过程中，1 μmol/L的TG孵育细胞4 h后开始抑制SERCA2蛋白，引起细胞胞浆内Ca2+负载，并且刺激凋亡诱导蛋白Bax和凋亡执行蛋白caspase3的表达增加。结论：TG能够抑制HLE-B3细胞生长并诱导其凋亡，其机制可能是促发了内质网途径介导的凋亡过程。     

以问题为中心的教学法在普通外科见习教学中的应用

探讨以问题为中心的教学法（Pmblem Based Learning PBL）在普通外科见习带教的应用经验。PBL教学法通过提出一系列有逻辑性有层次性的问题，有效激发学生的积极性和主动性，在引导学生理论结合实际，建立临床思维方面取得满意效果。问题的设计应具有诱导性，逻辑性，小而具体。     

腹腔镜联合光动力治疗晚期胰腺癌的近期临床疗效分析

目的探讨腹腔镜联合光动力治疗晚期胰腺癌的临床疗效。方法 39例晚期胰腺癌患者随机分为两组,治疗组19例采用腹腔镜联合光动力治疗,对照组20例为常规治疗,包括化疗,放疗,内置架植入和开腹姑息手术等。结果治疗组死亡率为15.8%（3/19）,对照组死亡率为25.0%（5/20）。两组死亡率相比无明显统计学差异（χ2=0.507,P〉0.05）。两组治疗前后白细胞计数无明显差异（P〉0.05）;两组治疗后第7天TBIL水平的变化较治疗前显著性降低（P〈0.05）。治疗后第7天复查肿瘤标记物发现,两组CA199和CA125水平较治疗前显著降低,治疗组CA199水平显著低于对照组（P〈0.05）。结论腹腔镜联合光动力治疗晚期胰腺癌安全有效。     

Hedgehog信号通路转录因子Gli2表达对肝癌进展和生存预后的影响

目的探讨Hedgehog（Hh）信号通路转录因子Gli2在肝癌中的表达及其与预后的关系。 方法选取68例肝癌及20例肝血管瘤旁肝组织切除标本,采用免疫组织化学法检测Gli2蛋白表达,并分析Gli2表达与肝癌临床病理特征及预后的关系。 结果Gli2蛋白在肝癌组织中的表达率（63.2%）高于癌旁组织（11.8%）及正常肝组织（10.0%）(χ²=38.431、17528,均P<0.01);Gli2表达水平与肝癌分化程度、包膜是否完整、有无血管侵犯、早期复发及肝内转移相关（P<0.05）;Gli2蛋白高表达患者术后总生存率和无瘤生存率明显低于低表达者（P<0.05）;多因素分析表明,Gli2蛋白表达水平是影响肝癌患者术后总生存率及无瘤生存率的独立预后因素（HR=2.239,P<0.05;HR=1.917,P<0.05）。 结论Gli2的高表达与肝癌的侵袭转移特性相关,可作为评价肝癌患者术后预后的标志物之一。     

光动力抑制胆管癌QBC939细胞生长的实验研究

目的研究血卟啉衍生物介导的光动力（HPD-PDT）抑制胆管癌细胞生长状况及其机制。方法 MTT法用于评估人胆管癌细胞（QBC939）的生长状态;Hoechst33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡;WesternBlotting法用于探测QBC939细胞中细胞色素C的释放情况;Caspases酶活性测定用于测定caspase-3、-8、-9的活化情况。结果 HPD-PDT在体外能够抑制胆管癌QBC939细胞生长,这一效应主要是通过诱导QBC939细胞线粒体凋亡达到的,在凋亡过程中,出现了细胞色素C释放,caspase-9和-3的活化。结论 HPD-PDT体外能够抑制胆管癌细胞生长,诱导胆管癌细胞凋亡。     

腔内隔绝治疗特殊类型主动脉夹层动脉瘤和复杂型腹主动脉瘤

目的探讨基底节区脑出血合并StanfordB型主动脉夹层动脉瘤、肾移植术后患者合并StanfordB型主动脉夹层动脉瘤以及复杂型腹主动脉瘤进行腔内隔绝术的可行性。方法对4例特殊类型的动脉瘤行腔内隔绝治疗,1例为基底节区脑出血合并StanfordB型主动脉夹层动脉瘤,1例为肾移植术后合并StanfordB型主动脉夹层动脉瘤,2例为瘤颈成角大于70°,瘤颈长1.6cm,髂动脉严重扭曲。结果 2例主动脉夹层动脉瘤患者术后未发生内漏,术中应用小剂量肝素,减少造影剂,建立稳定的低血压,有效地保证了脑和移植肾血流灌注,防止了脑部再出血和移植肾的功能损害;2例腹主动脉瘤患者,通过拉紧两端导丝克服血管扭曲的方法使带膜支架顺利释放,带膜支架成角严重时在成角处加放裸支架。其中1例瘤颈发生内漏,支架0.4cm移位,降压治疗1周后复查螺旋CT血管成像(CTA)内漏基本消失,1例髂外动脉带膜支架成角未及时加放裸支架,术后因成角处血流缓慢出现血栓形成,急诊行股—股搭桥。4例患者均痊愈出院。结论应用腔内隔绝治疗脑出血和肾移植后合并主动脉夹层动脉瘤、复杂型腹主动脉瘤是可行的。     

五指山小型猪胰岛对糖尿病大鼠的治疗作用

目的:探讨小型猪胰岛治疗糖尿病大鼠的作用和功效.方法:成年健康♂五指山小型猪和普通家猪作为胰岛供体.胰腺获取后经胶原酶消化后进行胰岛提取纯化,纯化后的胰岛通过门静脉移植到糖尿病SPF大鼠的肝内,术后每天肌注环孢菌素(20mg/kg)作为免疫抑制剂,并通过检测糖尿病大鼠的血糖变化和肝脏组织学检查来判定胰岛移植后的存活情况和纠正胰岛移植的效果.结果:五指山小型猪胰腺消化后胰岛产量为4608 IEQ/g±593 IEQ/g,纯化后为3820 IEQ/g±718 IEQ/g,纯度为85%,取自屠宰场猪胰岛产量为纯化前为3500 IEQ/g±625 IEQ/g,纯化后为2720 IEQ/g±435 IEQ/g,纯度为80%.两组84.6%糖尿病大鼠在移植术后第1天,血糖降至正常.维持时间:小型猪胰岛术后存活时间为3-5d(中位存活时间:4.5d),普通家猪胰岛存活时间为2-4d(中位存活时间:3.7d).经Kaplan-Meier分析,两组胰岛存活时间无差别.结论:封闭群五指山小型猪分离纯化后的胰岛产量高,功能良好,可以纠正糖尿病大鼠的高血糖,适合作为异种胰岛移植的理想供体.     

Hedgehog信号通路转录因子Gli2在肝癌组织中的表达及意义

目的探讨Hedgehog（Hh）信号通路下游转录因子胶质瘤相关癌基因同源蛋白2（Gli2）在肝细胞癌组织中的表达及临床意义。方法采用RealtimeRT—PCR法及Westernblot检测20对肝癌及癌旁组织Gli2基因mRNA及蛋白的表达;采用免疫组织化学法检测52对肝癌及癌旁组织Gli2蛋白的表达情况。结果Gli2mRNA及蛋白在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织。52例肝癌组织中Gli2阳性表达38例（73．1％）,相应的癌旁组织Gli2阳性表达8例（15．4％）,差异有显著性（P〈0．01）;且G1i2蛋白表达与肝癌分化程度、有无血管侵犯及淋巴结转移有相关性（P〈0．05）。结论Gli2的异常表达与肝癌的发生发展及浸润转移密切相关,Gli2可能成为肝癌的重要生物学标志和生物治疗靶点。     

超声联合腹腔镜射频消融术对肝癌患者免疫功能的影响

目的观察肝癌患者经超声联合腹腔镜射频消融(laparoscopic radiofrequency ablation,LRFA)治疗前后外周血免疫指标的变化情况,评价腹腔镜射频消融治疗对机体免疫功能的影响。方法选取2011年3月至2012年3月本科室收治的肝癌患者62例,分为三组,A组为腹腔镜联合超声引导射频消融组(22例)、B组为经肝动脉化疗栓塞组(TACE组)(20例)、C组为外科手术组(20例),射频消融组采用超声引导联合腹腔镜射频消融治疗,手术组行肝癌根治术,20例健康献血员作为正常对照组。采用流式细胞术检测LRFA组治疗前后以及三组患者治疗前后同时相外周血中淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、NK、CD19+)细胞的比例变化。结果 A、B、C三组患者治疗前外周血CD3+、CD4+数目、CD4+/CD8+比值、NK细胞数目明显低于正常对照组(P<0.01),CD8+较正常对照组稍有升高,但差异无显著性;A组治疗后1周,外周血CD3+、CD4+、NK数目、CD4+/CD8+比值较术前明显升高(P<0.05),CD8+数目显著下降(P<0.05),且术后第2周～第4周上述指标仍能维持在优于术前水平;B组治疗后1周,CD3+、CD4+、CD8+数目、CD4+/CD8+比值以及NK细胞数目较术前无明显变化,至术后第2周时CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值以及NK细胞数目显著高于术前(P<0.01);C组治疗后1周,CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值较术前无明显变化,NK细胞数目显著低于术前,术后第2周、第3周上述指标有所改善,至术后第4周CD3+、CD4+数目、CD4+/CD8+比值以及NK细胞数目显著高于术前,而CD8+数目明显低于术前(P<0.05)。结论 LRFA治疗后1周内,患者机体的细胞免疫功能明显改善,而TACE及外科手术治疗后1周内,细胞免疫功能进一步受到抑制,至术后第2周行TACE治疗者细胞免疫功能较术前明显改善,行外科手术切除的患者需经过4周,细胞免疫功能尚能恢复。故三种治疗肝癌的方法中,对于细胞免疫系统功能的改善作用:LRFA>TACE>外科手术。