实时荧光定量PT-PCR检测肝细胞癌中PTCH基因的表达

目的 探讨PTCH基因在肝细胞癌组织中的表达及其与肝癌病理分级的关系.方法 提取手术切除18例不同病理分级的人肝癌、癌旁组织和6例胆管结石手术切除的正常肝组织中的总RNA并逆转录为cDNA.应用实时荧光定量RT-PCR法观察人肝细胞癌组织与癌旁组织中PTCH基因的相对表达水平,以及观察人正常肝组织中PTCH基因的表达水平.结果 PTCH在所测18例肝细胞癌组织与癌旁组织中均有表达,在6例正常肝组织中不表达,且在病理分级为Ⅰ和Ⅱ级的癌组织中PTCH的mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),而在病例分级为Ⅲ级的癌组织中PTCH的mRNA表达水平显著低于癌旁组织(P=0.024).结论 随着肝癌恶性程度的增加PTCT的mRNA表达量呈递减趋势,提示PTCH可能参与了肝细胞的早期癌变过程.     

门脉高压症合并脾功能亢进施行脾切除术的临床疗效分析

目的：分析门脉高压症合并脾功能亢进（简称门脉高压性脾亢）患者行脾切除术的近远期疗效和切脾对机体的影响。方法收集2004年1月至2014年1月收治的351例门脉高压性脾亢患者,回顾性分析病例资料以及行脾切除术后近期疗效评价,并进行远期随访调查,重点了解术后感染、肝癌、肝功能、血细胞变化以及系统疾病的控制情况等。结果患者行脾切除术后,近期内受损的肝功能和血细胞得以恢复。近期内出现黄疸者42例,腹水31例,发热34例,上消化道再出血者13例,予以积极对症处理后均康复出院。远期随访87例发现,29例在切脾约2~33（中位11.4）个月后出现肝功能下降,血清白蛋白水平下降和转氨酶水平升高;原伴发的糖尿病、高血压病和消化系统疾病切脾后较切脾前病情容易控制;继发肝癌者6例,4例死亡,未见有脾切除后凶险性感染。结论门脉高压症合并脾功能亢进患者进行脾切除术对机体有利有弊,故对于此类脾大患者不能一律予以切除。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ和PTEN在肝癌组织中的表达及意义

目的检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和PTEN蛋白在肝癌组织与癌旁组织的表达情况,探讨两种蛋白表达㈦临床病理各参数的关系及意义。方法收集100例中山大学附属第一医院手术切除的肝癌㈦癌旁组织标本,构建组织微阵列芯片,应⒚免疫组化染色检测PPARγ和PTEN蛋白的表达。在体外实验中,应用Western blotting法检测人肝癌Huh7细胞中PPARγ活化对PTEN蛋白的影响。结果PPARγ、PTEN蛋白在肝癌组织中阳性表达率分别为82%和62%,明显低于癌旁组织的表达率(分别为95%和92%),差异有统计学意义(P0.05)。肝癌组织中PPARγ蛋白的表达与癌组织的分化程度密切相关,PTEN蛋白表达与癌组织的分化程度和肿瘤门静脉浸润关系密切。体外实验证实Huh7细胞中PPARγ活化后上调PTEN蛋白表达。结论PPARγ和PTEN蛋白在肝癌组织中阳性表达率均低于癌旁组织,PPARγ活化后上调PTEN蛋白表达,两种蛋白在肝癌发生发展中起着重要作用。     

腹腔镜联合光动力治疗胰腺癌的临床研究

目的比较腹腔镜联合光动力（PDT）与其他方法姑息治疗晚期胰腺癌的疗效.方法 28例晚期胰腺癌患者随机分为两组,PDT组13例为腹腔镜联合光动力治疗,对照组15例,采用化疗、放疗、内置架植入和开腹姑息手术等治疗.结果 PDT组患者0.5、1、2年生存率为92.3%,76.9%,12.0%,对照组生存率为66.7%,42.3%和0%,PDT组生存率明显高于对照组,经Log-rank检验,差异有统计学意义（χ2= 3.923,P＜0.05）.结论腹腔镜联合光动力治疗晚期胰腺癌有效.     

核蛋白受体对肝癌相关基因表达的信号转导调控

目的 研究过氧化物酶体增殖物激活受体酌( PPAR酌)和肿瘤抑制基因PTEN 在肝癌组织中表达的相关性,以及两种基因对人肝癌细胞BEL-7402 细胞生长的影响,并探讨其机制.方法 分别应用RT-PCR 和Western blot 观察分析肝癌组织、癌旁组织以及肝癌细胞中PPAR酌和PTEN 的表达情况;应用MTT 法观察PPAR酌的合成配体罗格列酮(RGZ)对BEL-7402 细胞生长的影响.结果 PPAR酌mRNA 和PTEN mRNA 在肝癌组织较癌旁组织中表达是显著降低的,两者在肝癌组织中的表达呈正相关(r=0.774,P&lt;0.01).罗格列酮呈剂量和时间依赖性关系诱导PTEN 蛋白的表达和抑制BEL-7402 细胞的生长,此效应是通过PPAR酌通路活化实现的.结论 PPAR酌和PTEN 在肝癌中表达呈正相关,RGZ 能够抑制BEL-7402 细胞的生长,此效应与RGZ 诱导PPAR酌通路活化和PTEN 表达上调有关.     

Shh和Ptch在肝细胞癌中的表达研究

目的探讨肝细胞癌（HCC）中Shh和Ptch的表达及其意义。方法应用组织芯片技术、免疫组化和原位杂交方法检测100例HCC、25例癌旁组织和5例正常肝组织中Shh和Ptch的表达情况。结果免疫组化检测Hcc中Shh和Ptch的阳性表达率分别为19．28％（16／83）、24．68％（19／77）;原位杂交检测结果分别为44．29％（31／70）、15．85％（13／82）;两种基因在HCC中的表达相关,均与非肿瘤组织的表达有显著性差异,并分别与肿瘤的大小及分化程度相关。结论Shh和Ptch的表达参与了HCC的发生,它们可能是HCC治疗的理想靶标。     

十二指肠镜和腹腔镜治疗急性胆源性胰腺炎的临床疗效比较

目的 比较十二指肠镜和腹腔镜在急性胆源性胰腺炎治疗中的临床疗效.方法 将89例急性胆源性胰腺炎病人随机分为十二指肠镜组(45例)和腹腔镜组(44例),在发病72 h之内应用上述2种方法处理,比较2组手术前后WBC、总胆红素(TBIL)、丙氨酸转氨酶(ALT)、血淀粉酶(BAMS)和白细胞介素10(IL-10)水平的变化...     

腹腔镜与开腹肝切除术治疗肝癌的疗效对比

目的 探讨腹腔镜肝切除术(laparoscopic hepatectomy,LH)与开腹肝切除术(open hepatectomy,OH)治疗肝癌的临床疗效.方法 广州医学院第二附属医院2008年1月至2010年12月期间收治原发性肝细胞癌患者45例,将其分为2组,LH组21例,OH组24例.比较2组患者术中、术后的情况与生存率,评价其疗效.结果 本组患者术中失血量和输血量LH组显著高于OH组(分别x2=3.973,x2=4.862,均P＜0.05),近期并发症发生率LH组(2例)显著低于OH组(9例)(x2=4.746,P＜0.05);总住院天数LH组为(17.3±5.0)d,OH组为(21.5±5.1)d,2组比较差异有统计学意义(t=-2.717,P＜0.05).2组患者随访的总生存率比较差异无统计学意义(x2=0.172,P ＞0.05).LH组的无瘤生存率为52.4％,显著高于OH组(25.1％,x2=4.543,P＜0.05).结论 腹腔镜与开腹肝切除均为肝癌治疗的有效方法,腹腔镜术式近期并发症少,住院时间短,但两组总体生存率无差异.     

没食子儿茶素没食子酸酯诱导人肝癌细胞凋亡

目的 探讨没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)诱导人肝癌细胞株凋亡的作用和机制.方法 以不同浓度EGCG处理人肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721细胞24 h和48 h.四甲基偶氮唑蓝比色法和锥虫蓝染色细胞计数评价细胞生长情况;流式细胞术检测细胞凋亡和环氧合酶-2(COX-2)、Bcl-2蛋白;比色法测定天冬氨酸蛋白酶-9和caspase-3活性;RT-PCR检测COX-2和Bcl-2家族mRNA的表达.结果 EGCG(50、100、200、400μg/ml)处理48 h后,HepG2细胞活性下降至93.8%±2.8%,62.3%±5.4%,33.9%±2.5%和17.6%±3.2%,与对照组(100.0%±2.8%)比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);SMMC-7721细胞活性下降至49.6%±3.5%,30.3%±3.8%,17.7%±2.2%和13.0%±2.5%,与对照组(100.0%±0.8%)比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);100 μg/ml EGCG处理细胞24、48、72和96 h后,HepG2活细胞计数(×104)分别是8.0±1.5,22.0±3.1,37.0±5.4和61.0±8.7,与对照组(15.0±2.5,45.0±5.3,86.0±11.0和210.0±23.0)相比明显减少,差异均有统计学意义(均P＜0.05);SMMC-7721活细胞计数(×104)分别是7.0±2.2,13.0±2.5,20.0±3.7和31.0±4.0,与对照组(14.0±2.2,40.0±4.3,75.0±8.8和182.0±28.0)相比明显减少,差异均有统计学意义(均P＜0.05).EGGG(50、100、200μg/ml)处理细胞12 h后,HepG2细胞凋亡率分别是8.7%±0.4%,18.1%±1.1%和22.1%±1.8%;SMMC-7721细胞凋亡率分别是5.9%±0.3%,7.8%±0.6%和12.2%±0.8%,与对照组(3.3%±0.3%)和(3.7%±0.4%)比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);EGCG(100、200μg/ml)处理细胞12 h后,HepG2细胞caspase-9活性为1.8±0.4和2.5±0.4;caspase-3活性为2.0±0.4和2.8±0.5,两者与对照组(1.0±0.1和1.0±0.2)比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);SMMC-7721细胞caspase-9活性为1.7±0.4和2.5±0.4,caspase-3活性为1.9±0.4和2.6±0.3,均显著高于对照组(1.0±0.1和1.0±0.2,P＜0.05).EGCG(200μg/ml)下调COX-2和Bcl-2的表达,而对Bcl-2家族其他成员表达无明显影响.结论 EGCG可能通过下调COX-2和Bcl-2的表达,激活caspase-9和caspase-3诱导肝癌细胞凋亡.     

实时荧光定量RT-PCR检测肝细胞癌中删基因的表达

目的探讨PTCH基因在肝细胞癌组织中的表达及其与肝癌病理分级的关系。方法提取手术切除18例不同病理分级的人肝癌、癌旁组织和6例胆管结石手术切除的正常肝组织中的总RNA并逆转录为cDNA。应用实时荧光定量RT-PCR法观察人肝细胞癌组织与癌旁组织中PTCH基因的相对表达水平,以及观察人正常肝组织中PTCH基因的表达水平。结果PTCH在所测18例肝细胞癌组织与癌旁组织中均有表达,在6例正常肝组织中不表达，且在病理分级为Ⅰ和Ⅱ级的癌组织中PTCH的mRNA表达水平显著高于癌旁组织（P〈0．01），而在病例分级为Ⅲ级的癌组织中PTCH的mRNA表达水平显著低于癌旁组织（P=0．024）。结论随着肝癌恶性程度的增加PTCH的mRNA表达量呈递减趋势，提示PTCH可能参与了肝细胞的早期癌变过程。