丁酸钠诱导人单核细胞源性未成熟树突状细胞的形态及免疫功能变化

背景：未成熟树突状细胞（dendriti ccells，DC）可以诱导免疫耐受形成，在器官移植领域具有广阔应用前景。目前采用的诱导未成熟树突状细胞的方法仍存在一些不足，寻求新的诱导方法十分必要。目的：观察丁酸钠对人外周血来源的树突状细胞的成熟状态和免疫学功能的影响。设计：观察对比，体外细胞学实验。单位：中山大学附属第二医院肝胆外科。材料：人外周血样品取自中山大学身体健康的大学生志愿捐献者（年龄20—23岁），共5份，每份100mL，均在献血后2h内进行外周血单个核细胞和淋巴细胞分离。方法：实验于2006—09／2007—03在中山大学附属第二医院医学研究中心完成。①人外周血单个核细胞采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4诱导成为未成熟树突状细胞。②诱导6d后，加入组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠1mmol／L诱导，以促成熟因子脂多糖1mg／L为对照；设不加促成熟因子为空白对照组。③在诱导0d时加入丁酸钠，6d时加入脂多糖再次刺激。主要观察指标：动态观察细胞形态学变化，流式细胞仪检测DC表型，FITC标记的Dextran检测DC内吞能力，采用酶联免疫吸附法检测白细胞介素12分泌，混合淋巴细胞反应检测DC刺激淋巴细胞增殖能力。结果：①DC形态：在丁酸钠作用下，DC聚集现象明显减少。②细胞表型检测结果：丁酸钠促成熟组常规方法诱导的未成熟DC的CD80，CD83，HLA-DR表达均低于脂多糖组，差异有显著性意义（P〈0．01）。采用丁酸钠法诱导的未成熟DC，在第6天时加入促成熟因子脂多糖后CD80，CD83，HKA-DR表达仍处于低水平。③DC内吞能力：常规方法诱导的未成熟DC，用LPS诱导成熟后，其内吞能力均低于空白对照组和丁酸钠促成熟组，差异有非常显著性意义（P〈0．01）；而采用丁酸钠法诱导的DC，其内吞能力最强，高于其他各组，差异有非常显著性意义（P〈0．01）。④DC分泌白细胞介素12：常规诱导法用LPS诱导DC成熟后的白细胞介素12分泌水平高于对照组、丁酸钠促成熟组及丁酸钠诱导法，差异有非常显著性意义（P〈0．01）。⑤DC诱导的MLR：常规诱导法用LPS诱导的成熟DC刺激淋巴细胞的增殖能力显著高于对照组、丁酸钠促成熟组及丁酸钠诱导法，差异有非常显著性意义（P〈0．01）。结论：丁酸钠可以抑制DC成熟，稳定诱导未成熟DC生成，该DC不能被促成熟因子激活，在诱导移植免疫耐受方面具有潜在应用前景。     

咪达唑仑对子宫平滑肌细胞钙离子移动的影响

目的:探讨咪达唑仑对足月产妇子宫平滑肌细胞Ca2+跨膜内流和肌浆网Ca2+释放功能的影响及其对子宫平滑肌收缩功能影响的机制。方法:取正常孕足月待产产妇的子宫平滑肌组织,采用胶原酶消化法培养子宫平滑肌细胞,并分成两部分。第一部分:先将40个孔板中活性良好的子宫平滑肌细胞随机等分为4组(n=10),即:对照组、低浓度咪达唑仑组(M1组)、中浓度咪达唑仑组(M2组)和高浓度咪达唑仑组(M3组),用Fluo-3AM钙荧光指示剂染色后,分别给予Hank液、1μmol/L咪达唑仑(终浓度)、3μmol/L咪达唑仑、15μmol/L咪达唑仑预处理20min,然后加入40mmol/L氯化钾,每个孔板在激光共聚焦显微镜下随机选定10个子宫平滑肌细胞,利用图形分析软件分析细胞内钙荧光强度,取平均值反映子宫平滑肌细胞游离Ca2+浓度([Ca2+]i)。第二部分:以20mmol/L咖啡因代替氯化钾,其余处理及分组同第一部分。结果:第一部分与基础值比较,各组加入咪达唑仑后细胞内钙荧光强度无显著性差异(P>0.05),加入氯化钾后钙荧光强度升高(P<0.01);M1组和对照组比较加入氯化钾后钙荧光强度无显著性差异(P>0.05),M2组和M3组加入氯化钾后钙荧光强度峰值低于对照组(P<0.01),且M3组低于M2组(P<0.05)。第二部分与基础值比较,各组加入咪达唑仑后细胞内钙荧光强度无显著性差异(P>0.05),加入咖啡因后钙荧光强度升高(P<0.01);加入咖啡因后各组钙荧光强度无显著性差异(P>0.05)。结论:咪达唑仑可浓度依赖性地抑制足月产妇子宫平滑肌细胞电压依赖型钙通道开放而减少Ca2+跨膜内流,而对肌浆网Ca2+释放功能无明显影响。     

血清EPCA-2与尿PCA3联合检测诊断PSA灰区前列腺癌的研究

目的:检测血清早期前列腺癌抗原-2(EPCA-2)与尿液前列腺癌抗原3(PCA3)在前列腺特异性抗原(PSA)灰区(4～10 ng/mL)前列腺癌患者中的表达,探讨联合检测对早期诊断PSA灰区前列腺癌的应用价值.方法:将180例PS A灰区病例分为前列腺癌组(46例)和前列腺良性增生组(134例),同时选取健康体检者120例作为正常对照组,检测三组血清EPCA-2和尿液PCA3的表达,并分析联合检测EPCA-2和PCA3对鉴别PSA灰区前列腺癌与良性前列腺增生的诊断价值.结果:前列腺癌组与前列腺良性增生组血清EPCA-2水平均增高,与正常对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).前列腺癌组29例尿液PCA3基因表达呈阳性,而前列腺良性增生组仅8例表达呈阳性,正常对照组PCA3基因表达均呈阴性.联合检测EPCA-2与PCA3鉴别PSA灰区前列腺癌和前列腺增生的敏感度为76.08％,特异度为85.82％.结论:联合检测血清EPCA-2与尿液PCA3可提高PSA灰区前列腺癌的早期诊断率.     

亚硒酸钠对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化及其氧化损伤的影响

目的探讨亚硒酸钠对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化的作用及其对肾间质转化生长因子-β1(TGF-β1)表达及氧化应激指标变化的影响。方法以单侧输尿管结扎建立肾间质纤维化大鼠模型。将90只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、UUO组(B组)、UUO+硒组(C组)、UUO+硒及维生素E组(D组)、UUO+贝那普利组(E组),每组18只。C、D、E组分别给予亚硒酸钠(0.2mg.kg-1.d-1)、亚硒酸钠(0.2mg.kg-1.d-1)+维生素E(200mg.kg-1.d-1)和贝那普利(10mg.kg-1.d-1)灌胃。A、B组给予同等剂量生理盐水灌胃。术后第7、14、21天各组随机处死6只大鼠,肾组织行HE、Masson染色评定各组肾间质纤维化程度,免疫组织化学半定量法检测各组肾间质TGF-β1的表达。化学比色法检测肾组织匀浆中氧化指标谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果手术后第7、14、21天,C组肾间质纤维化程度较B组明显减轻(P<0.05),肾组织TGF-β1的表达强度明显低于B组(P<0.01或P<0.05),GSH-Px和SOD含量明显高于B组(P<0.05),MDA含量明显低于B组(P<0.05);而上述各项指标与D组和E组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论硒可能通过减轻肾组织氧化应激反应,下调TGF-β1表达,延缓肾间质纤维化,从而起到肾脏保护作用。     

表柔比星联合奥沙利铂和短期5-FU持续滴注的EOF5方案一线治疗晚期胃癌的疗效评估

背景与目的：晚期胃癌治疗中,ECF(表柔比星、顺铂及5-FU持续滴注21 d)方案系经典一线方案,2004年起我们以奥沙利铂取代顺铂,以低剂量5-FU持续滴注120 h取代标准剂量持续滴注21 d,组成EOF5方案,以期提高疗效及依从性,先后开展了小样本探索性研究及扩大样本的Ⅱ期研究。方法：本研究回顾性分析了该两项Ⅱ期研究结果。患者均接受了表柔比星50 mg/m2,静脉推注,第1天;奥沙利铂130 mg/m2,静脉滴注2 h,第1天;每天5-FU的剂量为375~425 mg/m2,低剂量持续输注5 d共120 h;每3周重复,每6周评价疗效。治疗到进展、不能耐受或患者退出,对于6~8个疗程后稳定以上疗效的患者根据医师推荐及患者的意愿,选择氟尿嘧啶类药物维持治疗或观察。结果：178例晚期胃癌患者纳入本研究,170例可行疗效及不良反应评估,7例(3.9%)完全缓解(complete response,CR),76例(42.7%)部分缓解(partial response,PR),总有效率(overall response rate,ORR,CR+PR)为46.6%,69例(38.8%)疾病稳定(stable disease,SD),18例(10.1%)疾病进展(progressive disease,PD)。中位无进展生存期(progress free survival,PFS)为6.0个月(95%CI：5.2~6.8),中位总生存期(overall survival,OS)为12.6个月(95%CI：8.9~16.3),1、2年生存率分别为50.9%和28.0%。3~4度以上不良反应主要有白细胞及中性粒细胞减少23.0%及38.8%、血红蛋白下降6.5%、血小板下降23.5%、恶心呕吐14.1%、手足麻木1.2%。接受二线治疗的75例患者,二线治疗中位生存时间8.0个月(95%CI：4.8~11.2)。结论：EOF5方案治疗晚期胃癌有效率高,PFS和OS同ECF及其改良方案类似,不良反应可控,是安全有效的晚期胃癌一线治疗方案。     

腹腔镜辅助联合肝脏离断和门静脉结扎的二期肝切除术治疗伴有轻-中度肝硬化的原发性肝细胞癌（附7例报告）

目的 分析腹腔镜辅助联合肝脏离断和门静脉结扎的二期肝切除术（ALPPS）治疗伴有轻-中度肝硬化的较晚期巨大肝癌的安全性、有效性和微创性。方法 回顾性分析2013年8月至2014年10月中山大学孙逸仙纪念医院行腹腔镜辅助下ALPPS治疗伴有轻-中度肝硬化巨大原发性右肝肝癌7例的临床资料。第1期行腹腔镜下门静脉右支结扎＋肝实质离断术,待未来剩余肝脏体积（FLR）增生后行第2期开腹肝脏右三叶切除术,并对围手术期结果和近期肿瘤学疗效进行分析。结果 7例均行全腹腔镜下的第1期肝脏离断和门静脉结扎术,其中4例FLR扩增达标,行第2期开腹肝脏右三叶切除术。第1期平均手术时间（192.9±35.9）min,第2期平均手术时间（210.0±73.9）min,平均FLR增生率35.6%,围手术期无严重并发症及死亡发生。术后随访1年,平均至肿瘤复发时间为178.7 d。结论 在有经验的肝胆外科中心对选择性病人实施腹腔镜辅助ALPPS是可行的,对轻度肝硬化以下的原发性肝细胞癌病人实施腹腔镜下门静脉右支结扎和肝脏离断能有效刺激FLR明显扩增,并具有相对较低的并发症发生率和病死率,围手术期相对安全,为FLR不足的较晚期巨大肝癌病人提供了一个治疗选择。     

大范围肝切除术在复杂肝胆管结石治疗中的应用

正大范围肝切除(major hepatectomy)被定义为四段和四段以上的肝切除~[1],涵盖右半肝切除、扩大左半肝切除、联合尾状叶的半肝切除以及门静脉栓塞(portal vein embolization,PVE)后右三叶切除、联合肝脏分隔与门静脉右支结扎的二期肝切除术(ALPPS)等分期肝切除术式。大范围肝切除术是治疗中晚期肝脏恶性肿瘤和广泛肝胆管结石病的重要手段。近年来随着精准肝切除、原位前入路肝切除等     

大肠癌单克隆抗体治疗新进展

【摘　要】　表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的过表达均与大肠癌肿瘤细胞生长有密切联系,如果阻断了ＥＧＦＲ或ＶＥＧＦ的活性,就可以阻断肿瘤细胞生长的重要过程,使得肿瘤细胞功能大大受损,从而起到了抗肿瘤的作用。作为ＥＧＦＲ和ＶＥＧＦ单克隆抗体,西妥昔单抗、贝伐单抗联合化疗治疗晚期恶性肿瘤,特别是大肠癌已经得到广泛应用,明显延长了患者的生存期,并成为晚期大肠癌治疗的一项重要飞跃。本文就２００８年度有关抗ＥＧＦＲ单抗及贝伐单抗在大肠癌治疗中的最新研究进展做一综述。     

新校区智慧后勤建设的认识和思考

加快推进高校后勤信息化建设是教育现代化的必然要求。首都医科大学应紧紧抓住新校区建设的有利契机,深入研究智慧后勤的内涵,了解国内高校智慧后勤建设发展状况,结合自身实际需求,对现阶段学校后勤信息化存在的问题进行分析,提出新校区智慧后勤建设意见,构建与学校发展目标相匹配的智慧后勤服务体系。     

苍蝇百日净现场灭蝇效果观察

苍蝇百日净是锦州市消灭药品厂采用美国杜邦公司原药配制而成 ,是一种高效、广谱杀虫药剂。为了解该药的灭蝇效果 ,1999年 7月在水泥招待所餐厅进行了现场灭蝇实验。1　材料与方法　苍蝇百日净 ,锦州市消灭药品厂提供 ;喷雾器械 ,为国产“ＸＯＰ - 3”压管式多用喷雾器 ;实验现