抑癌基因PTEN与pAkt在肝细胞肝癌中表达及其意义

目的研究肝细胞癌（HCC）中抑癌基因第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）与磷酸化丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶B（pAkt）表达及其意义。方法采用免疫组化S—P法检测65例HCC及癌旁组织中FFEN与pAkt表达并分析两者与肝癌患者年龄、临床分期、病理类型及侵袭转移性之间关系。结果HCC中PTEN蛋白阳性率明显低于癌旁肝组织，且随HCC恶性程度、侵袭转移性升高而显著下降（P〈0．05）；pAkt在HCC中表达率明显高于癌旁肝组织，且其表达率随HCC恶性程度、侵袭转移性升高而增加（P〈0．05）；肝癌及癌旁组织中，FFEN与pAkt表达均呈负相关（P〈0．01）。结论PTEN与pAkt表达与肝癌组织恶性程度相关，联合检测PTEN与pAkt在癌组织中表达情况，可作为肿瘤预后评估指标之一。     

妊娠合并急性胰腺炎的诊断与治疗对策

目的:探讨妊娠合并急性胰腺炎的临床特点、诊断及处理原则。方法:对该院近年来收治的11例妊娠合并急性胰腺炎患者临床资料进行回顾性分析。结果:11例患者中,轻度胰腺炎8例,重度胰腺炎3例;6例患者(54·54%)有胆结石病史,高脂血症5例(45·45%);8例轻度胰腺炎患者经保守治疗病情稳定,7例因孕周尚早平安出院,另1例为孕38周行剖宫产术结束分娩,母子健康出院;3例重度胰腺炎患者,1例孕17周经保守治疗无效行中孕引产术,另2例晚孕患者保守治疗的基础上行剖宫产术,同时行腹腔和胰腺固引流术,均痊愈出院。无一例孕产妇死亡。结论:妊娠合并急性胰腺炎的发生与胆结石和高脂血症有关,治疗方案应由内外科和妇产科医师共同制定。     

HBV感染与hTERT基因表达在肝细胞癌组织中的相关性研究

目的 :研究hTERT基因在HBsAg阳性与阴性肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)患者组织中表达的差异 ,探讨HBV病毒感染与hTERT基因表达在HCC中的相关性。方法 :应用免疫组化 (SP法 )和半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)分别检测 73例HCC患者组织中hTERT蛋白及其mRNA的表达情况 ,其中HBsAg阳性 5 3例 ,HBsAg阴性 2 0例 ,比较二者表达的差异。结果 :hTERT蛋白在HBsAg阳性HCC组织中的阳性表达为 48/5 3 ,在HBsAg阴性HCC组织中阳性表达为 12 /2 0 ,两组病例hTERT蛋白表达阳性率差异有统计学意义 ,P <0 0 1;hTERTmRNA在HB sAg阳性HCC组织中阳性表达为 46/5 3 ,hTERTmR NA在HBsAg阴性HCC组织中阳性表达为 11/2 0 ,两组病例hTERTmRNA表达阳性率差异有统计学意义 ,P <0 0 5 ;统计学分析显示 ,HCC中HBsAg与hTERTmRNA的表达有显著关联性 ,与hTERT蛋白的表达强度成系统性的线性趋势 ,P <0 0 1。结论 :HBsAg阳性HCC组织中hTERT基因表达的阳性率和阳性强度均明显高于HBsAg阴性HCC组织 ,差异有统计学意义 ,P <0 0 5 ;HCC中HBV病毒感染与hTERT基因表达之间具有相关性 ,提示在HCC发生发展中可能存在二者的相互作用     

肝外科手术突破传统模式

由华中科技大学同济医学院陈孝平教授、裘法祖院士等共同完成的“肝外科手术的基础和临床应用研究”,获2003年度国家科技进步奖二等奖。肝脏外科手术已有上百年的历史。传统的观点和临床实践中形成的手术惯例认为:在常温手术过程中阻断肝血流的时间不能超过15-20分钟,但在这样短的时间内进行     

PTEN在肝细胞癌中的表达及其与AKT磷酸化的相关性研究

 目的　研究抑癌基因PTEN在肝细胞癌 (HCC)中的表达及其与蛋白激酶B(PKB/AKT)磷酸化的相关性。方法　采用免疫组织化学S P染色法 ,Western印迹杂交法检测 35例肝细胞癌 ,15例肝硬变 ,8例正常肝组织中PTEN的表达 ,并分析肝癌组织中PTEN表达与AKT磷酸化水平的关系。结果　肝癌组织中PTEN蛋白的阳性表达 (6 2 .9% ,0 .0 85± 0 .0 2 1)明显低于肝硬变和正常肝组织 (P <0 .0 1) ;同时低分化、有肿瘤转移的肝癌其PTEN表达强度明显低于高分化、无转移的肝癌 (P <0 .0 5 ) ;相关性分析表明 :肝癌组织中PTEN蛋白表达和AKT磷酸化水平呈明显负相关 (r =- 0 .818,P <0 .0 1)。结论　由于PTEN蛋白表达下调或缺失 ,而导致AKT磷酸化水平的明显增高 ,在肝癌的发生、发展中起着重要的作用。     

整合素Integrinβ_1在原发性肝癌组织内的表达及意义

选择同济医院 2 0 0 2年 1月至 12月间住院手术肝癌患者 3 8例肝癌标本作为实验组 ,以 8例门脉高压症肝硬变患者和 4例肝外伤患者肝脏标本作为对照组 ,采用免疫组织化学染色方法检测正常肝脏组织、肝硬化组织和肝癌组织内整合素β1 的表达情况 ,并分析其表达水平与肝癌的部分生物学行为如肿瘤直径、有无包膜侵犯、肝癌病理分级、是否有肝内外转移、是否合并肝硬化以及 AFP水平等因素的关系。结果显示 ,正常肝脏组织及肝硬化组织中均有不同程度的 Integrinβ1 的表达 ,但是表达强度与肝癌组织内的表达相比明显为弱 ( P<0 .0 5 ) ,有显著性差异。提示在肝癌组织内整合素 Integrinβ1 的表达明显高于非肝癌组织 ,并且与肝癌的侵袭性和转移有关     

小鼠甲胎蛋白基因的克隆表达鉴定及稳定表达甲胎蛋白的小鼠肿瘤细胞株的建立

目的:克隆小鼠甲胎蛋白(AFP)基因并进行表达鉴定,构建小鼠AFP真核表达载体并建立稳定表达甲胎蛋白的小鼠肿瘤细胞株．方法:从HePal-6细胞中提取总RNA进行 RT-PCR,克隆出小鼠AFP基因,亚克隆于 pcDNA3．1中构建真核表达载体pmAFP,进行酶切、测序和表达鉴定,pmAFP稳定转染 EL-4细胞建立EL-4(mAFP)细胞株,RT-PCR 检测EL-4(mAFP)细胞mAFP mRNA的表达,Western blot检测mAFP蛋白表达,将EL- 4(mAFP)N胞种植于6只小鼠背部皮下观察成瘤情况．结果:RT-PCR成功克隆出小鼠AFP基因,酶切、测序和表达鉴定证实真核表达载体 pmAFP构建成功,RT-PCR及Western blot检测证实EL-4(mAFP)细胞中有mAFP mRNA及蛋白的表达,5只小鼠背部皮下种植处有肿瘤形成,22 d肿瘤体积为2 279．97±235．13 mm3．结论:小鼠mAFP基因克隆成功,真核表达载体构建成功,建立的EL-4(mAFP)细胞株能有效表达小鼠甲胎蛋白,在小鼠体内成瘤性良好．     

Smad-7与TGF-β1蛋白在胆囊癌组织中的表达及意义

[目的]探讨Smad-7和TGF-β1蛋白在胆囊癌组织中的表达及其意义.[方法]采用免疫组化SP法检测49例胆囊癌和20例慢性胆囊炎组织中Smad-7和TGF-β1蛋白的表达,并分析两者的表达与胆囊癌临床病理特征的关系.[结果]Smad-7在胆囊癌组织中的表达阳性率为67.3%(33/49),显著高于慢性胆囊炎的15.0%(3/20)(P<0.05); 胆囊癌组织中TGF-β1蛋白的表达阳性率为38.8%(19/49),低于慢性胆囊炎的80.0%(16/20)(P<0.05).Smad-7的表达与胆囊癌Nevin分期和组织学分化程度有关(P<0.05), TGFβ1蛋白的表达则随胆囊癌Nevin分期进展、组织学分化程度的降低而逐渐下降(P<0.05), Smad-7和TGF-β1蛋白表达之间呈负相关(P<0.05).[结论]Smad-7蛋白高表达和TGF-β1蛋白表达下降可能参与了胆囊癌的发生、发展过程.     

Replication-incompetent Adenovirus Vector-mediated MDA-7/IL-24 Selectively Induces Growth Suppression and Apoptosis of Hepatoma Cell Line SMMC-7721

In order to investigate the effect of replication-incompetent adenovirus vector expressing MDA-7/IL-24 on tumor growth and apoptosis of human hepatocellular carcinoma （HCC） cell line SMMC-7721 and normal liver cell line L02, the recombinant replication-incompetent Ad.mda-7 virus vector was constructed and infected into the HCC cell line SMMC-7721 and normal liver cell line L02. RT-PCR was performed to examine the expression of MDA-7 mRNA. The concentrations of MDA-7/IL-4 in culture superuatants were determined by using ELISA. MTT and Hoechst staining assay were applied to observe the inhibitory and killing effects of MDA-7 on the HCC cells. By using flow cytometry, the apoptosis, cell cycle and proliferation of SMMC-7721 and L02 cells were measured. The results showed recombinant replication-incompetent virus expressing MDA-7/IL-24 was constructed successfully, and RT-PCR revealed that it could mediate the high expression of the exogenous gene MDA-7/IL-24 in SMMC-7721 and L02 cells. The expression of MDA-7/IL-24 proteins in the culture superuatant was detectable by ELISA. Ad.mda-7 infection induced apoptosis and growth suppression in SMMC-7721 cells and an increased percentage of HCC cells in the GyM phase of the cell cycle, but not in L02 cells. It was concluded that mda-7/IL-24 gene, mediated with replication-incompetent adenovirus vector, could selectively induce growth suppression and apoptosis in HCC cell line SMMC-7721 but without any toxic side-effect on normal liver line L02.