结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6 的构建、鉴定及免疫效应评价

目的构建结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6并探讨其诱导的免疫效应。方法将扩增自结核杆菌基因组的ESAT-6基因
装入pVAX1载体构建pVAX1/ESAT-6重组质粒;经酶切、测序鉴定后,利用阳离子聚合物介导将重组质粒pVAX1/ESAT-6转染
Hela细胞,分别以RT-PCR法检测ESAT-6 mRNA的表达、间接免疫荧光法检测ESAT-6蛋白表达。重组质粒经体内电转染免疫
小鼠后,采用ELISA法测定小鼠血清中IFN-γ及抗ESAT-6 特异性抗体IgG 的水平;流式细胞术检测小鼠淋巴细胞增殖水平;
ELISPOT检测产生IFN-γ的淋巴细胞频数。结果构建的重组质粒pVAX1/ESAT-6经双酶切于3000 bp和300 bp处各见1条带,
测序结果显示插入序列与ESAT-6基因序列无差异。重组质粒转染Hela细胞后,RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳于约300 bp处
见目的条带,间接免疫荧光检测显示特异性绿色荧光。重组质粒免疫小鼠后,血清中抗ESAT-6特异性抗体IgG水平较对照组
（空质粒组和生理盐水对照组）明显升高;血清中IFN-γ水平、小鼠脾淋巴细胞增殖水平及产生IFN-γ的淋巴细胞数明显均高于对
照组（空质粒组和生理盐水对照组）。结论成功构建了结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6,该疫苗可有效诱导小鼠产生特异性细
胞免疫和体液免疫效应。
     

PvMSP1-19重组蛋白体外对间日疟患者外周血T细胞免疫功能的影响

目的 探讨PvMSP1-19重组蛋白对间日疟既往感染者外周血T淋巴细胞功能的影响。方法 间日疟既往感染者外周血单个核细胞(PBMC),在体外分别以PvMSP1-19重组蛋白和IL-2(刺激组)及IL-2(未刺激组)培养,培养第7d时刺激组细胞再用PvMSP1-19重组蛋白刺激24h,用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群分泌IL-4和IFN-γ的情况;并以CFSE标记法检测T淋巴细胞的增殖反应。结果 在分泌IL-4的淋巴细胞中,CD8⁺T细胞所占的比例刺激组(8.04%)明显高于未刺激组(3.46%); 而分泌IFN-(的CD8⁺T细胞在刺激组(0.82%)与未刺激组(1.05%)间并无显著性差别。分泌IL-4和IFN-(的CD4⁺T细胞比例在刺激组(1.81%,0.19%)与未刺激组(1.89%,0.05%)间并无显著性差异。此外,CD8⁺T细胞的增殖指数刺激组(5.65%)也明显高于未刺激组(3.69%)。结论 PvMSP1-19重组蛋白能显著诱导间日疟既往感染者外周血CD8⁺T细胞增殖和优先分泌IL-4。     

结核病DNA疫苗研究进展

结核病(TB)是由结核分枝杆菌(Mtb)引起的以呼吸道为主的一种传染性疾病,严重危害人类健康。随着医学科学技术的发展,人类对抗TB已取得了一定的成果,包括有效的治疗药物及疫苗的研发。但同时由于Mtb耐药的严重性、人类免疫缺陷性病毒( HIV)与Mtb的双重感染及流动人口的日益增多、吸毒等,加上不少国家对TB的忽视,TB在全球范围内呈回升趋势。世界卫生组织发布的《2012年全球结核病控制报告》[1]指出,虽然目前死于TB的人和患病的人都呈下降趋势,但每年仍有数百万TB新发病例,2011年全球新增TB患者870万人,死于TB的人数为140万人,其中新增TB患者中有3.7%患有耐多药TB,全球TB负担仍然十分严重。     

抗猪带绦虫六钩蚴兔血清的制备及重组质粒pcDNA3.1/TSO45-4B在小鼠骨骼肌的表达

目的:制备抗六钩蚴全虫可溶性抗原的兔血清,观察本室制备的猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因TSO45-4B的重组核酸疫苗pcDNA3.1/TSO45-4B经肌肉接种后在宿主体内的表达.方法:用次氯酸钠法孵化六钩蚴,Dot-B1ot、ELISA检测兔血清中特异性抗体及滴度;以pcDNA3.1/TS045-4B进行体内转染,继之免疫组化法观察其在鼠体骨骼肌的表达.结果:抗六钩蚴兔血清多克隆抗体制备成功,抗体效价为1:20 100;免疫组化染色后在重组质粒注射部位肌肉组织的肌纤维内显示阳性的棕黄色分泌颗粒.结论:重组质粒在小鼠骨骼肌内成功地表达为猪囊尾蚴病多基因DNA疫苗的研制提供了体内表达的依据之一.     

中心静脉导管相关性感染危险因素logistic回归分析

目的 探讨重症监护病房(ICU)患者中心静脉导管相关性感染(CRI)的危险因素,为CRI的预防治疗提供科学依据.方法 回顾性分析医院ICU 2008年3月-2011年3月共529例留置过中心静脉导管(CVC)的患者,计算感染率,筛选危险因素并用SPSS17.0软件以向前逐步回归法进行非条件logistic分析.结果 共有51例患者发生CRI,CRI发生率为9.6％;表皮葡萄球菌、大肠埃希菌分别占19.6％和17.6％,是最常见的病原菌;CRI与导管材料(x2=10.718,OR=2.722)、导管留置时间(x2=43.746,OR=7.538)、血清白蛋白(x2=29.218,OR=4.676)和APACHEⅡ评分(x2=40.984,OR=12.148)有相关性,差异有统计学意义(P＜0.01),与置管部位(x2=0.497,OR=0.796)和年龄(x2=0.083,OR=0.911)无关,差异无统计学意义.结论 减少导管留置时间、选用抗感染导管、提高血清白蛋白水平可以降低CRI的发生率.     

论性骚扰——性骚扰问题面面观

近来,国内媒体开始出现有关以性骚扰为案由提起诉讼的热门报道。性骚扰事件早已有之,而且发生率相当高,为何时至今日才有人提起诉讼并成为热门话题呢?这首先说明,人们的法律意识和性权利意识正在大大地增强,懂得了应当运用法律手段来维护自     

地塞米松对脓毒症大鼠急性肾功能衰竭核因子-KB和炎症细胞因子的影响

目的:研究脓毒症大鼠急性肾功能衰竭时肾组织核因子-KB(NF-KB)的活性、血清炎症细胞因子的变化以及地塞米松(DXM)对它们的影响.方法:雄性SD大鼠72只随机分成对照组(A组)、LPS模型组(B组)、DXM+LPS治疗组(C组),各组在2、4、6 h时观察8只大鼠肾组织大体外观及病理学变化,测定血肌酐浓度的变化,检测肾组织NF-KB的活性,以及用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和自介素-6(IL-6)的浓度.结果:B组肉眼观肾脏表面色泽暗红,可见包膜下点、片状出血;C组肾脏表面有轻度充血、水肿;和A组比较,B组肾脏病理呈急性炎症改变,C组肾脏病变较B组明显减轻.在4、6 h时点,B组和C组血肌酐浓度与A组比较明显上升(P<0.05),且B组血肌酐浓度高于C组(P<0.05).B组中肾组织NF-KB的活性、血清TNF-α和IL-6的浓度较A组明显升高(P<0.05),C组肾组织NF-KB的活性、血清TNF-α和IL-6的浓度较B组显著降低(P<0.05).结论:DXM可以通过抑制NF-KB的活性,下调炎症因子的表达,抑制中性粒细胞在肾脏的浸润而保护脓毒症大鼠的肾功能.     

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在糖尿病肾病早期诊断中的应用价值

目的：探讨检测血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatin C）在早期诊断糖尿病肾病（DN）中的应用价值。方法：健康体检者20例,糖尿病患者76例,用乳胶颗粒增强比浊法检测血清Cystatin C浓度,用全自动生化分析仪检测血尿素（Urea）、血清肌酐（Scr）浓度。根据肌酐清除率（Ccr）分成4组。结果：在Ccr≥70mL.min-1组中,Urea和Scr值均在正常范围内,Cys-tatin C异常率29%;在Ccr70~51mL.min-1组中,Cystatin C异常率73%,Scr异常率20%,Urea无异常;在Ccr50~31mL.min-1组中,Cystatin C异常率91%,Scr异常率36%,Urea异常率27%;在Ccr≤30mL.min-1组中,Cystatin C异常率100%,Scr异常率100%,Urea异常率87%。Ccr与Urea、Scr和Cystatin C呈负相关,Cystatin C与Urea和Scr呈正相关。结论：Cystatin C能敏感地反映早期肾功能损害,在糖尿病肾病的早期诊断和监控中具有应用价值。     

心力衰竭患者生活质量的研究

目的：探讨心力衰竭（HF）对生活质量的影响。方法：以明尼苏达生活质量表对66例HF患进行生活质量调查,结果：q检验表明,心功能IV级组的生活质量计分与Ⅲ级组,Ⅰ-Ⅱ级组间差异非常显（P＜0．01）,心功能Ⅲ组与Ⅰ－Ⅱ级组间差异不显（P＞0．05）。结论：HF患心功能级别与其生活质量有明显关系,心功能越差,其生活质量越差（P＜0．01）。     

气管内插管非计划拔管的临床分析

气管内插管的非计划拔管 (简称非计划拔管 )是ＩＣＵ中常见的一个问题。其发生率占机械通气患者的 3%～16 % [1 ,2 ] 。它可以是患者自行拔管 ,也可以是医疗护理中的意外拔除。由于过早拔管而终止患者所需要的机械通气支持可使病情恶化甚至死亡。我们回顾分析近年来发生的非计划拔管患者的临床特点及其与预后的相关性 ,以寻求改善预后的措施。对象与方法　 1996年 7月至 2 0 0 0年 8月本医学院两附属医院收住ＩＣＵ共 46 32例患者 ,其中行气管插管进行机械通气超过 48ｈ的患者 16 5 6例。经口气管插管 15 82例 ,经鼻插管 74例。记录非计划拔…