黄连HPLC Maxplot指纹图谱的建立

[目的] 以高效液相色谱-二极管阵列检测器（HPLC-PDA）MaxPlot色谱图为基础,建立黄连指纹图谱分析方法。[方法] 采用高效液相色谱（HPLC）法,色谱柱为Agilent SB-C18（4.6 mm×150 mm,3.5 μm）;流动相为乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液,线性梯度洗脱;210~400 nm波长下提取Maxplot色谱图。以黄连对照药材随行测定所得MaxPlot色谱图作为黄连的标准对照指纹图谱,通过相似度评价黄连药材质量。[结果] 结果显示,PDA MaxPlot模式下黄连指纹图谱共获得11个共有峰,较单一波长345 nm下多1个微量成分峰。12批样品指纹图谱与对照药材随行对照标准指纹图谱相似度达0.994以上。[结论] MaxPlot指纹图谱显著提高了黄连中各类成分检测的灵敏度,有效增加了黄连药材共有峰数量,为该药材多成分的质量控制提供了借鉴。     

1例血液滤过患者万古霉素持续滴注给药的病例分析

临床药师参与1例经血液滤过治疗患者的导管相关感染、肺感染的诊疗过程.分析万古霉素持续滴注的药代与药动学、不良反应的发生率、稳定性等方面因素.提出对于该患者建议使用持续滴注方式给药并同时进行血药浓度监测使患者的感染得到控制.通过探讨万古霉素持续滴注给药方式的适宜性,可为相关人群的安全用药提供科学依据.     

麻黄“去节、先煎去沫”理论及其解说的古今考证

通过查阅书籍文献,整理古往今来麻黄"去节、先煎去沫"理论的记载,总结各家对该理论机理的认识;同时收集有关含麻黄"先煎去沫"的方剂,并对其处方用量、煎煮方法、产地加工、功效应用作了详细的综述;最后针对"先煎去沫"对各类方剂的特点进行了归类总结,以分析该理论形成的可能机理,并提出解决这一问题的关键策略。     

麻黄药效物质基础及其安全性的研究现状

正麻黄为麻黄科植物草麻黄Ephedra sinica Stapf、中麻黄Ephedra intermedia Schrenk et C.A.Mey.或木贼麻黄Ephedra equisetina Bge.的干燥草质茎,具有发汗散寒,宣肺平喘,利水消肿的功效,用于治疗风寒感冒,胸闷喘咳,风水浮肿等~([1])。麻黄临床应用已有2000多年的历史,含麻黄或麻黄碱的处方或制剂有上百种,如:麻黄汤、麻黄杏仁甘草石膏汤、小儿清肺化痰口服液、风湿马钱片等。     

P2X7受体抑制剂通过神经连接蛋白负性调控癫痫发生过程

目的分析癫痫发作后24 h内P2X7受体(P2X7R)和神经连接蛋白(NLGN)的表达特点,并探讨P2X7R抑制剂负性调控癫痫发生过程的可能机制。方法将健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为6组,分别为1 h、3 h、6 h、12 h、24 h组及空白对照组(每组3只);除空白对照组外,其余组均制备为氯化锂-匹鲁卡品癫痫模型,Racine评分量表评级达4或5级为造模成功。依次于癫痫发作后1 h、3 h、6 h、12 h及24 h将各组大鼠处死,空白对照组与1 h组一同处理,采用蛋白免疫印迹法检测P2X7R、NLGN1及NLGN2在各组大鼠海马和内嗅皮质中的表达情况。进一步按随机数字表法将健康雄性SD大鼠分为干预组(造模前腹腔注射P2X7R抑制剂+载体)和对照组(造模前腹腔注射等剂量生理盐水+载体),每组3只。记录两组大鼠药物诱发癫痫的潜伏时间,以判断癫痫持续状态的严重程度;之后采用蛋白免疫印迹法检测两组大鼠海马和内嗅皮质中NLGN1、NLGN2的表达情况,以判断P2X7R抑制剂对其表达的影响。结果1 h、3 h、6 h、12 h及24 h组大鼠均造模成功。蛋白免疫印迹法结果显示,癫痫发作后1 h或3 h,P2X7R、NLGN1及NLGN2在癫痫模型海马和内嗅皮质中的相对表达量(海马:分别为1.194±0.053、2.367±0.336、2.319±0.234,内嗅皮质:分别为1.185±0.104、2.094±0.178、1.512±0.332)均高于空白对照组(海马:分别为1.014±0.046、1.108±0.101、1.134±0.177,内嗅皮质:分别为0.917±0.081、1.046±0.093、1.017±0.028;均P<0.05);且随发作时间延长,表达均有降低的趋势(均P<0.001)。干预组药物诱发癫痫的潜伏时间较对照组长[分别为(34.5±2.6)min、(20.0±3.1)min,P=0.029]。蛋白免疫印迹法检测结果显示,干预组海马中NLGN1和NLGN2的相对表达量(NLGN1:0.678±0.011,NLGN2:0.904±0.060)均低于对照组(NLGN1:1.031±0.039,NLGN2:1.135±0.079;均P<0.05),而内嗅皮质中NLGN1和NLGN2的相对表达量,两组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论癫痫发作后1 h或3 h内,P2X7R和NLGN蛋白在海马和内嗅皮质中的表达量均明显增加,且在发作后24 h内,随发作时间延长呈降低的趋势;P2X7R抑制剂可通过抑制海马区NLGN的表达进而负性调控癫痫发生过程。     

金诃子低温提取物的免疫活性

目的探讨改进炮制工艺低温提取金诃子不同部位成分的免疫活性。方法采用低温提取金诃子,将上清液用不同的分离方法及透析膜分离等技术处理,最后将不同部位的提取液冷冻干燥（具体提取工艺正在专利申请中）。采用红外光谱检测提取物的成分和含量。随机将小鼠分为阴性对照组（生理盐水）、阳性对照组（灵芝多糖）、金诃子提取物高、中、低剂量组,连续灌胃14 d。通过小鼠尾部末梢血制片检测淋巴细胞转化率,通过腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验检测巨噬细胞的吞噬活性。结果金诃子不同部位提取物的物理性状不同、成分相似,与阴性对照组及阳性对照组比较,提取物高、中、低剂量组小鼠淋巴细胞转化率均提高（P均〈0.01）,且不同剂量组巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率均提高（P均〈0.01）。结论金诃子不同部位的成分均有免疫活性。     

基于细胞周期相关基因的胶质瘤患者预后模型构建与验证

目的 探讨细胞周期相关基因在胶质瘤患者中的表达及预后价值。方法 利用CGGA数据库筛选与胶质瘤患者预后相关的细胞周期基因，并基于CGGA与TCGA中胶质瘤患者的临床数据，通过LASSO回归分析，构建预测患者生存情况的预后模型。根据计算公式，区分高低风险组患者，组间进行GSEA富集分析与ssGSEA免疫微环境分析。结果 筛选到10个与患者预后密切相关的细胞周期基因，LASSO回归分析纳入4个基因[细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2C（CDKN2C）、姐妹染色单体分离的PTTG1调控因子（PTTG1）、细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）、WEE1 G2检查点激酶（WEE1）]构建预后模型，计算公式为：风险值（risk socre）=（0.008）×CDKN2C表达量+（0.022）×PTTG1表达量+（0.031）×CDK2表达量+（0.127）×WEE1表达量。生存分析显示，高风险组患者生存率低于低风险组，ROC曲线表明，模型在CGGA与TCGA队列中，均具有较好的预测能力。GSEA富集分析显示，高风险组富集到多个细胞周期进程相关的信号通路，提示可能参与胶质瘤的恶性进程。免疫微环境分析表明，高风险组患者的免疫细胞浸润与免疫反应激活程度均高于低风险组。结论 基于细胞周期相关基因的预后模型可较好地应用于胶质瘤患者的预后预测，纳入的关键基因可能是胶质瘤治疗的可靠靶点。 [国际神经病学神经外科学杂志, 2023, 50(4): 15-24]     

四逆汤协同壮观霉素B1诱导PTEN与SUMO1解离治疗肺癌的研究

目的从蛋白质类泛素化修饰角度解析温里剂四逆汤协同壮观霉素B1抑制肺癌细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡的作用机制。方法实验分对照组、壮观霉素B1组、四逆汤组和联合药物组,于人非小细胞肺癌A549细胞株作用48 h后,采用Westernblotting法检测小泛素相关修饰蛋白-1(SUMO1)、10号染色体缺失磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)、磷酸化Akt(p-AKT)和Caspase-9的蛋白表达水平;MTT实验绘制细胞增殖曲线;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。结果壮观霉素B1和四逆汤均能够降低A549细胞共价态SUMO1和p-Akt水平,增加PTEN和活化Caspase-9的蛋白水平,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,壮观霉素B1和四逆汤联合药物组对细胞的抑制作用显著强于各单独给药组。结论四逆汤能够协同壮观霉素B1诱导PTEN与SUMO1解离,进而抑制肺癌细胞增殖、转移和促进细胞凋亡。     

多指标综合加权评分法优选清感退热汤加减方的提取工艺

目的:通过多指标综合加权评分法优选出清感退热汤加减方的提取工艺,为该方的后续研究与开发提供参考。方法:以葛根素、黄芩苷和汉黄芩苷的含量为指标,以加水量、提取时间和提取次数为考察因素,采用正交试验,应用综合加权评分法对实验数据进行分析,确定最佳提取工艺。结果:该加减方的最佳提取工艺为加水量为8倍量,回流提取0.5 h,提取3次。结论:本研究所优选的工艺稳定,合理可行,可作为清感退热汤加减方的提取方法。     

煎药机不同煎煮模式对痰湿瘀阻型中风病汤剂质量的影响

目的 基于自动煎药机的2种工作模式（常压/高压）,比较2种煎药模式下痰湿瘀阻型中风病汤剂质量间的差异,筛选该类处方的适宜煎煮模式。方法 采用全自动煎药机高压密闭和常压两煎模式制备汤剂。以总固体量、主要化合物的含量以及染菌数等为考察指标。主要化合物的含量采用HPLC测定,染菌数以中国药典附录下非无菌产品微生物限度检查方法进行考察。结果 经方差分析发现,常压煎煮制备的汤剂相对密度、总固体量及新橙皮苷含量均显著高于高压煎煮。而2种煎煮模式下各供试品中细菌数均<100个,霉菌和酵母菌数亦<100个。结论 经浸泡常压煎煮更适用于半夏白术天麻加减方的制备,为痰湿瘀阻型中风病汤剂的煎煮提供一定的数据支撑。