大肠腺瘤及癌变组织hMLH1和hMSH2表达与细胞凋亡的研究

目的:探讨hMLH1和hMSH2基因在大肠腺瘤及其癌变中的作用,及其表达对细胞凋亡的影响.方法:采用免疫组织化学染色检测63例大肠腺瘤、20例腺瘤癌变和20例大肠癌组织hMLH1和hMSH2表达;同时采用TUNEL法检测其细胞凋亡指数(AI).结果:大肠腺瘤、腺瘤癌变和大肠癌组织错配修复基因hMLH1、hMSH2的表达率逐渐降低,与正常大肠相比相差显著,随腺瘤不典型增生程度增加其阳性率逐渐降低;大肠腺瘤、腺瘤癌变和大肠癌中hMLH1表达缺失者细胞凋亡指数较显著高于其阳性者,且大肠腺瘤不典型增生Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级hMLH1-与hMLH1+组存在差异显著;而hMSH2-与hMSH2-间AI仅大肠腺瘤组有显著性差异,不典型增生Ⅰ、Ⅱ级组hMSH2-与hMSH2+间AI差异显著,而不典型增生Ⅲ级组hMSH2蛋白的表达阴性与阳性间AI无统计学差异.结论:DNA错配修复基因突变或功能缺失与大肠癌的发生有关,可能系大肠癌发生过程中的早期事件,且可能与大肠肿瘤细胞凋亡活性增加相关.     

糖皮质激素受体在结肠癌中的表达及临床意义

目的:研究糖皮质激素受体(GR)在结肠癌组织中的表达及其与核转录因子(NF-κB)和临床病理参数的关系。方法:运用免疫组化染色法检测61例结肠癌(包括42例不伴、19例伴淋巴结转移的原发灶)GR和NF-κB的表达情况。结果:在61例结肠癌组织中GR表达阳性率为57.4%(35/61),在高、中分化的结肠癌GR阳性率64.6%(31/48),明显高于低分化的30.8%(4/13);NF-κB在结肠癌中的阳性率为65.6%(40/61),与GR表达呈正相关(r=0.352,P=0.005)。结论:GR在结肠癌中表达可能与肿瘤的分化相关,与患者性别、年龄、肿瘤部位、Dukes分期及淋巴转移无关。GR将可能作为结肠癌病情发展和指导临床药物治疗的标记物之一。     

希罗达与草酸铂治疗老年中晚期胃癌疗效分析

目的观察希罗达与草酸铂治疗老年中晚期胃癌的近期疗效和不良反应。方法治疗组希罗达2000mg/m2·d分两次口服,1～14d、草酸铂85mg/m2静脉滴注第1d,21d为1周期,对照组将希罗达改为5-氟脲嘧啶600mg/m2·d静脉滴注,第1～5d,并加用亚叶酸钙增敏,其余同治疗组。结果两组均无CR,治疗组PR20例,总有效率55.6%,总临床受益69.4%;对照组PR18例,总有效率52.9%,总临床受益67.6%;不良反应主要是消化道反应、骨髓造血功能抑制、末梢神经炎、肝功能受损,治疗组分别是22例、17例、16例、11例,各占61.1%、47.2%、44.4%、30.6%;对照组分别是29例、30例、16例、13例,各占80.6%、88.2%、47.1%、38.2%。结论希罗达与草酸铂组治疗老年中晚期胃癌疗效较5-氟脲嘧啶组略高,不良反应轻,是一种安全、简便、有效、可行的治疗方案,但P〉0.05,无统计学差异。     

蛋白激酶C在结肠癌多细胞耐药中的实验研究

目的：探讨蛋白激酶C（protein kinase C,PKC）在结肠癌细胞多细胞耐药中的作用。方法：采用体外三维细胞培养的方法,通过应用不同剂量PKC抑制剂Staurosporine（SP）对三维（3D）培养结肠癌HT-29细胞药物敏感性、核因子-κB（NF-κB）活性及PKC活性的影响的研究,探讨PKC在结肠癌细胞群集耐药中的作用。结果：3D培养结肠癌细胞中PKC、NF-κB活性较二维（2D）培养细胞明显增高,氟尿嘧啶（5-FU）的药物敏感性降低;SP不同浓度处理HT-29球形细胞可抑制其PKC及NF-κB活性,对5-FU的药物敏感性增加,在一定浓度范围内,随着SP浓度的增加,抑制作用逐渐增强,存在量效关系。结论：PKC在结肠癌细胞群集耐药中有一定作用,抑制PKC活性,可增加结肠癌球形细胞对5-FU的敏感性。     

VEGF-C基因RNA干扰真核表达载体的构建及其效果鉴定

目的:构建VEGF-C基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体。方法:以VEGF-C为靶基因,以pGenSil-l质粒为载体,设计构建重组体,根据GenBank数据库提供的VEGF-C基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil-l中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析,将重组的pGenSil-VEGF-C质粒转染LOVO细胞48小时,检测其对LOVO细胞VEGF-C蛋白与mRNA表达的影响。结果:经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体显著降低Lovo细胞VEGF-C的蛋白和mRNA表达,重组载体构建成功。结论:利用RNAi技术可成功构建抑制VEGF-C表达的小干扰RNA重组体。     

抑制HK-Ⅱ对人结肠癌细胞增殖和化疗敏感性的影响及机制

目的：探讨抑制HK-Ⅱ对人结肠癌细胞增殖和化疗敏感性的影响及可能机制.方法：应用免疫组织化学法检测HK-Ⅱ在人结肠癌细胞中的表达;采用MTT法观察HK-Ⅱ抑制剂（3-BrPA）对人结肠癌细胞增殖的影响和化疗增敏效应;通过Hoechst 33258染色,用共聚焦激光扫描显微镜观察3-BrPA诱导的细胞凋亡;用流式细胞术、紫外分光光度计分别检测细胞死亡率、线粒体膜电位和线粒体膜通透转换孔（PTP）开放的变化.结果：HK-Ⅱ在人结肠癌细胞中阳性表达.3-BrPA能明显抑制人结肠癌细胞增殖,小剂量3-BrPA增加化疗敏感性.3-BrPA可诱导结肠癌细胞凋亡,引起线粒体膜电位下降和PTP开放.结论：抑制HK-Ⅱ可能是通过影响线粒体膜电位和PTP来发挥抗肿瘤作用.     

结肠癌组织中Tiam1的表达与淋巴管生成之间的关系

目的:我们的实验旨在探讨T淋巴瘤侵袭转移基因1(T-cell lymphoma invasion and metastasis1,Tiam1)与结肠癌淋巴管生成的关系。方法:应用SP免疫组化法检测50例经4%甲醛固定、石蜡包埋结肠癌组织中Ti-am1、VEGF-C/D以及淋巴管密度(LMVD)的表达情况。结果:Tiam1阳性表达组VEGF-C阳性率为64.3%,Ti-am1阴性表达组VEGF-C阳性率为25.0%,二者差异有统计学意义,P=0.039;Tiam1阳性表达组LMVD为11.35±3.34,Tiam1阴性表达组LMVD为7.38±2.27,二者差异有统计学意义,P=0.002。结论:Tiam1过量表达可能与结肠癌淋巴管生成有关。     

鼻咽癌误诊为颅底斜坡脊索瘤1例

<正>病人,男,41岁。头痛、视物模糊4月余。曾于外院行MRI检查示:颅底斜坡区见2 cm×1.8 cm×1.6 cm占位病变,T1WI信号不均匀,以低信号为主,斜坡皮质骨信号中断,髓质骨高信号区消失,代之以不均匀信号的软组织肿块影,T2WI表现为不均匀高信号,诊断为颅底斜坡脊索瘤,     

shRNA真核表达质粒介导的RNA干扰对人结肠癌LoVo细胞mTOR基因表达的抑制作用

目的探讨shRNA真核表达质粒介导的RNA干扰技术对人结肠癌LoVo细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）基因表达的抑制作用。方法合成编码shRNA的特异性DNA序列，连接到质粒pGenesil-1，采用脂质体Lipofectamine^TM 2000转染LoVo细胞，G418筛选4周。根据转染质粒的不同，实验分为3组：A组（正常对照组）为未转染的正常培养LoVo细胞，B组（阴性对照组）为转染pGenesil-1空载体质粒，C组（阳性实验组）为转染质粒pGenesil-1-mTOR。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测LoVo细胞mTOR基因mRNA表达，免疫印迹（Western blot）法检测mTOR蛋白表达。结果双酶切产物琼脂糖凝胶电泳显示，重组质粒pGenesil-1-mTOR和空载体质粒pGenesil-1分别切出一条410、350bp大小的片段。G418筛选的转染细胞在倒置荧光照相显微镜下可观察到绿色荧光。C组LoVo细胞mTOR基因mRNA表达水平明显低于A组（P〈0.05），表达抑制率为73．0％。C组LoVo细胞mTOR蛋白表达水平明显低于A组（P〈0．05），表达抑制率为72．5％。结论shRNA真核表达质粒介导的RNA干扰可明显抑制人结肠癌LoVo细胞mTOR基因表达。     

T管引流胆汁回输1例失败教训

患某,女性,７０岁,因右上腹疼痛１年余,经Ｂ超证实为胆总管及左肝内胆管结石。术中切开胆总管上段取出一２ｃｍ×１８ｃｍ结石并于左肝内胆管中取出两粒黄豆大结石,胆总管内经约０８ｃｍ,术中将一１４号导尿管经胆总管十二指肠乳头插入十二指肠内,连同“Ｔ”型管引出体外,作胆汁回输备用。术后前三天“Ｔ”管引流,胆汁约７０ｍｌ／日,术后第四天,将“Ｔ”管与导尿管相连通,次日见胆汁从引流口周围渗出,且出现右上腹胀痛,并有轻微腹膜刺激症。即解除“Ｔ”管与导尿管的连接,接引流袋引流,见引流胆汁约５００～７００ｍｌ…