新生儿甲低筛查脐足血相关性分析

目的 分折甲低筛查中脐足血相关性，评价脐血代替足血的可靠性。方法 采用Finland labsystems公司Neonatal hTSH ELISA试剂盒和本实验室TSH检测试剂盒两种试剂盒对天津市226例脐足血分别进行三次测定。结果 经统计三次测定结果的相关系数r分别为0．176，0．325，0．14，P＜0．05。结论 脐血不能替代足血进行甲低筛查。     

壳聚糖与重组人骨形成蛋白2复合物体外成骨作用的研究

目的探讨复合重组人骨形成蛋白2(recombinanthumanbonemorphogeneticprotein2,rhBMP-2)的壳聚糖-明胶支架的体外成骨作用。方法将rhBMP-2与壳聚糖-明胶支架复合,按2×104/ml的密度接种成骨细胞系或成肌细胞系至rhBMP-2复合材料上,以及无rhBMP-2复合的对照材料上。A组(2T3成骨细胞接种组),其中实验A组复合有rhBMP-2的材料14块,分别于接种培养第3、7、14和21天各取3块,以管家基因β-tubulin为内参照,RT-PCR行半定量分析,测定骨钙素基因表达水平,余2块于第14天终止培养,茜素红-S染色观察钙盐沉积情况;对照A组未复合rhBMP-2的材料5块,接种培养至14d终止,其中3块用于测定骨钙素基因表达,2块测定钙盐沉积。B组(C2C12成肌细胞接种组),实验组及对照组情况、培养时间及检测指标同A组。另取接种有rhBMP-2的材料2块接种2T3成骨细胞,培养3d后扫描电镜观察细胞与材料的黏附情况。结果A组培养3d,扫描电镜可见成骨细胞紧密黏附于多孔材料网表面,生长状态良好。实验A组成骨细胞中骨钙素基因的表达为1.28±0.17,对照A组14d为0.56±0.09,表明复合rhBMP-2可促进材料中骨钙素基因表达,两者差异有统计学意义(P<0.01);rhBMP-2还可诱导不表达骨钙素基因的C2C12成肌细胞出现基因表达,B组培养21d,实验B组为0.58±0.13,对照B组为0,差异有统计学意义(P<0.01)。茜素红-S染色可见,A组材料网络内均有不同程度的钙盐沉积。接种相同的细胞时,复合有rhBMP-2的材料中有更多的钙盐沉积。结论复合有rhBMP-2的壳聚糖-明胶人工骨支架材料在体外具有良好的诱导成骨能力。     

pUC-T载体的构建

目的：构建具有较高连接效率和检出效率的克隆载体。方法：在质粒pUC18的多克隆位点内引入特异的DNA片段，酶切后得到3’末端具有突出T碱基的线性化pUC—T载体。结果：经连接效率实验，此载体具有很高的重组率。结论：成功获得了pUC—T载体；利用了质粒pUC18的多克隆位点，为亚克隆提供了丰富的酶切位点；具有蓝白斑筛选标记，提高了重组子的检出效率。     

2型糖尿病肥胖患者血清瘦素及其相关因素的研究

目的 :通过对2型糖尿病肥胖患者与健康单纯性肥胖对照者之间的比较 ,分析血清瘦素与多种影响因素的关系。方法 :对样本人群进行流行病学问卷调查、体检并测定血糖、血脂、胰岛素和血清瘦素等生化指标 ,以病例对照研究方法分析。结果 :2型糖尿病肥胖患者的血清瘦素水平为 (12.06±6.43)ng/ml,健康单纯性肥胖对照者为(12.94±6.69)ng/ml。无论有无糖尿病女性瘦素水平约是男性的3倍。结论 :2型糖尿病肥胖患者与其对照者间的血清瘦素不存在显著性差异 ,可能与患者坚持治疗病情控制良好有关。血清瘦素受到性别、体脂、血脂和饮食等多方面因素的共同影响 ,高密度脂蛋白胆固醇可能是其保护因素     

碘过量对大鼠脑神经元特异性烯醇化酶基因表达的影响

目的 观察碘过量对大鼠脑神经元特异性烯醇化酶(NSE)基因表达的影响.方法 选用150只断乳1月龄的健康Wistar大鼠,按5×2析因设计分为10组.每组15只.按摄碘量分为正常碘(NI)、5倍碘(5HI)、10倍碘(10HI)、50倍碘(50HI)、100倍碘(100HI)5个水平,饲喂时间为3、6个月.实验期满后,取全部大鼠血样,用放射免疫分析方法测定血清总甲状腺素(TT4)、总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、反三碘甲状腺原氨酸(rT3)水平;取大鼠脑组织,采用RT-PCR方法检测脑组织NSE mRNA的表达.结果 各碘水平组TT4、TT3变化明星(F值分别为18.867、27.287,P<0.01),时间和碘水平对TT4存在交互作用(F=2.486,P<0.05);100HI组TT4、TT3均低于同时间NI、5HI、10HI、50HI组(P均<0.01).血清FT4、FT3、rT3水平,在3、6个月时变化明显(F值分别为4.968、27.046、59.776,P<0.05或<0.01),各碘水平组间变化明显(F值分别为33.058、28.420、17.482,P均<0.01),时间和碘水平对FT3、rT3存在交互作用(F值分别为6.894、5.233,P均<0.01);100HI组FT4、FT3、rT3低于同时间其他组(P<0.01或<0.05).各碘水平间NSE mRNA变化明显(F=29.006,P均<0.05);3、6个月100HI组大鼠脑中NSE mRNA水平(0.61±0.19、0.61±0.22),与NI(0.73±0.13、0.72±0.26)、5HI(0.72±0.15、0.72±0.16)、10HI(0.73±0.32、0.70±0.13)、50HI(0.71±0.18、0.69±0.31)组比较降低(P均<0.05).3、6个月时血清FT3、FT4与NSE mRNA水平均存在相关关系(r值分别为0.987、0.969及0.890、0.910,P均<0.05).结论 NSE基因的表达对过量碘摄入呈现出耐受性且有一定的阈值;当过量碘摄人为正常100倍时,在转录水平影响NSE基因的表达,表现为抑制NSE mRNA水平;在过量碘引发NSE转录减低的调控中,FT4和FT3可能均起着重要作用.     

1型糖尿病患者血清中抗IA-2与抗GAD65抗体的比较

目的：研究成人1型糖尿病患者血清中抗IA-2抗体和抗GAD65抗体的水平并进行分析。方法：用ELISA法检测了48例20-45岁，病程小于2年的1型糖尿病患者组血清中的IgG型抗IA-2抗体和抗GAD65抗体，并以110例正常人血清作对照组。结果：患者组血清中抗IA-2抗体和抗GAD65抗体的水平与对照组差别均有统计学意义，而且患者组血清中抗IA-2抗体较抗GAD65抗体有更高的阳性率。结论：成人新发1型糖尿病患者血清中IgG型抗IA-2抗体和抗GAD65抗体均有不同程度明显升高，而且对两者进行联合检测会更有助于临床上1型糖尿病的早期诊断。     

人骨保护素成熟肽表达载体的构建、表达及重组蛋白免疫学鉴定

目的：构建人骨保护素(OPG)成熟肽cDNA重组表达载体，实现其在毕赤酵母中的高效表达。方法：由人成骨细胞提取总RNA，经RT—PCR扩增得到人0PG成熟肽cDNA，克隆入分泌型表达载体pPIC9K，转化酵母细胞，G418筛选多拷贝整合的重组子进行甲醇诱导表达，产物行Western blottmg鉴定。结果：成功构建了人OPG成熟肽表达载体，该载体能在酵母细胞中获得分泌表达，诱导96h的表达量占上清总蛋白的30％。重组蛋白相对分子质量约55ku，可被0PG抗体识别。结论：重组人OPG成熟肽在酵母表达系统获得较高水平表达，为进一步研究开发基因工程药物准备了条件。     

ELISA法与DELFIA法测定新生儿TSH的结果分析

目的比较双位点酶免法（Ｔｗｏ－ｓｉｔｅＥＬＩＳＡ）和时间分辨荧光免疫法（ＤＥＬＦＩＡ）测定新生儿ＴＳＨ的结果。方法采用芬兰进口试剂盒测定２１８例足月正常新生儿足血和脐血的成对ＴＳＨ值。结果ＥＬＩＳＡ法和ＤＥＬＦＩＡ法测定的脐血ＴＳＨ值有明显的相关性,其相关系数ｒ＝０．９１（ｔ＝３２．４１,Ｐ＜０．００１）;两种方法测定的足血ＴＳＨ值也有良好的相关性,其相关系数ｒ＝０．７８（ｔ＝１８．４０,Ｐ＜０．００１）;ＥＬＩＳＡ法测定值在足血和脐血间的相关系数却甚低,ｒ＝０．２１（ｔ＝３．１７,Ｐ＜０．０１）;ＤＥＬＦＩＡ法测定值在两者间的相关系数也很低,ｒ＝０．１５（ｔ＝２．２４,Ｐ＜０．０５）。结论ＥＬＩＳＡ和ＤＥＬＦＩＡ两种方法测定的脐血和脐血之间、足血和足血之间均呈现良好的正相关,但两种方法各自测定的脐血和足血之间相关性均不明显