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61.
摘要:目的 探讨在体外环境中,子宫内膜癌细胞高表达白血病抑制因子(LIF)后,对顺铂及紫杉醇的敏感性变化。方法 利用慢病毒在子宫内膜癌细胞(HEC-1B和RL95-2)中建立稳定过表达LIF的细胞模型,以空载体慢病毒感染细胞作为对照组,用逆转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验验证LIF的表达。利用CCK-8观察LIF过表达对癌细胞活性的影响,利用Annexin V-FITC/PI法和JC-1法观察LIF过表达后,顺铂及紫杉醇诱导癌细胞凋亡及线粒体膜电位下降的情况。利用免疫印迹观察LIF过表达后,癌细胞中Bcl-2家族及STAT3通路蛋白的表达。利用荧光素酶报告基因活性检测观察LIF过表达后,癌细胞STAT3转录活性的变化。在过表达LIF的两子宫内膜癌细胞中沉默STAT3,以无义小干扰RNA序列转染细胞为对照组,观察顺铂及紫杉醇对细胞的杀伤作用。结果 过表达组的子宫内膜癌细胞(HEC-1B和RL95-2)较对照组表达更高水平的HLFmRNA及分泌更多的HLF蛋白(P<0.05)。LIF的过表达不影响两子宫内膜癌细胞的体外增殖活性(P>0.05),但能增加癌细胞在顺铂及紫杉醇作用下的存活率和线粒体膜电位(P<0.05)。过表达 LIF 能增加两子宫内膜癌细胞中 Bcl-2、Bcl-xL 和p-STAT3的水平,降低Bax和Bad的水平,而不影响STAT3的水平;同时STAT3的转录活性增强(P<0.05)。在稳定表达LIF的两子宫内膜癌细胞中,沉默STAT3能显著增加顺铂及紫杉醇对细胞的杀伤作用(P<0.05)。结论 在体外环境中,稳定高表达LIF能增强宫内膜癌细胞对顺铂及紫杉醇的抵抗。 相似文献
62.
63.
大学药学专业的基础有机化学实验课在整个有机化学教学中占有相当重要的比重.有机化学实验按照类型可分为基础技能操作、有机化合物的制备(有机合成)、天然产物的提取以及化合物性质的鉴定[1].其中有机物制备对学生而言是实验综合技能的体现,既考查了学生的理论知识,又衡量了学生的操作技能.在有机合成过程中如果能规范操作,养成良好的习惯,对学生进入高年级后进行药物合成、毕业设计以及以后药厂相关领域工作都有着重要的指导意义.根据以往学生在有机物制备过程中的一些问题,结合教学体会,就学生在有机化合物制备实验中影响实验进展的因素进行如下分析. 相似文献
64.
65.
目的 探讨结直肠癌前哨淋巴结定位和检测CK20 mRNA的意义.方法 对49例结直肠癌患者术中注射美蓝定位前哨淋巴结,用一步法Real-time RT-PCR检测前哨淋巴结CK20 mRNA表达以确定转移病灶.结果 49例结直肠癌患者中成功确定了前哨淋巴结47例,共115枚,每例1~5枚,平均2.4枚/例,检出成功率为95.92%.47例患者前哨淋巴结中,常规病理学证实有11例为肿瘤细胞所浸润,阳性检出率为23.40%;一步法Real-time RT-PCR检测有20例CK20呈阳性表达,阳性检出率为42.55%.两种方法的阳性检出率有显著差异(P<0.05).结论 利用一步法Real-time RT-PcR技术检测CK20 mRNA表达可明显提高结直肠癌前哨淋巴结转移病灶的检出率. 相似文献
66.
为了评价转染血管紧张素Ⅱ1型受体反义核苷酸对血管外膜成纤维细胞血管紧张素Ⅱ受体亚型mRNA表达,及细胞内核酸蛋白质的合成水平的作用。采用逆转录-聚合酶链反应克隆血管紧张素Ⅱ1型受体cDNA序列(476bp),将克隆cDNA反向插入PLXSN,构建一完整的含血管紧张素Ⅱ1型受体的质粒,并转染入培养的血管外膜成纤维细胞,逆转录-聚合酶链反应和免疫印迹鉴定其转染后血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA和蛋白表达。比较血管紧张素Ⅱ10^-7mol/L刺激24h后的转染及非转染的血管外膜成纤维细胞血管素Ⅱ受体各亚型mRNA表达、细胞内核酸蛋白质的合成水平。转染组血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA和蛋白表达量显著减少,对照组相比差异显著(P<0.01)。血管紧张素Ⅱ10^-7mol/L刺激24h后,与对照组血管外膜成纤维细胞相比,转染组血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达明显减少,血管紧张素Ⅱ受体Ⅱ型mRNA表达明显增加(P<0.01),但两组间核酸和蛋白合成均无显著差异(P>0.05)。提示反义核苷酸封闭后,血管外膜成纤维细胞血管紧张素Ⅱ1型受体mRAN表达显著抑制,同时血管紧张素Ⅱ受体Ⅱ型mRNA上调。单纯封闭血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA并不能有效阻断血管紧张素Ⅱ介导的血管外膜成纤维细胞生长。 相似文献
67.
目的检测体外授精过程中精液和经密度梯度离心后精子悬液中弹性硬蛋白酶(PMN-Elastase)的浓度与精子DNA的完整性,探讨密度梯度离心对精浆中PMN-Elastase的作用和精子DNA的损伤情况。方法选择我中心64例进入体外受精周期患者,其中根据女方取卵手术当天男方精液检测PMN—Elastase不同浓度将患者分为A组(15例):含量1000ng/ml(显性感染);B组(20例):含量290-1000ng/ml(隐性感染);C组(20):含量290ng/ml(正常水平),分析和比较处理前后三组精子悬液中PMN-Elastase的浓度和DNA完整率。结果三组处理后的精子悬液中A组PMN-Elastase前后浓度没有明显区别(P0.05),B组和C组浓度明显下降(P0.05);三组处理后的DNA完整率均明显提高(P0.05),经过长时间孵育均明显降低(P0.05)。结论高浓度PMN-Elastase的精液经密度梯度离心后的精子悬液中PMN-Elastase浓度并不增加,精子活力和DNA完整率增加,可能不影响受精结局。 相似文献
68.
目的探讨血清抑制性G蛋白α亚基-2(Giα-2)水平在2型糖尿病合并不同分级高血压患者中的改变及临床意义。方法选取197例2型糖尿病患者作为研究对象,分为单纯2型糖尿病(DS)组45例,2型糖尿病合并高血压1级(DH1)组47例,2型糖尿病合并高血压2级(DH2)组51例,2型糖尿病合并高血压3级(DH3)组54例,另选取40例健康人作为健康对照(NS)组。应用酶联免疫吸附法测定血清Giα-2水平。多元线性回归法分析Giα-2水平与各影响因素的相关性。结果 DS组Giα-2水平较NS组降低,DH1、DH2、DH3组Giα-2水平均高于DS组,随着血压增加,Giα-2水平逐渐增加,其中DH3组最高(P0.05)。多元线性回归分析结果显示Giα-2水平与收缩压呈正相关(r=0.54,P0.05),进一步多元回归分析提示收缩压是Giα-2水平的独立影响因素。结论 Giα-2可能对2型糖尿病合并高血压的发生有一定的影响。 相似文献
69.
目的:总结腹腔镜膀胱全切回肠(Bricker)膀胱术与原位回肠(Hautmann)新膀胱术治疗浸润性膀胱癌的经验及近期疗效。方法该院2010~2014年施行腹腔镜Bricker膀胱术74例,Hautmann新膀胱术30例,回顾性分析比较两组患者手术时间、出血量等术中情况、术后肠道功能恢复、术后并发症及术后肿瘤复发转移等临床资料。结果两组在平均手术时间、术中出血量、术中输血率、盆腔淋巴结清扫数目、术后住院时间等方面差异无统计学意义(P>0.05)。两组淋巴结阳性共8例(7.8%),合并前列腺癌3例(2.9%),无切缘阳性病例。Bricker膀胱术组、Hautmann新膀胱术组术后肠道功能恢复时间分别为(4.2±1.4)、(5.3±2.2)d ,P=0.002,并发症发生率分别为31.9%(23例)、53.3%(16例),P=0.043。 Hautmann新膀胱术组患者术后6个月白天和夜间尿控分别为76.9%、57.7%,术后12个月白天和夜间尿控分别为90.9%、81.8%。 Hautmann新膀胱术组术后2例(7.7%)复发转移,Bricker膀胱术组术后9例(14.1%)复发转移。结论 Bricker膀胱术和Hautmann新膀胱术具有相似肿瘤根治效果,但Hautmann新膀胱术患者术后生活质量更高。 相似文献
70.
目的:检测人类婆罗双树样基因-4(SALL4)在胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法采用逆转录 PCR(RT-PCR)、Westrrn blot 和免疫组织化学方法检测91例胃癌组织和37例正常胃黏膜中 SALL4的表达,分析 SALL4与胃癌临床病理特征之间的关系。结果SALL4在胃癌组织中阳性表达率为74.7%,显著高于正常胃黏膜组织阳性表达率18.9%(P <0.05),而且随着胃癌分化程度的降低,SALL4的阳性率和表达强度逐渐增高;胃癌组织 SALL4 mRNA 和蛋白的表达水平均显著高于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P <0.05);在胃癌组织中 SALL4的阳性表达与肿瘤淋巴结转移(P =0.001)、分化程度(P =0.029)和浸润深度(P =0.050)密切相关。结论SALL4基因在胃癌组织中高表达,与淋巴结转移、分化程度和浸润深度密切相关,可能在胃癌发生、发展中起重要的作用。 相似文献