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目的 探讨微小RNA-216a(miR-216a)对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法 收集2019年5月至2021年5月于河北北方学院附属第一医院行手术治疗的82例宫颈癌患者的宫颈癌组织和癌旁正常组织,用实时荧光定量PCR(qRT-RCR)法检测组织中miR-216a和钙激活中性蛋白酶6(CAPN6)表达。转染miR-216a模拟物(miR-216a mimic)、CAPN6小干扰RNA(si-CAPN6)或共转染miR-216a mimic与CAPN6过表达质粒(pcDNA-CAPN6)至宫颈癌HeLa细胞。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测CAPN6、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)的蛋白表达情况,并进行统计分析。结果 宫颈癌组织中miR-216a mRNA相对表达量明显低于癌旁正常组织(t=52.968,P<0.05),而CAPN6 mRNA和CAPN6蛋白相对表达量均明显高于癌旁正常组织(t值分别为2... 相似文献
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目的 分析97例年轻女性乳腺癌(年龄≤35岁)患者临床病理特征和预后因素.方法 2003年1月~2008年4月某院术后病理确诊的年轻乳腺癌患者97例.观察患者的生存与复发情况,分析其临床病理特征和预后因素.结果 至2011年4月,全部患者3y-OS和3y-DFS分别为73.2%(71例)和64.9%(63例).肿瘤大小为T1、T2、T3+T4患者的3y-OS和3y-DFS分别为92.9%、56.8%、63.6%和83.3%、52.3%、45.5% (P=0.001,P=0.002);腋淋巴结转移为No、N1、N2+N3患者的3y-OS和3y-DFS分别为87.5%、64.3%、52.4%和79.2%、57.1%、42.9% (P=0.001,P=0.002);临床分期为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者的3y-OS和3y-DFS分别为96.9%、62.5%、60.0%和87.5%、60.0%、44.0% (P=0.001,P=0.001);ER阳性和ER阴性患者的3y-OS和3y-DFS分别为84.2%、57.5%和75.4%、50.0% (P=0.005,P=0.017).多因素Cox回归分析显示,ER阴性较ER阳性患者的OS(RR=4.534,P=0.000)和DFS(RR=3.754,P=0.000)均差.结论 ①临床分期、肿瘤大小、腋淋巴结转移情况、ER状态与预后相关;②ER阴性可作为独立的预后危险因素. 相似文献
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目的 探讨舒芬太尼对宫颈癌细胞 SiHa 自噬、 凋亡及细胞增殖的影响。 方法 采用 CCK8 法检
测舒芬太尼梯度浓度 (3. 125、 6. 25、 12. 5、 25、 50、 100、 200、 400、 800 nmol / L) 作用下宫颈癌细胞 SiHa
细胞活力, 选取 4 个舒芬太尼作用浓度 (0、 25、 50、 100 nmol / L) 处理 SiHa 细胞 24 h, 采用流式细胞法、
克隆形成实验检测 SiHa 细胞凋亡及增殖情况, 免疫荧光法检测各组细胞 LC3 水平, 采用 Western 印迹检测
自噬相关蛋白 LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ、 Beclin1、 ATG7 与增殖、 凋亡相关蛋白 P21、 Survivin 水平, 采用 RT-PCR 检测
细胞增殖相关基因 Ki67、 PCNA 表达水平。 结果 随着舒芬太尼处理浓度的增加, SiHa 细胞活力逐渐降低。
50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 SiHa 细胞的 LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ、 Beclin1、 ATG7 水平显著高于 0 nmol / L 舒芬太
尼处理, 免疫荧光检测结果显示 50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 LC3 荧光信号高于 0 nmol / L 舒芬太尼处
理, 流式细胞仪检测结果显示 50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 SiHa 细胞凋亡高于 0 nmol / L 舒芬太尼处理。
克隆形成实验结果显示 50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 SiHa 细胞克隆形成率降低, Survivin 水平与 Ki67、
PCNA 表达水平降低, 而 P21 水平升高。 结论 舒芬太尼对宫颈癌细胞自噬、 凋亡有促进作用, 对细胞增
殖有抑制作用, 可能与调节细胞自噬、 凋亡、 增殖相关蛋白或基因水平有关。 相似文献
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目的:探讨三结构域蛋白14(TRIM14)对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮—间充质转化(EMT)的影响及相关作用机制。方法:收集40例宫颈癌患者的宫颈癌组织及癌旁正常宫颈组织标本,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测TRIM14基因表达。体外培养宫颈癌HeLa细胞,将TRIM14小干扰RNA(si-TRIM14)转染至HeLa细胞。采用CCK-8法检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室法检测细胞侵袭,Western blotting法检测EMT相关蛋白和单磷酸腺苷蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路相关蛋白表达。结果:宫颈癌组织中TRIM14 mRNA表达水平显著高于癌旁正常宫颈组织(P<0.05)。与si-NC组比较,si-TRIM14组细胞增殖活性、细胞迁移率、侵袭细胞数目均降低,E-cadherin蛋白表达量升高,N-cadherin、Vimentin、Snail1蛋白表达量均降低(P<0.05)。si-TRIM14组细胞中p-AMPK/AMPK比值高于si-NC组,pmTOR/mTOR比值低于si-NC组(P&l... 相似文献
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张贤雨马欢席强张志林 《中国免疫学杂志》2023,(7):1457-1462
目的:探索pH敏感型纳米颗粒(DGNPs)是否可以实现化疗药物阿霉素(Dox)和免疫细胞因子GM-CSF的共递送,并在肿瘤局部释放药物,实现对宫颈癌的协同抗肿瘤效应。方法:采用纳米沉淀法制备Dox纳米粒,然后用无溶剂包埋方法负载GM-CSF。电镜观测纳米颗粒DGNPs形态;HPLC检测Dox从DGNPs中的释放,ELISA检测GM-CSF从DGNPs中的释放;使用活体成像技术观测DGNPs在荷瘤小鼠体内的生物分布;利用小鼠移植瘤模型检测DGNPs的体内抑瘤活性;通过免疫组化检测CD4+和CD8+T细胞的肿瘤浸润情况;Western blot检测肿瘤组织中caspase-3的表达情况。结果:成功制备DGNPs,电镜观测其具有均匀的纳米颗粒形态;DGNPpH在pH=6.5时Dox的释放量明显高于pH=7.4时的释放量,但pH对DGNPpH和DGNPnon释放GM-CSF无明显影响;活体成像显示DGNPpH显著聚集于肿瘤组织;小鼠移植瘤模型显示,相较于回输DGNPnon组及Dox与GM-CSF联合回输组,DGNPpH抑制肿瘤生长的能力更强(P<0.01),且CD4+和CD8+T细胞的浸润增强(P<0.0001),肿瘤组织中c-caspase-3表达增强(P<0.0001)。结论:DGNPpH可以方便地实现Dox和GM-CSF的共递送,在宫颈癌肿瘤组织中有效富集,并展现出显著的抑制肿瘤生长及增强抗肿瘤免疫反应能力。因此,DGNPpH有可能在今后发展成为一种针对宫颈癌的可靠的免疫化疗策略。 相似文献