血糖、糖化血红蛋白检测在临床疾病诊断中的价值

目的 探讨血糖、糖化血红蛋白检测在临床疾病诊断中的价值.方法 将入院的患者分组(糖尿病应激组、非糖尿病应激组,健康对照组),进行血糖和糖化血红蛋白的检测.结果 糖尿病应激组和非糖尿病应激组随即血糖均有升高,两者差异有显著性;两组空腹血糖均明显升高与健康对照组相比较差异均有高度显著性,糖化血红蛋白检测,糖尿病应激组显著高于非糖尿病应激组和健康对照组(P<0.01),而非糖尿病应激组和健康对照组差异无统计学意义(P>0.05).结论 血糖与糖化血红蛋白联合检测不仅可以用在在糖尿病确诊中,对应激患者高血糖的鉴别,也具有较高的临床应用价值.     

21-羟化酶缺陷症基因诊断方法的建立及应用

目的 建立21-羟化酶缺陷症的基因诊断方法并评价其临床应用价值.方法 收集9例肾上腺皮质增生症患儿血样,采用全长基因直接测序法分析21-羟化酶编码基因CYP21A2的点突变,同时采用多重连接依赖探针扩增技术和位点特异性PCR-酶切多态分析大片段的CYP21A2基因缺失或(和)转换突变.同时对患儿的双亲也进行了基因检测.结果 9例患儿共发现点突变5种,分别为IVS2 13A/C＞G(9个等位基因)、p.Arg356Trp(1个等位基因)、Cluster E6(1个等位基因)、p.Gln318X(1个等位基因)和Prom cony(1个等位基因).除Prom conv不能明确其功能外,其它4种均为致病突变.检测到的基因缺失或(和)转换突变有两种,一种为大片段缺失,导致CYP21A2基因单拷贝缺失,共发现3例患者(3个等位基因),另一种为CYP21A2基因重排后形成的CYP21 A1 P/CYP21A2嵌合基因,共发现3例患者(3个等位基因),并应用建立的基因诊断方案确定了全部患者的基因型.所有的突变均遗传自亲代.结论 建立了21-羟化酶缺陷症的基因诊断方法.该方法不仅能特异性地检测点突变,而且能够检测大片段的缺失或(和)转换突变,因此具有较高的临床应用价值.     

磁珠法DNA提取技术在多重连接依赖探针扩增检测中的应用

目的探讨磁珠法DNA提取技术在多重连接依赖探针扩增(MLPA)检测样品制备中的应用价值。方法分别用半自动磁珠法和手工离心柱法提取1例21-羟化酶缺乏症患者和16例健康男性外周血、16例羊水细胞标本的基因组DNA,用MLPA法检测CYP21A2基因拷贝数,比较两种方法制备DNA的质量及MLPA结果。用磁珠法提取200例羊水细胞DNA,MLPA法检测染色体非整倍体异常表达情况。结果磁珠法提取外周血DNA的浓度和总量均高于离心柱法(P0.05)。两种方法提取羊水DNA浓度相当,磁珠法所得总量较高(P0.05)。21-羟化酶缺乏症患者CYP21A2基因拷贝数比值接近0.5。200例羊水标本中检出正常二倍体188例,21三体9例,18三体2例,特纳(Turner)综合征(45,X)1例,与核型分析结果一致。结论磁珠法制备的外周血和羊水细胞DNA适用于MLPA检测,具有较高的应用价值。     

全血铅检测的质控物制备与质量控制

目的：通过自制血铅质控物及室内质量控制,监控血铅检测结果。方法：抽取健康人静脉全血,经抗凝处理后分装并低温保存。每次血铅检测时取一支复溶,随待测标本检测,常规用于血铅检测的室内质量控制。结果：自制全血质控物稳定、可靠。结论：自制全血质控物用于血铅检测,方法简单易行,适合基层医疗卫生单位血铅检测的质量控制。     

腹主动脉异常频谱对主动脉缩窄及主动脉弓离断的间接诊断价值

目的探讨膈肌水平腹主动脉异常频谱对主动脉缩窄及主动脉弓离断的间接诊断价值。方法对17例腹主动脉异常频谱患儿和26例健康小儿行超声心动图检查,分别测量其收缩期峰值流速(PSV)和血流加速时间(AT);17例异常频谱患儿于超声检查1周内行相关血管造影检查。结果 17例患儿腹主动脉异常血流频谱均表现为低流速低搏动的连续频谱,其中主动脉缩窄13例,主动脉弓离断4例,均经相关血管造影证实。异常频谱患儿PSV和AT分别为(0.46±0.07)m/s和(0.25±0.09)s,健康小儿PSV和AT分别为(0.87±0.22)m/s和(0.14±0.06)s,两者比较差异均有统计学意义(均P0.01)。结论膈肌水平腹主动脉低流速低搏动的异常频谱可作为相应先天性心脏病的重要间接声像图征象,可提高超声检出率,避免漏诊。     

外显子捕获-高通量测序技术用于法洛四联症胎儿遗传学检测

目的用外显子捕获-高通量测序(exon-capture high-throughput sequencing,EC-HTS)技术寻找法洛四联症(tetralogy of fallot,TOF)胎儿可能存在的遗传学致病性证据,并探讨其在产前分子遗传学诊断中的价值。方法选择经超声心动图发现且G显带和微阵列比较基因组杂交(array-based comparative genomic hybridization,a CGH)分析结果均正常的9例TOF胎儿作为研究对象,以63个人类已知的先天性心脏病致病基因作为检测靶点制作捕获芯片,用EC-HTS技术进行检测,数据经过Calling、数据库比对、软件分析得到最终病理性突变位点;并用Sanger测序对其进行验证。结果在9例胎儿中共检测到单核苷酸多态性(SNP)位点732个,结果经过生物信息学分析得到致病性突变位点3个:CITED2 c.574_579 del AGCGGC(p.S192_G193del纯合突变,CHD7c.2550_2554 del GAGAA(p.K850Nfs*6)杂合突变,NOTCH2 c.4918TC(p.F1640L)杂合突变。Sanger测序结果验证了这3个突变位点的真实存在,父母溯源检测发现这3个点突变均为新发突变。结论用靶向性EC-HTS技术发现了3例TOF胎儿存在病理性基因突变,可能为其致病的遗传学病因。     

南京地区新生儿高苯丙氨酸血症筛查27年回顾

目的 了解南京地区新生儿高苯丙氨酸血症的发生率、分型、治疗及预后.方法 本研究为回顾性研究.选择1985年9月1日至2012年9月1日共27年在南京地区出生的新生儿,在新生儿出生72h已充分哺乳后采集足跟血,于新生儿出生后20 d内由南京市新生儿疾病筛查中心采用荧光定量法测定血苯丙氨酸浓度.对确诊高苯丙氨酸血症的81例患儿进行四氢生物蝶呤负荷试验、尿蝶呤谱分析和红细胞二氢蝶啶还原酶活性测定以鉴别诊断.治疗随访期间定期监测血苯丙氨酸浓度与智能发育水平,并进行苯丙氨酸羟化酶基因突变分析.采用方差分析、LSD法和Pearson相关性分析等统计学方法研究血苯丙氨酸浓度与智能发育的关系.结果 (1)南京地区新生儿高苯丙氨酸血症的发生率为1/8800(81/712 818),确诊的81例高苯丙氨酸血症患儿中苯丙氨酸羟化酶缺乏症78例(96.3％),其中经典型苯丙酮尿症37例,轻度苯丙酮尿症23例,轻度高苯丙氨酸症18例；四氢生物蝶呤缺乏症3例(3.7％),均为6-丙酮酰四氢蝶呤合成酶缺乏症.(2)81例高苯丙氨酸血症患儿中8例放弃治疗,其中2例死亡,6例患儿均存在不同程度的智能发育落后,1例合并癫痫；6例治疗过程中失访；坚持治疗的67例高苯丙氨酸血症患儿末次随访年龄为3个月～26岁.55例接受智能发育评估的患儿中5例患儿智能发育异常(智商＜75分).(3)智能发育水平与血苯丙氨酸控制浓度呈负相关(r=-0.53,P＜0.05),与血苯丙氨酸初始浓度无相关性(r=-0.39,P＞0.05).(4) 20例接受苯丙氨酸羟化酶基因突变分析患儿共携带18种PAH基因突变,其中突变频率最高的为EX6-96A＞G和R241C(34.28％).结论 南京地区新生儿高苯丙氨酸血症的发生率高于全国平均水平.早期诊断并规范治疗的患儿90％以上智能发育正常.南京地区PAH基因的突变热点为EX6-96A＞G和R241C,与其他地区有所不同.     

利用自体混合骨粉行上鼓室乳突填塞术

目的对利用软骨和混合骨粉行上鼓室乳突填塞术的方法和效果进行评价。方法对2006～2009年间27例中耳胆脂瘤患者，利用软骨和混合骨粉行上鼓室乳突填塞术的手术方法、手术结果、术腔情况作回顾性分析。结果27例患者中，男23例，女4例，平均年龄29．9岁，平均最长随访时间20.6个月，术后干耳时间短，外耳道形态良好，复发率低。结论中耳胆脂瘤可以在彻底清除病灶的基础上利用自体骨粉、骨片、软骨进行填塞，以尽量保持外耳道正常形态，减少术后术腔麻烦，并且可以防止术后内陷囊袋的形成，预防胆脂瘤复发。     

膀胱憩室结石合并双侧输尿管开口于憩室的超声表现1例

患者男,62岁,因"排尿不畅,夜尿增多2年,血尿2～3 d"来院就诊.入院查体:心肺(一),腹软,无压痛及反跳痛,双肾区扣痛(一),双下肢无明显水肿.直肠指检:前列腺Ⅱ度增生,质中,中央沟变浅,无压痛,未触及明显结节.尿常规:蛋白     

蚁参蠲痹胶囊中5个成分测定及HPLC指纹图谱建立

目的:测定蚁参蠲痹胶囊中桂皮醛、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、苍术素、丹参酮Ⅱ_A 5个成分的含量,并建立蚁参蠲痹胶囊HPLC指纹图谱。方法:以丹参酮Ⅱ_A为内参物,建立桂皮醛、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和苍术素的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评(QAMS),同时采用外标法测定3批蚁参蠲痹胶囊中上述5个化学成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证QAMS法的准确性;色谱条件：采用Kromasil 100-5 C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以乙腈-0.02%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长270 nm,柱温20℃。采用HPLC法,建立蚁参蠲痹胶囊HPLC指纹图谱,对共有峰进行归属,通过相似度评价、聚类分析、主成分分析对指纹图谱进行评价;色谱条件：采用Agilent 5 TC-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以乙腈-0.02%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长32...