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71.
目的探讨体外转染TRKC基因的神经干细胞的制备方法。方法利用自行合成的引物进行PCR反应,定向克隆构建TRKC-cDNA质粒并进行DNA测序分析,将pEGFP-C1质粒和TRKC-cDNA质粒进行酶切、重组,构建出pEGFP-C1-TRKC质粒。用脂质体将重组质粒转染到体外培养的大鼠神经干细胞中。用W estern b lot、免疫荧光和MTT法观察转染基因的表达和转基因后神经干细胞的增殖活性。结果成功构建了TRKC-cDNA质粒,DNA测序证明所获得的目的基因与公布序列的一致性为99%,所获得的重组子符合研究要求。pEGFP-C1-TRKC质粒转染到神经干细胞后,宿主细胞能高效、稳定地表达目的基因产物GFP和TRKC。在NT-3作用下转TRKC基因神经干细胞的增殖活性有明显增强。结论以质粒为载体、脂质体为介导可成功地把TRKC基因转染到神经干细胞内,转染基因表达好且具有功能。 相似文献
72.
目的:研究细胞焦亡在琴叶榕根的不同溶剂提取物保护急性酒精性肝损伤中的作用。方法:56只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组,模型组,水飞蓟宾组(60 mg·kg-1),鲜药水提物组(48 g·kg-1),干药水提物组(48 g·kg-1),干药50%醇提物组(48 g·kg-1),干药95%醇提物组(48 g·kg-1),每组8只。其中水飞蓟宾和不同溶剂的琴叶榕提取物,各组小鼠灌胃给药18 d,正常组与模型组小鼠灌胃给予等体积的纯水。灌胃给药15 d后,模型组、水飞蓟宾组和各个琴叶榕根提取物组小鼠给予50%乙醇(12 mL·kg-1)灌胃,建立急性酒精性肝损伤模型。末次造模结束后禁食14 h后摘眼球取血,开腹取肝脏,计算肝脏指数,苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织病理学变化;试剂盒检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;硫代巴比妥酸(TBA)法检测肝脏丙二醛(MDA)含量,微板法检测乳酸脱氢酶(LDH)水平;肝脏组织切片末端标记法(TUNEL)染色检测肝细胞焦亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞焦亡相关蛋白。结果:与正常组比较,模型组ALT,AST,MDA,LDH水平显著升高,肝脏指数显著升高,TUNEL染色阳性、炎症因子、焦亡相关蛋白表达显著升高(P0. 05);与模型组比较,各个琴叶榕根提取物给药干预组小鼠ALT,AST,MDA,LDH水平均明显下降(P0. 05),肝脏指数有不同程度的下降,TUNEL染色阳性、炎症因子、焦亡相关蛋白表达水提物处理组明显下降(P0. 05);肝脏病理切片表明,琴叶榕根提取物能改善小鼠急性酒精肝损伤肝组织病理学变化。结论:琴叶榕根提取物对急性酒精性肝损伤具有一定的保护作用,且其水提物作用机制可能与焦亡通路相关。 相似文献
73.
74.
目的探讨右心室室性心动过速患者时域法微伏级T波电交替(MTWA)特征及其临床意义。方法采用活动平板时域法分别对35例致心律失常性右心室心肌病(ARVC)患者[其中男性28例,平均年龄(38.6±11,0)岁]、10例特发性右心室室性心动过速(IRVT)患者[其中男性7例,平均年龄(41.9±15.4)岁]和60例健康对照者[男性42例,平均年龄(41.0±14.9)岁]进行MTWA检测,记录胸前V1~V6导联的MTWA值,确定胸前各导联的最大值,以Max Valt表示。分析比较不同组别各导联MTWA值及Max Valt值的差异。结果ARVC组各导联MTWA值和Max Valt值均明显高于对照组(P〈0.01);IRVT组各导联的MTWA值和Max Valt值比对照组升高,但差异无统计学意义(P〉0.05);ARVC组和IRVT组比较,V4导联MTWA值及MaxVah值明显较高(P〈0.05);接受者操作特性(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析表明,以Max Valt〉11.5μV鉴别诊断ARVC的敏感性为74.3%,特异性为80.0%;ARVC组中,近一年内有持续性室速发生的患者较无室速发作患者V2~V6导联的MTWA值以及Max Valt值的差异有统计学意义。结论渐量修正平均时域法检测显示,ARVC患者MTWA值和Max Valt值均明显升高.MTWA佰可以反映ARVC患者近期室性心动过速的发作。 相似文献
75.
南极科考队员绝大多数时间只能生活在科考站类似于空间站的狭小空间里,队员极易发生心理障碍[1-3].队员易出现睡眠障碍、负性情感、人际关系紧张等心理变化,尤其是越冬期间,队员表现为活力降低[4-7]. 相似文献
76.
77.
钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定 总被引:7,自引:1,他引:6
目的 研究和探讨钩藤药材中钩藤碱与异钩藤碱的最佳提取与含量测定方法.方法 采用Phenomenex C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇-0.01 mmol·L-1三乙胺水溶液(70:30,冰醋酸调pH 7.0)为流动相;流速:0.5 mL·min-1;柱温:30℃;进样器温度:5℃;检测波长为245 nm,测定和考察钩藤不同时间的水煎液和不同条件下甲醇冷浸超声提取液中主要有效成分钩藤碱和异钩藤碱含量的变化.结果 钩藤碱回归方程Y=76.7170X-0.0727(r=0.999 8),在2.5~80.0μg·mL-1范围内线性关系良好,平均加样回收率99.84%~116.91%,RSD小于8.8%;异钩藤碱回归方程Y=87.4729X-0.3666(r=0.999 7),在2.0~80.0μg·mL-1范围内线性关系良好,平均加样回收率87.08~104.97%,RSD小于7.3%;甲醇冷浸超声提取液中钩藤碱与异钩藤碱的提取率大约是水煎液中的十倍.在甲醇提取工艺中,影响提取率的因素从大到小依次为超声时间、甲醇用量、冷浸时间,经正交实验优选的最佳提取工艺为用20倍质量的甲醇,冷浸24h,超声60min.结论 钩藤药材中有效成分钩藤碱与异钩藤碱的提取,采用甲醇冷浸超声法优于水煎法.该含量测定方法快速、简便、准确,可为评价钩藤药材的质量提供依据. 相似文献
78.
目的:建立痔消栓的HPLC含量测定方法。方法:采用HPLC法,以KromasilC18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱为固定相,以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,柱温23℃,检测波长为203nm。结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1分别在0.368~2.76μg,0.676~5.07μg,0.812~6.09μg范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9999,0.9999,0.9998,平均加样回收率分别为98.53%,99.20%,99.35%,RSD分别为2.11%,1.88%,2.38%。结论:样品分离效果好,测定结果准确、可靠,重复性好,可用于痔消栓的质量控制。 相似文献
79.
丹参—三七药对不同配伍比例对丹参素含量的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨丹参—三七药对不同配伍比例(3∶1、2∶1、1∶1)前后丹参素含量的变化。方法:采用高效液相法测定丹参—三七药对常用配伍比例(3∶1、2∶1、1∶1)前后丹参素的含量。色谱柱:Luna C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:甲醇—冰醋酸—水(11∶1∶89);检测波长:280nm;流速:1.0mL/min;柱温:室温;理论塔板数按丹参素色谱峰计大于5000。结果:丹参素在0.08μg~1.6μg范围内线性关系良好,r=0.9994,平均回收率为98.4%,RSD为2.0%(n=6)。丹参—三七不同比例配伍前后丹参素的含量无明显变化。结论:本研究建立的丹参素含量测定方法简便准确,重复性好,可用于丹参及其制剂质量标准的控制;共煎液中,三七对丹参素的溶出率无明显影响。 相似文献
80.
目的 检测宫颈癌组织Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)、丝氨酸/精氨酸富集剪接因子3(serine and arginine rich splicing factor 3,SRSF3)蛋白表达情况,探讨YAP1、SRSF3蛋白表达与临床病理参数及预后的关系.方法 81例宫颈癌... 相似文献