TRKC基因体外转染大鼠神经干细胞的方法

目的探讨体外转染TRKC基因的神经干细胞的制备方法。方法利用自行合成的引物进行PCR反应,定向克隆构建TRKC-cDNA质粒并进行DNA测序分析,将pEGFP-C1质粒和TRKC-cDNA质粒进行酶切、重组,构建出pEGFP-C1-TRKC质粒。用脂质体将重组质粒转染到体外培养的大鼠神经干细胞中。用W estern b lot、免疫荧光和MTT法观察转染基因的表达和转基因后神经干细胞的增殖活性。结果成功构建了TRKC-cDNA质粒,DNA测序证明所获得的目的基因与公布序列的一致性为99%,所获得的重组子符合研究要求。pEGFP-C1-TRKC质粒转染到神经干细胞后,宿主细胞能高效、稳定地表达目的基因产物GFP和TRKC。在NT-3作用下转TRKC基因神经干细胞的增殖活性有明显增强。结论以质粒为载体、脂质体为介导可成功地把TRKC基因转染到神经干细胞内,转染基因表达好且具有功能。     

基于细胞焦亡探讨琴叶榕提取物对急性酒精性肝损伤的保护机制

目的:研究细胞焦亡在琴叶榕根的不同溶剂提取物保护急性酒精性肝损伤中的作用。方法:56只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组,模型组,水飞蓟宾组(60 mg·kg-1),鲜药水提物组(48 g·kg-1),干药水提物组(48 g·kg-1),干药50%醇提物组(48 g·kg-1),干药95%醇提物组(48 g·kg-1),每组8只。其中水飞蓟宾和不同溶剂的琴叶榕提取物,各组小鼠灌胃给药18 d,正常组与模型组小鼠灌胃给予等体积的纯水。灌胃给药15 d后,模型组、水飞蓟宾组和各个琴叶榕根提取物组小鼠给予50%乙醇(12 mL·kg-1)灌胃,建立急性酒精性肝损伤模型。末次造模结束后禁食14 h后摘眼球取血,开腹取肝脏,计算肝脏指数,苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织病理学变化;试剂盒检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;硫代巴比妥酸(TBA)法检测肝脏丙二醛(MDA)含量,微板法检测乳酸脱氢酶(LDH)水平;肝脏组织切片末端标记法(TUNEL)染色检测肝细胞焦亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞焦亡相关蛋白。结果:与正常组比较,模型组ALT,AST,MDA,LDH水平显著升高,肝脏指数显著升高,TUNEL染色阳性、炎症因子、焦亡相关蛋白表达显著升高(P0. 05);与模型组比较,各个琴叶榕根提取物给药干预组小鼠ALT,AST,MDA,LDH水平均明显下降(P0. 05),肝脏指数有不同程度的下降,TUNEL染色阳性、炎症因子、焦亡相关蛋白表达水提物处理组明显下降(P0. 05);肝脏病理切片表明,琴叶榕根提取物能改善小鼠急性酒精肝损伤肝组织病理学变化。结论:琴叶榕根提取物对急性酒精性肝损伤具有一定的保护作用,且其水提物作用机制可能与焦亡通路相关。     

复方首乌藤合剂对小鼠的促智作用研究

目的研究复方首乌藤合剂对小鼠的促智活性。方法采用跳台法。结果复方首乌藤合剂能增强自然衰老小鼠的学习和记忆能力,并对分别由东莨菪碱、亚硝酸钠和40%乙醇引起的小鼠记忆获得、记忆巩固和记忆再现病理模型有较明显的改善作用。结论复方首乌藤合剂中含有促智活性物质,它可能是本品具有良好临床疗效的物质基础。     

丹参—三七药对不同配伍比例对丹参素含量的影响

目的:探讨丹参—三七药对不同配伍比例(3∶1、2∶1、1∶1)前后丹参素含量的变化。方法:采用高效液相法测定丹参—三七药对常用配伍比例(3∶1、2∶1、1∶1)前后丹参素的含量。色谱柱:Luna C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:甲醇—冰醋酸—水(11∶1∶89);检测波长:280nm;流速:1.0mL/min;柱温:室温;理论塔板数按丹参素色谱峰计大于5000。结果:丹参素在0.08μg~1.6μg范围内线性关系良好,r=0.9994,平均回收率为98.4%,RSD为2.0%(n=6)。丹参—三七不同比例配伍前后丹参素的含量无明显变化。结论:本研究建立的丹参素含量测定方法简便准确,重复性好,可用于丹参及其制剂质量标准的控制;共煎液中,三七对丹参素的溶出率无明显影响。     

中药外洗结合西药外用治疗扁平疣临床观察

目的观察中药煎液外洗联合咪喹莫特乳膏和0.05%维A酸霜外涂治疗扁平疣的疗效。方法采用随机方法将149例患者分3组:A组47例给予单纯的中药煎液外洗;B组45例给予外涂咪喹莫特乳膏和0.05%维A酸霜;C组57例给予中药煎液外洗,联合0.05%维A酸霜和咪喹莫特乳膏外涂。结果 C组有效率明显高于A、B两组(P均<0.01)。结论中西药结合治疗扁平疣可取得较好的疗效,值得临床应用。     

奥氮平诱导性肥胖大鼠血清和纹状体TNF—α表达变化

目的观察奥氮平诱导性肥胖大鼠血清和大脑纹状体肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量的影响。方法40只SD雄性大鼠随机分为对照组和奥氮平组,各20只,前者采用普通饲料喂养,后者在普通饲粮喂养基础上灌胃奥氮平（1．2mg·kg^-1）4周建立奥氮平诱导肥胖大鼠。采用酶联免疫测定法测定血清中TNF-α的含量,生化比色法测定血清葡萄糖（FBS）含量,对脑组织采用HE染色观察形态学变化,采用免疫组织化学方法观察两组大鼠脑组织中TNF-α的表达。结果与对照组比较,奥氮平组大鼠的体重、血糖、血脂和血清TNF-α水平和纹状体TNF-α蛋白表达均有不同程度的升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论奥氮平可以导致大鼠体重增加,糖脂代谢紊乱,血清及纹状体TNF-α升高,通过调节TNF-α异常变化可能改善奥氮平诱导肥胖大鼠中枢摄食活动。     

颅底软骨肉瘤的诊治与预后(7例报告)

目的 探讨颅底软骨肉瘤的诊治方法及长期疗效.方法 回顾性分析近10年间在华山医院神经外科手术治疗且病理证实的7例颅底软骨肉瘤.手术以颅底外科硬膜外入路为首选.配合放射治疗.结果 7例患者共施行8次手术治疗.术后肿瘤全切除者2例,次全切除3例,大部切除2例.所有患者术后神经系统损害均未加重.病理为粘液性软骨肉瘤3例,间叶性软骨肉瘤4例.粘液性软骨肉瘤经手术及放疗后无死亡,生存26～123个月.而间叶性软骨肉瘤术后平均生存期仅12.75个月.结论 颅底外科手术及术后放疗是颅底软骨肉瘤主要的治疗方法.粘液性软骨肉瘤治疗效果较间叶性软骨肉瘤佳,尽量全切除肿瘤结合放疗可获得较好预后.问叶性软骨肉瘤预后极差,复发快,死亡率高.     

热休克蛋白与缺血性脑损伤

热休克蛋白的表达是脑缺血中一种重要的应激反应,与神经细胞缺血性损伤密切相关,被认为对神经元具有保护作用。本文综述热休克蛋白的生物学特性与其在脑缺血后不同细胞中的表达及影响因素,并阐述其与缺血后病理生理改变的关系。     

团体心理咨询改善南极科考队员心理状况的效果

南极科考队员绝大多数时间只能生活在科考站类似于空间站的狭小空间里,队员极易发生心理障碍[1-3].队员易出现睡眠障碍、负性情感、人际关系紧张等心理变化,尤其是越冬期间,队员表现为活力降低[4-7].